LCL161

LCL161 bindt met hoge affiniteit aan inhibitors of apoptosis proteins (IAPs) en initieert de vernietiging van cIAP1 en cIAP2, wat verder apoptose induceert via caspase-activering. Deze verbinding remt bescheiden de groei van FLT3-ITD-expresserende cellen wanneer het alleen wordt toegediend, met een IC50 variërend van ~0,5 μM (Ba/F3-FLT3-ITD-cellen) tot ~4 μM (MOLM13-luc+ cellen). De potentie van dit middel tegen de D835Y-mutant is aanzienlijk hoger, met een IC50 van ~50 nM wanneer getest tegen Ba/F3-D835Y-cellen. Behandeling van MOLM13-luc+ cellen met een combinatie van deze verbinding en PKC412 leidt tot significant meer celdoding dan elk middel afzonderlijk, met Calcusyn combinatietitels die synergie suggereren. PKC412 en dit chemische middel induceren apoptose van MOLM13-luc+ cellen. De combinatie van PKC412 en dit middel leidt tot een hogere inductie van apoptose dan elk middel afzonderlijk. Het is in staat om stroma-gemedieerde redding van mutante FLT3-expresserende cellen te overbruggen door een positieve combinatie met PKC412. Deze verbinding remt de groei van Ba/F3.p210-cellen met een IC50 van ~100 nM.  Het heeft ook activiteit aangetoond tegen medicijnresistente cellen die puntmutaties in de doelwitten tot expressie brengen. Dit middel bij 1000 nM is in staat om Ba/F3-afgeleide cellijnen die resistentie tegen PKC412 verlenen, en die FLT3-ITD met puntmutaties in de ATP-bindingspocket van FLT3 tot expressie brengen, meestal of volledig te doden. Het toont ook activiteit bij concentraties variërend van 100 tot 1000 nM tegen Ba/F3-cellen die verschillende tot expressie brengen. [1]

Deze verbinding wordt geëvalueerd tegen de 23 cellijnen in het Pediatric Preclinical Testing Program (PPTP) in vitro-panel met behulp van 96 uur. Het bereikt 50% groeiremming tegen slechts 3 van de 23 geteste PPTP-cellijnen onder een concentratie van 10 μM. De drie cellijnen omvatten twee T-cel ALL-cellijnen (COG-LL-317 en CCRF-CEM) en een anaplastische grootcellige lymfoomcellijn (Karpas-299), waarbij CCRF-CEM en Karpas-299 de laagste relatieve IC50-waarden tonen (respectievelijk 0,25 en 1,6 μM). [2]

Het vertoont immunomodulerende eigenschappen op menselijke immuunsubsets. T-lymfocyten behandeld met deze verbinding vertonen een significant verhoogde cytokineafscheiding bij activering, met weinig effect op de overleving of proliferatie van CD4- en CD8-T-cellen. Behandeling van perifere bloedmononucleaire cellen met dit middel verhoogt significant de priming van naïeve T-cellen met synthetische peptiden in vitro. Myeloïde dendritische cellen ondergaan fenotypische rijping na dit chemische middel en vertonen een verminderd vermogen om een tumorgebaseerd antigeen-vaccin kruislings te presenteren. Deze effecten worden potentieel gemedieerd door een waargenomen activering van de canonieke en niet-canonieke NF-κB-routes, volgend op deze verbinding met een resulterende opregulatie van anti-apoptotische moleculen. [3]

LCL161 verbetert significant het vermogen van PKC412 om de groei van Ba/F3-FLT3-ITD-luc+-cellen in vivo te remmen. Van deze verbinding is ook aangetoond dat het positief combineert met de standaard chemotherapeutische middelen, Ara-c en doxorubicine, tegen FLT3-ITD-expresserende cellen en tegen D835Y-expresserende cellen. Er wordt een additief effect bereikt door de combinatie van dit chemische middel bij het onderdrukken van leukemie groei. Dit middel (100 mg/kg) verhoogt de in vivo effecten van hoog-matige doses op de leukemiebelasting bij muizen. [1]

Deze verbinding wordt getest tegen de Pediatric Preclinical Testing Program (PPTP) in vivo-panels (30 of 75 mg/kg [vaste tumoren] of 100 mg/kg [ALL]) oraal tweemaal per week toegediend. Het induceert significante verschillen in EFS-distributie in ongeveer een derde van de vaste tumorxenografts (osteosarcoom en glioblastoom), maar niet in ALL-xenografts. Er worden geen objectieve tumorresponsen waargenomen. In vivo toont dit chemische middel beperkte enkelvoudige activiteit tegen de bestudeerde pediatrische preklinische modellen. [2]

• Cellijnen

  Human T-cell ALL cell lines COG-LL-317

• Concentraties

  ~10 μM

• Incubatietijd

  96 hours

• Methode

  In vitro testing is performed using DIMSCAN

• Dierlijke modellen

  CB17SC scid−/− female mice

• Doseringen

  30 mg/kg

• Toediening

  o.g.