MG132

Le MG-132 présente une activité >1000 fois supérieure à celle du ZLLal pour inhiber l'activité de dégradation de la ZLLL-MCA du 20S proteasome avec une IC50 de 100 nM contre 110 μM. Ce composé inhibe également la calpaïne avec une IC50 de 1,2 μM. Ce produit chimique induit la croissance des neurites dans les cellules PC12 à une concentration optimale de 20 nM, affichant une puissance 500 fois supérieure à celle du ZLLal. [1] Ce composé (10 μM) inhibe puissamment l'activation du NF-κB induite par le TNF-α, la transcription du gène de l'interleukine-8 (IL-8) et la libération de la protéine IL-8 dans les cellules A549 par inhibition de la dégradation de l'IκBα médiée par le proteasome. [2] Ce traitement chimique induit puissamment l'apoptose dépendante de p53 dans les cellules KIM-2 par l'inhibition du 26S proteasome. [3] Contrairement au BzLLLCOCHO ou au PS-341, le traitement avec ce composé entraîne une faible inhibition des activités de la chymotrypsine (CT-L) et de l'hydrolyse du peptide peptidylglutamyle (PGPH) du 26S proteasome, tandis que les cellules de myélome multiple (U266 et OPM-2) sont plus sensibles à l'induction de l'apoptose par ce produit chimique que le BzLLLCOCHO. [4] Ce composé (1 μM) sensibilise les cellules cancéreuses de la prostate résistantes au TRAIL en activant les membres de la famille AP-1 c-Fos et c-Jun, qui, à leur tour, répriment la molécule anti-apoptotique c-FLIP(L). [5] Ce produit chimique améliore considérablement la capacité de l'inositol hexakisphosphate (IP6) à réduire l'activité métabolique cellulaire dans les lignées cellulaires de cancer de la prostate indépendantes des androgènes (AIPCa) PC3 et DU145. [6]

L'administration de MG-132 restaure efficacement les niveaux d'expression et la localisation à la membrane plasmique de la dystrophine, de la β-dystroglycane, de l' α-bdystroglycane et de l' α-sarcoglycane dans les fibres musculaires squelettiques de souris mdx, réduit les lésions de la membrane musculaire et améliore les signes histopathologiques de la dystrophie musculaire. [7] Le traitement avec ce composé réduit significativement l'atrophie musculaire squelettique induite par l'immobilisation chez la souris, en régulant à la baisse les ubiquitine ligases spécifiques aux muscles atrogin-1/MAFbx et l'ARNm de MuRF-1. [8]

• Mesure des activités inhibitrices du MG-132 contre le proteasome 20S

  Le mélange réactionnel pour le test d'inhibition du proteasome 20S contient 0,1 M Tris-acétate, pH 7,0, du proteasome 20S, du MG-132 et 25 μM de substrat dissous dans du diméthylsulfoxyde dans un volume final de 1 mL. Après incubation à 37 °C pendant 15 minutes, la réaction est arrêtée par l'addition de 0,1 mL de SDS à 10 % et de 0,9 mL de Tris-acétate à 0,1 M, pH 9,0. La fluorescence des produits de réaction est mesurée. Pour déterminer l'IC50 contre le proteasome 20S, diverses concentrations de ce composé sont incluses dans le mélange d'essai.

• Lignées cellulaires

  KIM-2, HC11, and ES

• Concentrations

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~25 μM

• Temps dincubation

  24 and 48 hours

• Méthode

  Cells are exposed to various concentrations of MG-132 for 24, and 48 hours. Supernatant and monolayer cells are harvested by centrifugation and fixed in 70% ethanol in PBS for staining with acridine orange. Equal volumes of cells and acridine orange (5 mg/mL in PBS) are mixed on a microscope slide and examined by fluorescence microscopy. For annexin V analysis, cells are harvested by centrifugation and stained with annexin V and propidium iodide. For cell cycle analysis, cells are rehydrated in PBS at room temperature for 10 minutes, followed by staining with propidium iodide (5 mg/mL). All samples are analyzed using a Coulter Epics XL flow cytometer.

• Modèles animaux

  Male mdx (C57BL/10ScSn DMD mdx) mice

• Dosages

  ~10 μg/kg/day

• Administration

  Injection