uitsluitend voor onderzoeksdoeleinden

Rhodamine 123 ATPase remmer

Cat.Nr.S3577

Rhodamine 123 (RH-123, R-22420) is een fluorescerende kationische dye die wordt gebruikt om mitochondria in levende cellen te labelen. Deze verbinding remt ADP-gestimuleerde ademhaling van mitochondria met Ki = 12 μM en ATPase-activiteit van omgekeerde binnenmembraanvesikels met Ki van 126 μM en gedeeltelijk gezuiverde F1-ATPase met Ki van 177 μM.
Rhodamine 123 ATPase remmer Chemical Structure

Chemische structuur

Moleculair gewicht: 380.82

Ga naar

Kwaliteitscontrole

Batch: S357701 DMSO]76 mg/mL]false]Ethanol]15 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Zuiverheid: 99.79%
99.79

Chemische informatie, Opslag en Stabiliteit

Moleculair gewicht 380.82 Formule
C21H17ClN2O3
Opslag (Vanaf de ontvangstdatum) 3 years -20°C powder
CAS-nr. 62669-70-9 -- Opslag van stamoplossingen

Synoniemen RH-123, R-22420 Smiles Cl.COC(=O)C1=CC=CC=C1C2=C3C=CC(=N)C=C3OC4=C2C=CC(=C4)N

Oplosbaarheid

In vitro
Batch:

DMSO : 76 mg/mL (199.56 mM)
(Met vocht verontreinigde DMSO kan de oplosbaarheid verminderen. Gebruik verse, watervrije DMSO.)

Ethanol : 15 mg/mL

Water : Insoluble

Molariteitscalculator

Massa Concentratie Volume Moleculair gewicht
Verdunningscalculator Moleculair gewicht calculator

In vivo
Batch:

In vivo Formuleringscalculator (Heldere oplossing)

Stap 1: Voer de onderstaande informatie in (Aanbevolen: Een extra dier voor het geval van verlies tijdens het experiment)

mg/kg g μL

Stap 2: Voer de in vivo formulering in (Dit is alleen de calculator, geen formulering. Neem eerst contact met ons op als er geen in vivo formulering is in het gedeelte Oplosbaarheid.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berekeningsresultaten:

Werkconcentratie: mg/ml;

Methode voor het bereiden van DMSO-mastervloeistof: mg geneesmiddel vooraf opgelost in μL DMSO ( Concentratie mastervloeistof mg/mL, Neem eerst contact met ons op als de concentratie de DMSO-oplosbaarheid van de partij geneesmiddel overschrijdt. )

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toeμL PEG300, mengen en helder maken, voeg vervolgens toeμL Tween 80, mengen en helder maken, voeg vervolgens toe μL ddH2O, mengen en helder maken.

Methode voor het bereiden van in vivo formulering: Neem μL DMSO mastervloeistof, voeg vervolgens toe μL Maïsolie, mengen en helder maken.

Opmerking: 1. Zorg ervoor dat de vloeistof helder is voordat u het volgende oplosmiddel toevoegt.
2. Zorg ervoor dat u het/de oplosmiddel(en) in de juiste volgorde toevoegt. U moet ervoor zorgen dat de verkregen oplossing, bij de vorige toevoeging, een heldere oplossing is voordat u verdergaat met het toevoegen van het volgende oplosmiddel. Fysische methoden zoals vortexen, echografie of een warmwaterbad kunnen worden gebruikt om het oplossen te bevorderen.

Werkingsmechanisme

Targets/IC50/Ki
ATPase
(inverted inner membrane vesicles)
126 μM(Ki)
F1-ATPase
(Cell-free assay)
177 μM(Ki)
In vitro

1.Bereiding van Rhodamine 123 werkoplossing
1.1Bereiding van de stockoplossing
Los 1 mg van deze verbinding op in 525 μL DMSO om 5 mM stockoplossing te verkrijgen.
1.2Bereiding van deze chemische werkoplossing
Verdun de stockoplossing in serumvrij celkweekmedium of PBS om 1-20 μM werkoplossing te verkrijgen.
Opmerking: Pas de concentratie van deze compound werkoplossing aan volgens de feitelijke situatie.
2.Celkleuring
2.1 Suspensiecellen (6-wells plaat)
a.Centrifugeer op 1000 g bij 4℃ gedurende 3-5 minuten en gooi vervolgens de supernatant weg. Was tweemaal met PBS, elke keer 5 minuten. De celdichtheid is 1×106/mL.
b.Voeg 1 mL werkoplossing toe en incubeer vervolgens bij kamertemperatuur gedurende 5-30 minuten.
c.Centrifugeer op 400 g bij 4℃ gedurende 3-4 minuten en gooi vervolgens de supernatant weg.
d.Was tweemaal met PBS, elke keer 5 minuten.
e.Resuspendeer cellen met serumvrij celkweekmedium of PBS. Observatie door fluorescentiemicroscopie of flowcytometrie.
2.2 Adherente cellen
a.Kweek adherente cellen op steriele dekglaasjes.
b.Verwijder het dekglaasje uit het medium en aspireer overtollig medium.
c.Voeg 100 μL werkoplossing toe, schud voorzichtig om de cellen volledig te bedekken, en incubeer vervolgens bij kamertemperatuur gedurende 30-60 minuten.
d.Was tweemaal met medium, elke keer 5 minuten. Observatie door fluorescentiemicroscopie of flowcytometrie.
Opmerking: Indien detectie door flowcytometrie, moeten cellen voor kleuring geresuspendeerd worden.

Referenties

Technische ondersteuning

Gebruiksaanwijzing

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Als u nog andere vragen heeft, kunt u een bericht achterlaten.

Gelieve uw naam in te voeren.
Gelieve uw e-mailadres in te voeren. Voer een geldig e-mailadres in.
Schrijf alstublieft iets voor ons.