SKI II

SKI II inhibe puissamment les activités SK endogènes dans la lignée cellulaire de cancer du sein MDA-MB-231. Ce composé démontre des effets antiprolifératifs significatifs dans les lignées cellulaires cancéreuses humaines, y compris T-24, MCF-7, MCF-7/VP, NCI/ADR avec des CI50 de 4,6 μM, 1,2 μM, 0,9 μM et 1,3 μM, respectivement. Il induit également l'apoptose des cellules T24, ce qui est cohérent avec la conséquence supposée de la réduction des niveaux de S1P. [1] Comme démontré précédemment dans les cellules MDA-MB-231, cette substance chimique diminue la formation de S1P dans les cellules JC de manière concentration-dépendante, avec une CI50 de 12 μM. [2]

SKI II (50 mg/kg) après administration intrapéritonéale ou orale diminue significativement la croissance tumorale dans un modèle de tumeur solide de souris Balb/c syngénique utilisant des cellules d'adénocarcinome mammaire JC par rapport aux groupes témoins sans toxicité ou perte de poids manifeste.[2] Ce composé (50 mg/kg ip) améliore l'hyperréactivité bronchique des muscles lisses induite par l'antigène chez les souris en inhibant de manière endogène la génération de S1P. [4]

• Test SK

  Un test à débit moyen adapté au criblage d'inhibiteurs de la SK humaine recombinante a été établi. En bref, 5 μg de protéine de fusion GST-SK purifiée sont combinés avec 12 nM de sphingosine, qui contient une dilution au centième de [3-³H]sphingosine (20 Ci/mmol), 1 mM d'ATP, 1 mM de chlorure de magnésium et 200 μL de tampon de test [20 mM Tris HCl (pH 7,4), 20 % de glycérol, 1 mM de bêta-mercaptoéthanol, 1 mM d'EDTA, 20 mM de chlorure de zinc, 1 mM d'orthovanadate de sodium, 15 mM de fluorure de sodium et 0,5 mM de 4-désoxypyridoxine]. Les tests sont réalisés pendant 30 min à 25 °C avec agitation et contiennent soit 1 % de DMSO, soit 5 g/mL du composé testé, ce qui correspond à des concentrations de 10 à 25 μM. Les réactions sont arrêtées avec 50 μL d'hydroxyde d'ammonium concentré, suivi de l'extraction du mélange de test avec du chloroforme:méthanol (2:1). La partie aqueuse est transférée dans des flacons de scintillation et la radioactivité est quantifiée comme mesure de la formation de [³H]]S1P à l'aide d'un compteur à scintillation Beckman LS 3801. Le coefficient de variation intra-essai est d'environ 10 %, tandis que la variation inter-essais est d'environ 20 %.

• Lignées cellulaires

  T-24, MCF-7, MCF-7/VP, NCI/ADR cell lines

• Concentrations

  ~50 μM

• Temps dincubation

  48 hours

• Méthode

  T24, MCF-7, MCF-7/VP, and NCI/ADR cells are plated into 96-well tissue culture plates at ~15% confluency. After 24 hours, cells are treated with various concentrations of this compound. After an additional 48 hours, cell survival is assayed using the sulforhodamine B assay.

• Modèles animaux

  JC xenografts are established in mice

• Dosages

  ~100 mg/kg

• Administration

  Intraperitoneal administration or oral administration