Home Cell Cycle Aurora Kinase inhibitor GSK1070916

연구용

GSK1070916 Aurora Kinase inhibitor

제품 번호: S2740

GSK1070916 is a reversible and ATP-competitive inhibitor of Aurora B/C with IC50 of 3.5 nM/6.5 nM. It displays >100-fold selectivity against the closely related Aurora A-TPX2 complex. Phase 1.
GSK1070916 Aurora Kinase inhibitor Chemical Structure

화학 구조

분자량: 507.63

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품질 관리 (Quality Control)

배치: 순도: 99.79%
99.79

세포 배양, 처리 및 작업 농도
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

세포주 분석 유형 농도 배양 시간 제형 활성 설명 PMID
A549 cells Proliferation assay 6-7 d Antiproliferative activity against human A549 cells after 6 to 7 days by celltiter-glo luminescence assay in absence of 70% human serum albumin, EC50=0.007 μM
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화학 정보, 보관 및 안정성 (Chemical Information, Storage & Stability)

분자량 507.63 화학식

C30H33N7O

 보관 (수령일로부터)
CAS 번호 942918-07-2 SDF 다운로드 원액 보관

동의어 N/A Smiles CCN1C=C(C(=N1)C2=CC=C(C=C2)NC(=O)N(C)C)C3=C4C=C(NC4=NC=C3)C5=CC=CC(=C5)CN(C)C

용해도 (Solubility)

In vitro
배치:

DMSO : 102 mg/mL (200.93 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Ethanol : 102 mg/mL

Water : Insoluble

몰농도 계산기

질량 농도 부피 분자량
희석 계산기 분자량 계산기

In vivo
배치:

생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)

1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)

mg/kg g μL

2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

계산 결과:

작업 농도: mg/ml;

DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH2O, 혼합하고 투명하게 합니다.

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.

참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.

작용 메커니즘 (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
Aurora B-INCENP
(Cell-free assay)
3.5 nM
Aurora C-INCENP
(Cell-free assay)
6.5 nM
FLT1
(Cell-free assay)
42 nM
Tie-2
(Cell-free assay)
59 nM
SIK
(Cell-free assay)
70 nM
FLT4
(Cell-free assay)
74 nM
FGFR1
(Cell-free assay)
76 nM
시험관 내(In vitro)
GSK1070916은 Aurora A(Ki 490 nM) 대비 Aurora B 및 Aurora C를 각각 Ki 0.38 nM 및 1.5 nM으로 선택적으로 억제합니다. 이 화합물에 의한 Aurora B 및 Aurora C의 억제는 시간 의존적이며, 효소-억제제 해리 반감기는 각각 480분 및 270분 이상입니다. 또한, 이는 ATP에 대해 경쟁적 억제제로 작용합니다. 이 억제제로 처리된 인간 종양 세포는 Aurora B의 특정 기질인 Histone H3의 세린 10 잔기 인산화에 대한 용량 의존적 억제를 나타냅니다. 또한, 이는 100개 이상의 다양한 종양 유형에 걸쳐 8 nM의 중간 EC50 값으로 10 nM 미만의 EC50 값을 보이며 종양 세포의 증식을 억제합니다. 이 화합물은 증식하는 세포에 대해 강력한 활성을 나타내지만, 분열하지 않는 일차 정상 인간 정맥 내피 세포에서는 효능이 급격히 감소하는 것이 관찰됩니다. 나아가, 이 약제로 처리된 세포는 유사분열에서 정지하지 않고 오히려 분열에 실패하여 다배체화되며, 궁극적으로 세포 사멸로 이어집니다. 다른 연구에서는 Aurora B 및 C 억제에 대한 내성과 관련된 높은 염색체 수가 보고되었으며, 이는 높은 배수성 체크포인트를 우회하는 기전을 가진 세포가 이 화학 물질에 내성을 가짐을 시사합니다.
키나아제 분석
Kinase Assay
GSK1070916의 Aurora 효소 억제 능력은 in vivo kinase assay를 사용하여 측정됩니다. 이 분석법은 Aurora A, Aurora B 및 Aurora C가 합성 펩타이드 기질을 인산화하는 능력을 측정합니다. Biotin-Ahx-RARRRLSFFFFAKKK-NH2는 Aurora A–TPX2 LEADseekerTM 분석에 사용되며, 5FAM-PKAtide는 세 가지 Aurora Kinase 모두에 대한 IMAPTM 분석에 사용됩니다. Aurora 효소의 시간 의존적 억제를 고려하기 위해, Aurora A–TPX2, Aurora B–INCENP 및 Aurora C–INCENP를 기질 첨가로 반응을 시작하기 전 30분 동안 다양한 농도의 이 화합물과 함께 배양합니다. Aurora A LEADseekerTM 분석의 최종 분석 조건은 50 mM Hepes, pH 7.2, 0.15 mg/mL BSA, 0.01% Tween-20, 5 mM DTT, 25 mM KCl 내에서 0.5 nM Aurora A–TPX2, 1 μM 펩타이드 기질, 6 mM MgCl2, 1.5 μM ATP, 0.003 μCi/μL [γ-33P] ATP입니다. 반응물은 실온(25 °C)에서 120분 동안 배양되며, EDTA를 포함하는 PBS 내의 LEADseekerTM 비드를 첨가하여 종료됩니다(비드 최종 농도 2 mg/mL 및 EDTA 25 mM). 그 후 플레이트를 밀봉하고 비드가 하룻밤 동안 가라앉도록 합니다. 생성물 형성은 Viewlux Imager를 사용하여 정량화됩니다. IMAPTM 분석의 경우, Aurora A–TPX2(최종 농도 1 nM), Aurora B–INCENP(최종 농도 2 nM) 또는 Aurora C–INCENP(최종 농도 2.5 nM)를 0.15 mg/mL BSA, 0.01% Tween 20 및 25 mM NaCl을 포함하는 5 μL의 완충액(Aurora A의 경우 25 mM Hepes, pH 7.2; Aurora B의 경우 25 mM Hepes, pH 7.5; Aurora C의 경우 20 mM Hepes, pH 7.2) 내 화합물 포함 플레이트에 첨가합니다. 이 혼합물은 실온에서 30분 동안 배양됩니다. 반응을 시작하기 위해, 사전 배양에 사용된 것과 동일한 Hepes 완충액, 25 mM NaCl, MgCl2(Aurora A, B, C에 대해 각각 2, 4, 4 mM), DTT(Aurora A, B, C에 대해 각각 4, 4, 2 mM), ATP(Aurora A, B, C에 대해 각각 4, 4, 10 μM), 200 nM 5FAM-PKAtide, 0.01% Tween 20 및 0.15 mg/mL BSA를 포함하는 5 μL의 기질 용액을 첨가합니다. 반응물은 Aurora A 및 B의 경우 120분, Aurora C의 경우 60분 동안 실온에서 배양됩니다. 그런 다음 이 반응은 95% Progressive Binding Buffer A와 5% Progressive Binding Buffer B에 용해된 1:500(Aurora C의 경우 1:600)의 Progressive Binding Reagent 10 μL를 첨가하여 종료됩니다. 플레이트는 실온에서 약 90~120분 동안(평형에 도달할 때까지) 배양됩니다. 플레이트는 형광 편광 모드의 Molecular Devices Analyst 플레이트 판독기로 판독됩니다.
생체 내(In vivo)
GSK1070916(25, 50 또는 100 mg/kg)은 마우스에서 Aurora Kinase B 특이적 기질의 인산화를 용량 의존적으로 억제하며, 광범위한 세포 활성과 일관되게 이 화합물은 유방암, 대장암, 폐암 및 두 가지 백혈병 모델을 포함한 10가지 인간 종양 이종이식 모델에서 항종양 효과를 나타냅니다.
참조