Home PI3K/Akt/mTOR mTOR inhibitor WAY-600

연구용

WAY-600 mTOR inhibitor

제품 번호: S2689

WAY-600 is a potent, ATP-competitive and selective inhibitor of mTOR with IC50 of 9 nM; this compound blocks mTORC1/P-S6K(T389) and mTORC2/P-AKT(S473) but not P-AKT(T308); it is selective for mTOR than PI3Kα (>100-fold) and PI3Kγ (>500-fold).
WAY-600 mTOR inhibitor Chemical Structure

화학 구조

분자량: 494.59

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품질 관리 (Quality Control)

배치: S268901 DMSO]22 mg/mL]false]Ethanol]2 mg/mL]false]Water]Insoluble]false 순도: 99.34%
99.34

화학 정보, 보관 및 안정성 (Chemical Information, Storage & Stability)

분자량 494.59 화학식

C28H30N8O

 보관 (수령일로부터)
CAS 번호 1062159-35-6 SDF 다운로드 원액 보관

동의어 N/A Smiles C1CN(CCC1N2C3=C(C=N2)C(=NC(=N3)C4=CC5=C(C=C4)NC=C5)N6CCOCC6)CC7=CN=CC=C7

용해도 (Solubility)

In vitro
배치:

DMSO : 22 mg/mL (44.48 mM)
(수분으로 오염된 DMSO는 용해도를 감소시킬 수 있습니다. 신선하고 무수 DMSO를 사용하십시오.)

Ethanol : 2 mg/mL

Water : Insoluble

몰농도 계산기

질량 농도 부피 분자량
희석 계산기 분자량 계산기

In vivo
배치:

생체 내 제형 계산기 (투명한 용액)

1단계: 아래 정보 입력 (권장: 실험 중 손실을 고려하여 추가 동물 포함)

mg/kg g μL

2단계: 생체 내 제형 입력 (이것은 계산기일 뿐 제형이 아닙니다. 용해도 섹션에 생체 내 제형이 없는 경우 먼저 당사에 문의하십시오.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

계산 결과:

작업 농도: mg/ml;

DMSO 원액 준비 방법: mg 약물 사전 용해 μL DMSO ( 원액 농도 mg/mL, 농도가 해당 약물 배치의 DMSO 용해도를 초과하는 경우 먼저 당사에 문의하십시오. )

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가μL PEG300, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가μL Tween 80, 혼합하고 투명하게 한 다음 추가 μL ddH2O, 혼합하고 투명하게 합니다.

생체 내 제형 준비 방법: 취하다 μL DMSO 원액, 다음 추가 μL 옥수수 기름, 혼합하고 투명하게 합니다.

참고: 1. 다음 용매를 추가하기 전에 액체가 투명한지 확인하십시오.
2. 용매를 순서대로 추가해야 합니다. 다음 용매를 추가하기 전에 이전 추가에서 얻은 용액이 투명한 용액인지 확인해야 합니다. 와동, 초음파 또는 뜨거운 물 중탕과 같은 물리적 방법을 사용하여 용해를 도울 수 있습니다.

작용 메커니즘 (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
mTOR
9 nM
시험관 내(In vitro)
Immune-complex kinase assay는 mTORC2 특이적 기질인 His6-AKT 또는 mTORC1 기질인 His6-S6K가 WAY-600에 의해 용량 의존적으로 억제됨을 보여줍니다. 이 화합물은 세포 모델에서 mTOR 신호 전달과 AKT 기능을 용량 의존적으로 전반적으로 억제합니다. 이는 인간 유방암 세포주인 MDA361에서 cap 의존적 및 전체 단백질 합성을 심도 있게 억제합니다. 이 화학 물질은 G1 세포 주기 정지와 선택적 세포 사멸을 포함하여 다양한 암 세포주에서 항증식 효과를 나타냅니다. 또한 U87MG, MDA361 및 LNCap 세포에서 혈관 신생 인자인 VEGF와 HIF-1α를 하향 조절합니다.
키나아제 분석
정제된 FLAG-TOR의 DELFIA 형식
정제된 FLAG-TOR(FL 및 3.5)를 이용한 일상적인 분석은 96-웰 플레이트에서 다음과 같이 수행됩니다. 효소는 먼저 키나아제 분석 완충액(10 mM Hepes(pH 7.4), 50 mM NaCl, 50 mM β-글리세로포스페이트, 10 mM MnCl2, 0.5 mM DTT, 0.25 lM 마이크로시스틴 LR 및 100 lg/mL BSA)에 희석됩니다. 각 웰에 12 μL의 희석된 효소를 0.5 μL의 시험 억제제 또는 대조군 비히클인 디메틸 설폭사이드(DMSO)와 간단히 혼합합니다. 키나아제 반응은 ATP와 His6-S6K가 포함된 12.5 μL의 키나아제 분석 완충액을 첨가하여 시작하며, 최종 반응 부피 25 μL에는 800 ng/mL FLAG-TOR, 100 μM ATP 및 1.25 μM His6-S6K가 포함됩니다. 반응 플레이트는 실온에서 부드럽게 흔들어주며 2시간(1~6시간 동안 선형) 동안 배양한 후 25 μL의 정지 완충액(20 mM Hepes(pH 7.4), 20 mM EDTA 및 20 mM EGTA)을 첨가하여 종료합니다. 인산화된(Thr-389) His6-S6K에 대한 DELFIA 검출은 Europium-N1-ITC(Eu)(항체당 10.4 Eu)로 표지된 단일클론 항-P(T389)-p70S6K 항체(1A5)를 사용하여 실온에서 수행됩니다. 종료된 키나아제 반응 혼합물 45 μL를 55 μL PBS가 포함된 MaxiSorp 플레이트로 옮깁니다. His6-S6K가 2시간 동안 부착되도록 한 다음 웰의 내용물을 흡입하고 PBS로 1회 세척합니다. 40 ng/mL Eu-P(T389)-S6K 항체가 포함된 100 μL의 DELFIA 완충액을 첨가합니다. 항체 결합은 부드럽게 교반하며 1시간 동안 계속됩니다. 그 후 웰의 내용물을 흡입하고 0.05% Tween 20이 포함된 PBS(PBST)로 4회 세척합니다. 100 μL의 DELFIA Enhancement 용액을 각 웰에 첨가하고 PerkinElmer Victor 모델 플레이트 리더에서 플레이트를 읽습니다. 얻어진 데이터는 잠재적 억제제에 의한 효소 활성 및 효소 억제를 계산하는 데 사용됩니다.
참조