A-674563 HCl

Catalogusnr.S2670 Batch:S267001

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C22H22N4O.CIH
Molecuulgewicht 394.9 CAS-nr. 2070009-66-2
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 72 mg/mL (182.32 mM)
Water 72 mg/mL (182.32 mM)
Ethanol 18 mg/mL (45.58 mM)
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
Saline

Gevalideerd door Selleck labs. Mocht u aanpassingen aan deze formulering nodig hebben, neem dan contact op met ons verkoopteam voor maatwerktesten.

 30.000mg/ml (75.97mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 30 mg of this product to 1 ml of physiological saline (0.9% NaCL solution), mix evenly to make it clear, The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving A-674563 HCl is een Akt1-remmer met een Ki van 11 nM in celvrije assays, matig potent ten opzichte van PKA en >30-voudig selectief voor Akt1 boven PKC.
Doelen
Akt1
(Cell-free assay)		 PKA
(Cell-free assay)		 CDK2
(Cell-free assay)		 GSK-3β
(Cell-free assay)		 ERK2
(Cell-free assay)		 Meer bekijken
11 nM(Ki) 16 nM(Ki) 46 nM(Ki) 110 nM(Ki) 260 nM(Ki)
In vitro

A-674563 HCl wordt verkregen uit A-443654 door de indoolgroep te vervangen door een fenylgroep en zo orale activiteit te verkrijgen. A-674563 vertraagt de proliferatie van tumorcellen met een EC50 van 0,4 The kinase assay uses His-Akt1 and a biotinylated mouse Bad peptide as substrate. The kinase assay is carried out at room temperature for 30 minutes in 50 M. A-674563 remt de Akt-fosforylering niet op zichzelf, maar blokkeert de fosforylering van Akt-downstreamtargets op een dosisafhankelijke manier. De door A-674563 geïnduceerde Akt-blokkade resulteert in verminderde STS-cel-downstreamtargetfosforylering en remming van de groei van tumorcellen. A-674563 induceert G2-celcyclusarrest en apoptose in STS-cellen.

In Vivo

A-674563 vertoont geen significante monotherapie-tumorremmende activiteit; de werkzaamheid van de combinatietherapie is significant verbeterd in vergelijking met monotherapie. Met A674563 behandelde (20 mg/kg/bid, p.o.) muizen vertonen een langzamere tumorgroei en een daling van meer dan 50% in het tumorvolume aan het einde van de studie in vergelijking met de controlegroep. A-674563 is geïdentificeerd met een drastisch verbeterd PK-profiel met een orale biologische beschikbaarheid van 67% bij muizen, maar is 70 keer minder actief dan A-443654.

Functies Oraal biologisch beschikbaar middel (verkregen door de indoolgroep van A-443654 te vervangen door een fenylgroep) en iets minder selectief voor Akt boven PKA dan A-443654.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:

[1]
  • Akt Kinase Assay

    De kinase-assay maakt gebruik van His-Akt1 en een gebiotinyleerd muizen Bad-peptide als substraat. De kinase-assay wordt uitgevoerd bij kamertemperatuur gedurende 30 minuten in 50 M. The kinase assay uses His-Akt1 and a biotinylated mouse Bad peptide as substrate. The kinase assay is carried out at room temperature for 30 minutes in 50 L reactiebuffer [20 mM HEPES, pH 7,5, 10 mM MgCl2, 0,1% (m/v) Triton X-100, 5 L reactiebuffer [20 mM HEPES, pH 7.5, 10 mM MgCl2, 0.1% (w/v) Triton X-100, 5 M ATP (Km = 40 M ATP (Km = 40 M), 5 M), 5 M peptide (Km = 15 M peptide (Km = 15 M), 1 mM DTT, 60 ng Akt1 en 0,5 M), 1 mM DTT, 60 ng of Akt1, and 0.5 Ci [γ-33P]ATP] in aanwezigheid van verschillende concentraties A-674563. Elke reactie wordt gestopt door toevoeging van 50 Ci of [ 33P]ATP] in the presence of different concentrations of A-674563. Each reaction is stopped by adding 50 L terminatiebuffer (0,1 M EDTA, pH 8,0 en 4 M NaCl). De gebiotinyleerde Bad-peptiden worden geïmmobiliseerd op streptavidine-gecoate FLASH-platen. Na te zijn gewassen met PBS-Tween 20 (0,05%), wordt het 33P-fosfopeptide, gevangen op de FLASH-platen, gemeten met een TopCount Packard Instruments γ-teller.
Celassay:

[1]
  • Cellijnen

    MiaPaCa-2 cells

  • Concentraties

    0-30 μM

  • Incubatietijd

    48 hours

  • Methode

    The cells on 96-well plates are gently washed with 200 μL of PBS. Alamar Blue reagent is diluted 1:10 in normal growth media. The diluted Alamar Blue reagent (100 M) is added to each well on the 96-well plates and incubated until the reaction is complete as per manufacturer's instructions. Analysis is done using an fmax Fluorescence Microplate Reader, set at the excitation wavelength of 544 nm and emission wavelength of 595 nm. Data are analyzed using SOFTmax PRO software provided by the manufacturer.
Dierstudie:

[1]
  • Dierlijke modellen

    Fasted mice

  • Doseringen

    20 or 100 mg/kg

  • Toediening

    A-674563 is administered 30 minutes before the 1 g/kg glucose challenge.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15956255/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20582381/
  • http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2932704/

Klantproductvalidatie

<p>B cells were pre-treated with the indicated concentrations of A-674563 for 1h prior to R848 treatment (500 ng/ml).  Thymidine incorporation was analyzed 24h later.</p>

, 2012 , Lee lay hoon from National University of Singapore

<p>Akt1 and Akt2 isoforms are required for Wnt5a-induced RhoA activity. a, c Human osteosarcoma cells MG-63 (a) and U20S (c), serum-deprived for 24 h, were pre-treated with 10 nmol/L MK-2206 (Akt inhibitor) for 1 h, were incubated with 100 ng/mL Wnt5a and harvested at 30 min after the start of Wnt5a treatment. The relative RhoA activity was normalized to the average value of LY294002/Wnt5a-untreated group. b, d Serum-deprived MG-63 (b) and U20S cells (d) were pre-treated with 10 nmol/L A-674563 (Akt1 inhibitor) and 10 nmol/L CCT128930 (Akt2 inhibitor) for 1 h, then were incubated with 100 ng/mL Wnt5a and harvested at 30 min after the start of Wnt5a treatment. Data were presented as mean ± SD of 3 determinations. The relative RhoA activity was normalized to the average value of each inhibitor-untreated group</p>

, , Cancer Cell Int, 2017, 17:27

Cell survival was determined using a WST-1 assay in the human lung cancer cells A549 A. and NCI-H358 B. following treatment with either an AKT1 specific inhibitor, A-674563 (black circle and line) or a pan-AKT inhibitor MK-2206 (gray square and line). *p < 0.05.

Gegevens van [ , , Oncotarget, 2016, 7(3):3297-316 ]

Sellecks A-674563 HCl Is geciteerd door 29 Publicaties

Medium from human iPSC-derived primitive macrophages promotes adult cardiomyocyte proliferation and cardiac regeneration [ Nat Commun, 2025, 16(1):3012] PubMed: 40148355
Disruption of lysosomal nutrient sensing scaffold contributes to pathogenesis of a fatal neurodegenerative lysosomal storage disease [ J Biol Chem, 2024, 300(2):105641] PubMed: 38211816
Methionine adenosyltransferase2A inhibition restores metabolism to improve regenerative capacity and strength of aged skeletal muscle [ Nat Commun, 2023, 14(1):886] PubMed: 36797255
Functional restoration of lysosomes and mitochondria through modulation of AKT activity ameliorates senescence [ Exp Gerontol, 2023, 173:112091] PubMed: 36657533
Antagonistic effect of cyclin-dependent kinases and a calcium-dependent phosphatase on polyglutamine-expanded androgen receptor toxic gain of function [ Sci Adv, 2023, 9(1):eade1694] PubMed: 36608116
Integrative analysis of drug response and clinical outcome in acute myeloid leukemia [ Cancer Cell, 2022, S1535-6108(22)00312-9] PubMed: 35868306
Reducing Akt2 in retinal pigment epithelial cells causes a compensatory increase in Akt1 and attenuates diabetic retinopathy [ Nat Commun, 2022, 13-1:6045] PubMed: 36229454
Cyclin B/CDK1 and Cyclin A/CDK2 phosphorylate DENR to promote mitotic protein translation and faithful cell division [ Nat Commun, 2022, 13(1):668] PubMed: 35115540
Identification of New Vulnerabilities in Conjunctival Melanoma Using Image-Based High Content Drug Screening [ Cancers (Basel), 2022, 14(6)1575] PubMed: 35326726
Akt isoforms differentially provide for chemoresistance in prostate cancer [ Cancer Biol Med, 2021, j.issn.2095-3941.2020.0747] PubMed: 34591413

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.