Home DNA Damage/DNA Repair PARP inhibitor AG-14361

연구용

AG-14361 PARP inhibitor

제품 번호: S2178

AG14361 is a potent inhibitor of PARP1 with Ki of <5 nM in a cell-free assay. It is at least 1000-fold more potent than the benzamides.
AG-14361 PARP inhibitor Chemical Structure

화학 구조

분자량: 320.39

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품질 관리 (Quality Control)

배치: 순도: 99.89%
99.89

세포 배양, 처리 및 작업 농도
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

세포주 분석 유형 농도 배양 시간 제형 활성 설명 PMID
LoVo cells Function assay Concentration that gives 50% growth inhibition in LoVo cells, activity expressed as GI50, GI50=11.2 μM
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화학 정보, 보관 및 안정성 (Chemical Information, Storage & Stability)

분자량 320.39 화학식

C19H20N4O

 보관 (수령일로부터)
CAS 번호 328543-09-5 SDF 다운로드 원액 보관

동의어 N/A Smiles CN(C)CC1=CC=C(C=C1)C2=NC3=CC=CC4=C3N2CCNC4=O

용해도 (Solubility)

In vitro
배치:

DMSO : 51 mg/mL (159.18 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Ethanol : 21 mg/mL

Water : Insoluble

몰농도 계산기

질량 농도 부피 분자량
희석 계산기 분자량 계산기

In vivo
배치:

생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)

1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)

mg/kg g μL

2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

계산 결과:

작업 농도: mg/ml;

DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH2O, 혼합하고 투명하게 합니다.

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.

참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.

작용 메커니즘 (Mechanism of Action)

특징
The 1st high-potency PARP-1 inhibitor with the specificity & in vivo activity to enhance chemotherapy and radiation therapy of human cancers.
Targets/IC50/Ki
PARP1
(Cell-free assay)
<5 nM(Ki)
시험관 내(In vitro)

AG14361은 벤즈아미드보다 최소 1000배 더 강력합니다. 투과 처리된 SW620 세포에서 AG14361의 IC50은 29 nM이고, 온전한 SW620 세포에서는 14 nM입니다. 닭 PARP-1의 촉매 도메인에 결합된 AG14361의 결정학적 분석에 따르면, AG14361의 삼환계 고리 시스템은 Trp861, His862, Gly863, Tyr896, Phe897, Ala898, Lys903, Ser904, Tyr907 및 Glu988 아미노산 잔기로 구성된 포켓에 위치합니다. AG14361은 Ser904 및 Gly863과 중요한 수소 결합을 형성하고 Glu988과는 물 매개 수소 결합을 형성합니다. AG14361로 유도된 성장 억제는 최대 PARP-1 억제가 GI50보다 훨씬 낮은 농도(≤1 μM)에서 관찰되기 때문에 PARP-1 관련 효과에 기인하지 않습니다. 0.4 μM의 AG14361은 암세포 유전자 발현이나 성장에 영향을 미치지 않지만, LoVo 세포에서 항증식 활성을 증가시키고 잠재적으로 치명적인 γ-방사선 손상으로부터의 회복을 73% 억제합니다. 또한, 0.4 μM AG14361은 마이크로어레이 분석에서 나타난 바와 같이 유전자 발현을 실질적으로 변화시키지 않습니다. A549 세포를 0.4 μM AG14361에 17시간 노출해도 6800개 유전자의 발현은 변하지 않습니다. 따라서 0.4 μM AG14361은 세포 PARP-1 활성을 85% 이상 억제하지만 유전자 발현과 세포 증식은 실질적으로 변화시키지 않으며, 이는 이러한 저농도 AG14361의 세포 효과가 PARP-1 억제에 특이적임을 나타냅니다. 더 높은 성장 억제 농도의 AG14361은 유전자 발현에 영향을 미치지만, 이러한 효과는 PARP-/- 세포와 PARP-1+/+ 세포에서 세포 증식이 동일하게 영향을 받기 때문에 PARP-1 억제와 관련이 있을 가능성은 낮습니다. AG14361은 혈류로 빠르게 흡수되어 종양과 간으로 분포되며, 뇌에서는 더 낮은 농도가 검출됩니다. 조직 대 혈장 농도 비율은 AG14361이 두 이종이식 모델 모두에서 시간이 지남에 따라 종양 조직에 잔류함을 나타내며, 종양 농도(≥15 μM, 2시간 동안)는 시험관 내에서 PARP-1 활성을 억제하는 데 필요한 농도를 초과합니다. AG14361은 모든 MMR-적격 세포에서 활성을 강화(1.5–3.3배)하지만 MMR-결핍 세포에서 더 효과적(3.7–5.2배 강화)이며 내성을 극복합니다. 대조적으로, 벤질구아닌은 MMR-적격 세포에서만 효능을 증가시키고 MMR-결핍 세포에서는 효과가 없습니다. AG14361은 토포이소머라아제 I 독의 성장 억제 및 세포 독성 효과를 강화합니다. AG14361은 캄토테신으로 유도된 DNA 단일 가닥 절단의 지속성을 증가시킵니다.

키나아제 분석
PARP-1 활성 분석
전장 재조합 인간 PARP-1의 활성은 20 nM PARP-1, 500 μM NAD+ 및 [32P]NAD+(반응 혼합물당 0.1–0.3 μCi)와 활성화된 송아지 흉선 DNA(10 μg/mL)를 포함하는 반응 혼합물에서 25oC로 측정하며, 반응은 얼음처럼 차가운 10%(wt/vol) 트리클로로아세트산을 첨가하여 4분 후에 종료합니다. 산 불용성 물질에 통합된 반응 생성물 [32P]ADP-ribose는 Bio-Dot 미세 여과 장치를 사용하여 Whatman GF/C 유리 섬유 필터에 증착되고 PhosphorImager로 정량화됩니다. 0–600 nM 농도의 AG14361에 의한 PARP-1 활성 억제가 측정되며, AG14361에 대한 Ki는 비선형 회귀 분석을 통해 계산됩니다.
생체 내(In vivo)

방사선 조사 전 AG-14361 처리는 LoVo 이종이식편을 보유한 마우스의 방사선 치료에 대한 민감도를 통계적으로 유의하게 증가시킵니다. AG-14361은 이종이식편 내의 혈류를 통계적으로 유의하게 증가시켜 종양 이종이식편으로의 약물 전달을 잠재적으로 증가시킵니다. 생체 내(in vivo)에서 독성이 없는 용량의 AG-14361은 X선 조사로 유도된 LoVo 이종이식편의 성장 지연을 2~3배 증가시킵니다. AG-14361을 병용 투여하면 LoVo 이종이식편에 대한 활성이 통계적으로 유의하게 증가하며, 종양 성장 지연은 AG-14361 5 mg/kg 투여 시 3일에서 9일로, 15 mg/kg 투여 시 10일로 증가합니다. AG-14361의 병용 요법은 SW620 이종이식 종양의 완전한 퇴행을 유발합니다. 약력학적 분석으로 검출된 SW620 이종이식편 내 PARP-1 활성은 AG-14361(10 mg/kg)을 복강 내 투여한 후 최소 4시간 동안 75% 이상 억제되는데, 이는 종양 내에 지속되는 AG-14361의 농도와 일치합니다.

참조