Opaganib (ABC294640)

Catalogusnr.S7174 Batch:S717401

Afdrukken

Technische gegevens

Formule

C23H25ClN2O
Molecuulgewicht 380.91 CAS-nr. 915385-81-8
Oplosbaarheid (25°C)* In vitro DMSO 76 mg/mL (199.52 mM)
Ethanol 28 mg/mL (73.5 mM)
Water Insoluble
In Vivo (Voeg oplosmiddelen afzonderlijk en in volgorde toe aan het product.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml betekent licht oplosbaar of onoplosbaar.
* Houd er rekening mee dat Selleck de oplosbaarheid van alle verbindingen intern test en de werkelijke oplosbaarheid enigszins kan afwijken van gepubliceerde waarden. Dit is normaal en is te wijten aan lichte batch-tot-batch variaties.
* Verzending op kamertemperatuur (Stabiliteitstests tonen aan dat dit product zonder koelmaatregelen kan worden verzonden.)

Voorbereiden van stamoplossingen

Biologische activiteit

Beschrijving Opaganib (ABC294640) is een oraal biologisch beschikbare en selectieve sphingosine kinase-2 (SphK2) remmer met een IC50 van ongeveer 60 μM. Deze verbinding bevindt zich in fase 1/2.
Doelen
SphK2
(Cell-free assay)
60 μM
In vitro Opaganib (ABC294640) verandert de ceramide/S1P-verhouding aanzienlijk, wat consistent is met remming van SK-activiteit in MDA-MB-231-cellen. Het remt de proliferatie van tumorcellen met IC50-waarden variërend van ongeveer 6 tot 48 μM en belemmert de migratie van tumorcellen gelijktijdig met het verlies van microfilamenten. Deze verbinding induceert niet-apoptotische celdood, morfologische veranderingen in lysosomen, vorming van autofagosomen en een toename van zure blaasjes in A-498-, PC-3- en MDA-MB-231-cellen. In zowel MCF-7- als ER-getransfecteerde HEK293-cellen vermindert het de E2-gestimuleerde ERE-luciferase-activiteit.
In Vivo Opaganib (ABC294640) vermindert significant de tumorgroei bij muizen met mammatumor-xenografts, geassocieerd met uitputting van S1P-niveaus. In ernstig gecombineerde immuundeficiënte muizen met A-498-xenografts vertraagt het de tumorgroei en verhoogt het autofagiemarkers. Deze verbinding beschermt ook tegen levertransplantatie-geïnduceerde ontsteking en cross-talk tussen aangeboren en adaptieve immuniteit, belangrijke gebeurtenissen die graftletsel veroorzaken en verergeren, en verbetert de leverfunctie en overleving.

Protocol (uit referentie)

Kinase-assay:[1]
  • Sphingosine Kinase Assays

    De IC50-waarden voor Opaganib (ABC294640) en DMS worden bepaald door een nieuw ontwikkelde HPLC-gebaseerde SK-activiteitsassay. Kort gezegd, de testverbindingen worden geïncubeerd met recombinant SK1 of SK2 en NBD-Sph in de isozym-selectieve assaybuffers zoals hieronder beschreven, met 1 mg/ml vetzuurvrij bovine serumalbumine, 100 μM ATP en 400 μM MgCl2. Het product, d.w.z. NBD-S1P, wordt gescheiden van NBD-Sph door HPLC als volgt: Waters 2795 HPLC-systeem met een Waters 2495 fluorescentiedetector, C8 Chromolith RP-8e kolom (100 × 4,6 mm), 1 ml/min mobiele fase (acetonitril/20 mM natriumfosfaatbuffer, pH 2,5, bij 45:55). Fluorescentie wordt gemeten met excitatie bij 465 nm en emissie bij 531 nm. De verhouding van NBD-S1P/(NBD-Sph + NBD-S1P) wordt gebruikt als maat voor de SK-activiteit. SK-isozym-selectieve assaybuffers bevatten elk 20 mM Tris, pH 7,4, 5 mM EDTA, 5 mM EGTA, 3 mM β-mercapto-ethanol, 5% glycerol, 1× protease-remmers en 1× fosfatase-remmers. Voor de SK1-assaybuffer wordt 0,25% (eindconcentratie) Triton X-100 toegevoegd; en voor de SK2-buffer wordt 1 M (eindconcentratie) KCl toegevoegd. Assays worden 2 uur bij kamertemperatuur uitgevoerd, waarna een 1,5 volume methanol wordt toegevoegd om de kinase-reactie te beëindigen. Na 10 minuten worden de monsters gecentrifugeerd bij 20.000 g om het neergeslagen eiwit af te pelletten, en de supernatanten worden geanalyseerd door HPLC. In experimenten om de Ki voor remming van SK2 door deze verbinding te bepalen, wordt het ADP Quest-assaysysteem gebruikt om de kinase-activiteit te meten in aanwezigheid van variërende concentraties sphingosine en de verbinding. Om de effecten van Opaganib op cellulaire SK-activiteit te bepalen, worden bijna-confluente MDA-MB-231-cellen 's nachts serum-verhongerd en vervolgens behandeld met variërende concentraties van de verbinding. De cellen worden vervolgens geïncubeerd met [3H]sphingosine bij een eindconcentratie van 1 μM. De cellen nemen de exogene sphingosine op, die wordt omgezet in S1P via SK-activiteit, en [3H]S1P wordt gescheiden van [3H]sphingosine door extractie en gekwantificeerd door scintillatietelling.
Celassay:[1]
  • Cellijnen

    1025LU, Hep-G2, A-498, MCF-7, Caco-2, MDA-MB-231, HT-29, Panc-1, DU145, T24, and SK-OV-3 cell lines

  • Concentraties

    ~50 μM

  • Incubatietijd

    72 h

  • Methode

    To determine the effects of the test compounds on proliferation, cells are plated into 96-well microtiter plates and allowed to attach for 24 h. Varying concentrations of Opaganib (ABC294640) are added to individual wells and the cells are incubated for an additional 72 h. At the end of this period, the number of viable cells is determined by use of the sulforhodamine-binding assay. The percentage of cells killed is calculated as the percentage decrease in sulforhodamine-binding compared with control cultures. Regression analyses of inhibition curves are performed by use of GraphPad Prism.
Dierstudie:[1]
  • Dierlijke modellen

    Female BALB/c mice bearing JC tumors

  • Doseringen

    ~100 mg/kg

  • Toediening

    p.o.

Referenties

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20061445/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20179157/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20861237/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22848628/

Klantproductvalidatie

Macrophages treated with ABC294640 at concentrations of 0, 0.5, 1, 5, 10, 50, or 100 nM. Ratios of OD/OD (NC) are presented as means ± standard deviation. *p < 0.05 vs. NC group (1‰ DMSO).

Gegevens van [ , , Inflammation, 2018, 41(4):1498-1507 ]

Sellecks Opaganib (ABC294640) Is geciteerd door 22 Publicaties

Sphingosine kinase 1 promotes M2 macrophage infiltration and enhances glioma cell migration via the JAK2/STAT3 pathway [ Sci Rep, 2025, 15(1):4152] PubMed: 39900970
Comprehensive metabolomics expands precision medicine for triple-negative breast cancer [ Cell Res, 2022, 10.1038/s41422-022-00614-0] PubMed: 35105939
Injectable cartilage matrix hydrogel loaded with cartilage endplate stem cells engineered to release exosomes for non-invasive treatment of intervertebral disc degeneration [ Bioact Mater, 2022, 15:29-43] PubMed: 35386360
The central role of Sphingosine kinase 1 in the development of neuroendocrine prostate cancer (NEPC): A new targeted therapy of NEPC [ Clin Transl Med, 2022, 12(2):e695] PubMed: 35184376
The sphingosine kinase inhibitor SKI-V suppresses cervical cancer cell growth [ Int J Biol Sci, 2022, 18(7):2994-3005] PubMed: 35541904
Targeting sphingosine kinase 1/2 by a novel dual inhibitor SKI-349 suppresses non-small cell lung cancer cell growth [ Cell Death Dis, 2022, 13(7):602] PubMed: 35831279
Upregulated flotillins and sphingosine kinase 2 derail AXL vesicular traffic to promote epithelial-mesenchymal transition [ J Cell Sci, 2022, 135(7)jcs259178] PubMed: 35394045
Overcoming enzalutamide resistance in metastatic prostate cancer by targeting sphingosine kinase [ EBioMedicine, 2021, 72:103625] PubMed: 34656931
SPHK Inhibitors and Zoledronic Acid Suppress Osteoclastogenesis and Wear Particle-Induced Osteolysis [ Front Pharmacol, 2021, 12:794429] PubMed: 35237148
SphK2/S1P Promotes Metastasis of Triple-Negative Breast Cancer Through the PAK1/LIMK1/Cofilin1 Signaling Pathway [ Front Mol Biosci, 2021, 8:598218] PubMed: 33968977

RETOURBELEID
Selleck Chemicals onvoorwaardelijke retourbeleid zorgt voor een soepele online winkelervaring voor onze klanten. Als u op enigerlei wijze ontevreden bent met uw aankoop, kunt u elk artikel(en) binnen 7 dagen na ontvangst retourneren. In geval van problemen met de productkwaliteit, zowel protocolgerelateerde als productgerelateerde problemen, kunt u elk artikel(en) binnen 365 dagen na de oorspronkelijke aankoopdatum retourneren. Volg de onderstaande instructies bij het retourneren van producten.

VERZENDING EN OPSLAG
Selleck producten worden bij kamertemperatuur vervoerd. Als u het product op kamertemperatuur ontvangt, wees dan gerust, de Selleck kwaliteitsinspectieafdeling heeft experimenten uitgevoerd om te controleren of de normale temperatuurplaatsing van één maand de biologische activiteit van poederproducten niet beïnvloedt. Na ontvangst dient u het product op te slaan volgens de vereisten beschreven in het gegevensblad. De meeste Selleck producten zijn stabiel onder de aanbevolen omstandigheden.

NIET VOOR HUMANE, VETERINAIRE DIAGNOSTISCHE OF THERAPEUTISCHE DOELEINDEN.