Home PI3K/Akt/mTOR PKA inhibitor H-89 Dihydrochloride

연구용

H-89 Dihydrochloride PKA inhibitor

제품 번호: S1582

H 89 2HCl is a potent PKA inhibitor with Ki of 48 nM in a cell-free assay, 10-fold selective for PKA than PKG,500-fold greater selectivity than PKC, MLCK, calmodulin kinase II and casein kinase I/II. H 89 2HCl induces autophagy.
H-89 Dihydrochloride PKA inhibitor Chemical Structure

화학 구조

분자량: 519.28

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품질 관리 (Quality Control)

배치: 순도: 99.48%
99.48

세포 배양, 처리 및 작업 농도
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

세포주 분석 유형 농도 배양 시간 제형 활성 설명 PMID
CHO  Growth Inhibition Assay 10 μM 1 h inhibits 5-HT induced cAMP production decrease 12569069
SK-N-MC Function Assay 30 μM 24 h DMSO reduces the down-regulation of β1-AR by isoproterenol by 50%  11705454
Sf9 Function assay Inhibition of His-tagged human MSK1 expressed in Sf9 cells, IC50 = 0.12 μM. 10998351
Sf9 Function assay Inhibition of rat ROCK2 expressed in Sf9 cells, IC50 = 0.27 μM. 10998351
SF9 Function assay Inhibition of human PKBalpha expressed in SF9 cells, IC50 = 2.6 μM. 10998351
OVCAR8 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human OVCAR8 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 10.5 μM. 24508830
OVCAR8 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human OVCAR8 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 10.5 μM. 24389511
HL60 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human HL60 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 11.4 μM. 24389511
PC3M Function assay Inhibition of GSK3-beta in human PC3M cells by ELISA, IC50 = 15 μM. 18345609
U87MG Growth inhibition assay Growth inhibition of human U87MG cells by SRB assay, IC50 = 15 μM. 18345609
U87MG Antiproliferative assay 96 hrs Antiproliferative activity against human U87MG cells after 96 hrs by SRB assay, IC50 = 15 μM. 20151677
HCT116 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human HCT116 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 15.7 μM. 24508830
HCT116 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human HCT116 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 15.7 μM. 24389511
PC3M Function assay 96 hrs Inhibition of PC3M cells by SRB assay after 96 hrs, GI50 = 18 μM. 17451235
PC3M Growth inhibition assay Growth inhibition of human PC3M cells by SRB assay, IC50 = 18 μM. 18345609
LS174T Function assay 20 uM 6 hrs Inhibition of PGE2-stimulated TCF/LEF transactivation in human LS174T cells at 20 uM measured after 6 hrs by dual luciferase reporter gene assay 27736063
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화학 정보, 보관 및 안정성 (Chemical Information, Storage & Stability)

분자량 519.28 화학식

C20H20BrN3O2S.2HCl

 보관 (수령일로부터)
CAS 번호 130964-39-5 SDF 다운로드 원액 보관

동의어 N/A Smiles C1=CC2=C(C=CN=C2)C(=C1)S(=O)(=O)NCCNCC=CC3=CC=C(C=C3)Br.Cl.Cl

용해도 (Solubility)

In vitro
배치:

DMSO : 100 mg/mL (192.57 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Water : 10 mg/mL

Ethanol : Insoluble

몰농도 계산기

질량 농도 부피 분자량
희석 계산기 분자량 계산기

In vivo
배치:

생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)

1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)

mg/kg g μL

2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

계산 결과:

작업 농도: mg/ml;

DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH2O, 혼합하고 투명하게 합니다.

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.

참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.

작용 메커니즘 (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
PKA
(Cell-free assay)
48 nM(Ki)
S6K1
(Cell-free assay)
80 nM
PKG
(Cell-free assay)
0.48 μM(Ki)
시험관 내(In vitro)

H-89 Dihydrochloride는 48 nM의 Ki를 가진 강력한 PKA (cAMP 의존성) 단백질 인산화효소 억제제로, PKG에 비해 10배, PKC, MLCK, 칼모듈린 인산화효소 II 및 카제인 인산화효소 I/II에 비해 500배 이상의 선택성을 보입니다. forskolin을 첨가하기 1시간 전에 이 화합물(30 μM)로 세포를 전처리하면 forskolin으로 유도된 단백질 인산화를 농도 의존적으로 현저하게 억제합니다. 또한 이 화합물은 S6 Kinase, MSK1, PKA, ROCKII, PKBα 및 MAPKAP-K1b에 대해 각각 80, 120, 135, 270, 2600 및 2800 nM의 IC50으로 다른 여러 인산화효소도 억제합니다. 또한 Kv1.3 K+ 채널, β1AR 및 β2AR을 포함한 일부 세포 수용체 및 이온 채널에서도 활성을 나타냅니다.

키나아제 분석
PKA 효소 활성
cAMP 의존성 PKA 활성은 최종 부피 0.2 mL의 반응 혼합물에서 분석되며, 여기에는 50 mM Tris-HC1 (pH 7.0), 10 mM 마그네슘 아세테이트, 2 mM EGTA, 1 μM cAMP 또는 cAMP 부재, 3.3-20 μM [γ-32P]ATP (4 × 10^5 cpm), 0.5 μg의 효소, 100 μg의 히스톤 H2B 및 표시된 각 화합물이 포함됩니다.
생체 내(In vivo)

H89은 단백질 인산화의 뚜렷한 변형을 유발하며, 가장 강력한 인산화 변화는 fructose-1,6-biphosphatase, heterogeneous nuclear ribonucleoprotein (hnRNP), NSFL1 cofactor p47에서 나타나는데, 이들은 모두 cAMP/PKA와 잠재적인 조절 연결 고리를 가지고 있습니다.

참조
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18523239/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16687476/

적용 분야 (Applications)

방법 바이오마커 이미지 PMID
Western blot p-eNOS / T-eNOS / p-PKA p-GPIbβ / GPIbβ / p-BAD p-S6K1 / p-rpS6 / p-GSK3β
S1582-WB2
31035633
Immunofluorescence p-eNOS / eNOS iNOS / NFκB p65 myopodin
S1582-IF3
30513637