PIK-93 PI4K inhibitor

A novel and potent inhibitor of both PI3Kγ and PI4KIIIβ.

PIK-93 inhibits PI3Kγ and PI4KIIIβ, with IC50 values of 16 nM and 19 nM, respectively. This compound also inhibits other members of PI3Ks, including PI3Kα, β, and δ, with IC50 values of 39 nM, 0.59 μM, and 0.12 μM, respectively. It shows no obvious inhibitory effect against a panel of other kinases, even at a concentration of 10 μM. [1] In differentiated HL60 (dHL60) cells, this compound (0.5 μM–1 μM) impairs consolidation and stability of the leading edge formed after treatment with uniform f-Met-Leu-Phe (fMLP). It alters the localization, but not the amount, of the fMLP-dependent accumulation of total F-actin. In fMLP gradients, this chemical reduces the chemotactic index and triples the cells' turning frequency. [2] In COS-7 cells, this compound (250 nM) effectively abrogates the accumulation of CERT-PH domain and FL-Cer in Golgi. It of the same concentration also significantly inhibits the conversion of [³H]serine-labeled endogenous ceramide to sphingomyelin. These facts indicate a key role of PI4KIIIβ in ceramide transport between the ER and Golgi, as well as in the regulation of spingomyelin synthesis. [3] In T6.11 cells, this compound (300 nM) reduces carbachol-induced translocation of TRPC6 to the plasma membrane and net Ca²⁺ entry. [4] A recent report shows that this chemical has anti-enterovirus effects, as revealed by its inhibition of both poliovirus (PV) and hepatitis C virus (HCV) replication, with EC50 values of 0.14 µM and 1.9 µM, respectively. [5]

PI3Ks 분석

IC50 값은 지질 키나아제 활성에 대한 표준 TLC 분석을 사용하여 측정됩니다. 키나아제 반응은 키나아제, PIK-93(최종 농도 2% DMSO), 완충액(25 mM HEPES, pH 7.4, 10 mM MgCl₂) 및 새로 초음파 처리된 포스파티딜이노시톨(100 µg/ml)을 포함하는 반응 혼합물을 준비하여 수행됩니다. 반응은 10 µCi의 γ-³²P-ATP를 포함하는 ATP를 10 또는 100 µM의 최종 농도로 첨가하여 시작하며, 실온에서 20분 동안 진행합니다. TLC 분석을 위해, 반응은 105 µL의 1N HCl을 첨가한 후 160 µL의 CHCl₃:MeOH(1:1)를 첨가하여 종료합니다. 2상 혼합물을 볼텍싱하고 짧게 원심분리한 다음, CHCl₃로 미리 코팅된 젤 로딩 피펫 팁을 사용하여 유기상을 새 튜브로 옮깁니다. 이 추출물을 TLC 플레이트에 점적하고 65:35 n-프로판올:1M 아세트산 용액에서 3~4시간 동안 전개합니다. 그런 다음 TLC 플레이트를 건조하고 포스포이미저 스크린에 노출하여 정량화합니다. 키나아제 활성은 일반적으로 100 μM의 가장 높은 농도에서 2배 희석을 나타내는 이 화합물의 10~12가지 농도에서 측정됩니다.