Home PI3K/Akt/mTOR PKA 억제제 H-89 Dihydrochloride

연구용

H-89 Dihydrochloride PKA 억제제

제품 번호: S1582

H 89 2HCl은 무세포 분석에서 48 nM의 Ki를 갖는 강력한 PKA 억제제이며, PKG보다 PKA에 10배 더 선택적이고, PKC, MLCK, 칼모듈린 키나아제 II 및 카세인 키나아제 I/II보다 500배 더 높은 선택성을 나타냅니다. H 89 2HCl은 Autophagy를 유도합니다.
H-89 Dihydrochloride PKA 억제제 Chemical Structure

화학 구조

분자량: 519.28

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품질 관리 (Quality Control)

배치: 순도: 99.48%
99.48

세포 배양, 처리 및 작업 농도
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

세포주 분석 유형 농도 배양 시간 제형 활성 설명 PMID
CHO  Growth Inhibition Assay 10 μM 1 h inhibits 5-HT induced cAMP production decrease 12569069
SK-N-MC Function Assay 30 μM 24 h DMSO reduces the down-regulation of β1-AR by isoproterenol by 50%  11705454
Sf9 Function assay Inhibition of His-tagged human MSK1 expressed in Sf9 cells, IC50 = 0.12 μM. 10998351
Sf9 Function assay Inhibition of rat ROCK2 expressed in Sf9 cells, IC50 = 0.27 μM. 10998351
SF9 Function assay Inhibition of human PKBalpha expressed in SF9 cells, IC50 = 2.6 μM. 10998351
OVCAR8 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human OVCAR8 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 10.5 μM. 24508830
OVCAR8 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human OVCAR8 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 10.5 μM. 24389511
HL60 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human HL60 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 11.4 μM. 24389511
PC3M Function assay Inhibition of GSK3-beta in human PC3M cells by ELISA, IC50 = 15 μM. 18345609
U87MG Growth inhibition assay Growth inhibition of human U87MG cells by SRB assay, IC50 = 15 μM. 18345609
U87MG Antiproliferative assay 96 hrs Antiproliferative activity against human U87MG cells after 96 hrs by SRB assay, IC50 = 15 μM. 20151677
HCT116 Cytotoxicity assay 72 hrs Cytotoxicity against human HCT116 cells assessed as growth inhibition after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 15.7 μM. 24508830
HCT116 Antiproliferative assay 72 hrs Antiproliferative activity against human HCT116 cells after 72 hrs by MTT assay, IC50 = 15.7 μM. 24389511
PC3M Function assay 96 hrs Inhibition of PC3M cells by SRB assay after 96 hrs, GI50 = 18 μM. 17451235
PC3M Growth inhibition assay Growth inhibition of human PC3M cells by SRB assay, IC50 = 18 μM. 18345609
LS174T Function assay 20 uM 6 hrs Inhibition of PGE2-stimulated TCF/LEF transactivation in human LS174T cells at 20 uM measured after 6 hrs by dual luciferase reporter gene assay 27736063
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화학 정보, 보관 및 안정성 (Chemical Information, Storage & Stability)

분자량 519.28 화학식

C20H20BrN3O2S.2HCl

 보관 (수령일로부터)
CAS 번호 130964-39-5 SDF 다운로드 원액 보관

동의어 N/A Smiles C1=CC2=C(C=CN=C2)C(=C1)S(=O)(=O)NCCNCC=CC3=CC=C(C=C3)Br.Cl.Cl

용해도 (Solubility)

In vitro
배치:

DMSO : 100 mg/mL (192.57 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Water : 10 mg/mL (超声加热十分钟，60℃)

Ethanol : Insoluble

몰농도 계산기

질량 농도 부피 분자량
희석 계산기 분자량 계산기

In vivo
배치:

생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)

1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)

mg/kg g μL

2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

계산 결과:

작업 농도: mg/ml;

DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH2O, 혼합하고 투명하게 합니다.

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.

참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.

작용 메커니즘 (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
PKA
(Cell-free assay)
48 nM(Ki)
S6K1
(Cell-free assay)
80 nM
PKG
(Cell-free assay)
0.48 μM(Ki)
시험관 내(In vitro)

H89 2HCl is a potent PKA (cAMP-dependent) protein kinase A inhibitor with Ki of 48 nM, exhibits 10-fold selectivity over PKG, exhibits >500-fold selectivity over PKC, MLCK, calmodulin kinase II and casein kinase I/II. Pretreatment of the cells with this compound (30 μM) 1 h before the addition of forskolin markedly inhibits the forskolin-induced protein phosphorylation in a dose-dependent manner. This compound also inhibits several other kinases with IC50 of 80, 120, 135, 270, 2600 and 2800 nM for S6K1, MSK1, PKA, ROCKII, PKBα and MAPKAP-K1b, respectively. It also has activity at some cellular receptors and ion channels, including Kv1.3 K+ channels,β1AR and β2AR.

키나아제 분석
PKA 효소 활성
cAMP 의존성 PKA 활성은 최종 부피 0.2 mL의 반응 혼합물에서 분석되며, 여기에는 50 mM Tris-HC1 (pH 7.0), 10 mM 마그네슘 아세테이트, 2 mM EGTA, 1 μM cAMP 또는 cAMP 부재, 3.3-20 μM [γ-32P]ATP (4 × 10^5 cpm), 0.5 μg의 효소, 100 μg의 히스톤 H2B 및 표시된 각 화합물이 포함됩니다.
생체 내(In vivo)

H89 causes distinct modifications of protein phosphorylation, with the most robust changes in phosphorylation are fructose-1,6-biphosphatase, heterogeneous nuclear ribonucleoprotein (hnRNP), NSFL1 cofactor p47, all which have potentially regulatory connections to cAMP/PKA.

참조
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18523239/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16687476/

적용 분야 (Applications)

방법 바이오마커 이미지 PMID
Western blot p-eNOS / T-eNOS / p-PKA p-GPIbβ / GPIbβ / p-BAD p-S6K1 / p-rpS6 / p-GSK3β
S1582-WB2
31035633
Immunofluorescence p-eNOS / eNOS iNOS / NFκB p65 myopodin
S1582-IF3
30513637

임상시험 정보 (Clinical Trial Information)

(데이터 출처 https://clinicaltrials.gov, 업데이트 날짜 2020-10-08)

NCT 번호 모집 조건 스폰서/협력자 시작일 단계
NCT03712423 COMPLETED
Solid Tumor
Amsterdam UMC, location VUmc
 2018-04-01 PHASE1