BMS-754807

BMS-754807 remt effectief de groei van een breed scala aan menselijke tumorcellijnen van verschillende histologische oorsprong, waaronder mesenchymale (Ewing's, rhabdomyosarcoom, neuroblastoom en liposarcoom), epitheliale (borst, long, pancreas, colon en maag) en hematopoëtische (multipel myeloom en leukemie), waarbij de IC50-waarden variëren van 5 nM tot 365 nM voor de meest gevoelige cellijnen. Deze verbinding remt de proliferatie van IGF-1R-Sal-cellen en RH41-cellen met een IC50 van 7 nM en 5 nM. Het remt de fosforylering van IGF-1R in IGF-1R-Sal-cellen, Rh41 en Geo met een IC50 van 13 nM, 6 nM en 21 nM. Deze chemische stof remt de fosforylering van Akt in IGF-1R-Sal-cellen, Rh41 en Geo met een IC50 van 22 nM, 13 nM en 16 nM. Het induceert een grotere apoptose in Rh41-cellen na 24 uur, zoals aangegeven door een verhoogde sub-G1-piek (23,1%), vergeleken met controle (2,4%). [1] Deze verbinding remt de fosforylering van IGF-1R (IC50 = 13nM) en de stroomafwaartse doelwitten Akt (IC50 = 22nM) en MAPK (IC50 = 13nM) in de IGF-Sal-cellijn met een IC50 die consistent is met de antiproliferatieve IC50 (7 nM) in deze cellijn. De kristalstructuur van deze verbinding, gecokristalliseerd met het kinase domein van IGF-1R, toont aan dat de donor/acceptor/donor waterstofbrug-triade met Met1052 en Glu1050 zich bevindt binnen de scharnierregio van het kinase. [2] Het vertoont een mediane EC50-waarde van 0,62 μM tegen 23 cellijnen in het pediatrische preklinische testprogramma (PPTP). [3]

BMS-754807 (12,5 mg/kg, oraal) remt de IGF-1R-fosforylering in tumor en serum in naakte muizen met IGF-1R-Sal-tumoren. Deze verbinding remt de tumorgroei in een geselecteerde groep epitheliale (IGF-1R-Sal, GEO en Colo205), hematopoëtische (JJN3) en mesenchymale (RD1 en Rh41) xenograft-tumormodellen met een TGI variërend van 53% tot 115%. [1] Het (6,25 mg/kg) bewerkstelligt volledige tumorgroeiremmening in het transgeen-afgeleide IGF-Sal-tumormuismodel met gecorreleerde remming van pIGF-1R en pAKT. De eiwitbinding voor deze chemische stof varieert van 98,5% in muizenplasma tot 95,9% in menselijk plasma. Het resulteert in een klaring van 113 (mL/min)/kg, 20 (mL/min)/kg, 3,5 (mL/min)/kg en 41 (mL/min)/kg. [2] Deze verbinding (25 mg/kg) remt de tumor significant in KT-5 (Wilms), KT-14 (rhabdoïd), Rh28 (rhabdomyosarcoom) en OS-1 xenograft-muismodellen. [3]

• Kinaseremmingstesten

  De primaire screening voor BMS-754807 is een in vitro kinasetest met recombinant humaan IGF-1-receptorenzym in biochemische assays met synthetisch peptide KKSRGDYMTMQIG als fosfoacceptorsubstraat. Het selectiviteitsprofiel wordt geëvalueerd tegen meerdere recombinante enzymen die bij BMS worden gegenereerd of extern worden aangekocht. De enzymatische assays worden uitgevoerd in 384-well U-bodemplaten met een reactievolume van 30 μL in assaybuffer (100 mM Hepes pH 7.4, 10 mM MgCl₂, 0.015% Brij35 en 4 mM DTT). De 60 minuten durende reacties worden geïnitieerd door ATP (concentratie equivalent aan K_m ATP), 1,5 μM gelabeld peptidesubstraat, enzym en deze verbinding te combineren. De reacties worden beëindigd met EDTA. De reactiemengsels worden geanalyseerd op de Caliper LabChip 3000 door elektroforetische scheiding van het fluorescerende substraat en gefosforyleerd product. Remmingsgegevens worden berekend door vergelijking met enzymvrije controlereacties voor 100% remming en vehiculum-alleen reacties voor 0% remming. Verbindingen worden opgelost in DMSO, 10mM stamoplossing en geëvalueerd bij elf concentraties. IC50-waarden worden afgeleid door niet-lineaire regressieanalyse van de dosis-respons krommen.

• Cellijnen

  IGF-1R-Sal, RH41 and Geo cell lines

• Concentraties

  365 nM

• Incubatietijd

  72 hours

• Methode

  Cells are grown at their optimal density in RPMI +GlutaMax supplemented with 10% heat-inactivated fetal bovine serum (FBS). Cell proliferation is evaluated by incorporation of ³H-thymidine into DNA after exposure of cells to this compound for 72 hours. Results are expressed as an IC50, which is the drug concentration required to inhibit cell proliferation by 50% compared with untreated control cells.

• Dierlijke modellen

  IGF-1R-Sal, GEO, Colo205, JJN3, RD1 or Rh41 tumor–bearing nude mice

• Doseringen

  150 mg/kg

• Toediening

  Orally