(2-Hydroxypropyl)-β-cyclodextrin (HP-β-CD)

HP-β-CD 분자는 세포에 독성이 없을 뿐만 아니라, Aβ 섬유화(fibrillization)를 크게 억제하고 농도 의존적으로 Aβ 유발 독성을 감소시켰습니다. HP-β-CD 농도가 너무 낮으면 Aβ와의 상호작용이 불충분했고, HP-β-CD 농도가 너무 높으면 HP-β-CD가 불활성 종으로 자가 응집되었습니다. HP-β-CD는 Aβ의 특정 소수성 잔기와 우선적으로 상호작용하여, Aβ 올리고머가 펩타이드 신장 및 측면 결합을 통해 성숙한 섬유로 더 이상 성장하는 것을 방지했습니다[1].

HP-β-CD는 뛰어난 생체 적합성으로 인해 약물 전달 시스템, 환경 정화, 식품 첨가물 및 약물 요법에 널리 사용되어 왔습니다. HP-β-CD는 BBB를 쉽게 통과하여 신경 세포를 표적화할 수 있습니다[1]. HP-β-CD는 시험된 동물 종(쥐, 생쥐 및 개)에서 특히 경구 투여 시 잘 내약되었으며 제한적인 독성만을 보였습니다. 쥐와 개에게 단회 200 mg/kg 정맥 주사 후, 14C-HP-β-CD는 신속하게(4시간 이내 90% 이상) 거의 완전히 온전한 화합물 형태로 주로 신장 배설을 통해 제거되었습니다. 분변 및 호기 중 배설은 미미했습니다. 혈장 제거 반감기는 쥐에서 0.4시간, 개에서 0.8시간이었습니다. 쥐와 개 모두에서 HP-β-CD 경구 투여 후, 86%가 두 종 모두에서 분변을 통해 배설되었고, 5% 미만이 소변으로 배설되었습니다. 절대 생체 이용률은 개에서 3.3%, 쥐에서는 더 낮은 것으로 추정되었습니다. 쥐와 개 모두에서 정맥 투여 후 조직 분포는 제한적이었습니다. 쥐에서는 신장과 폐에서 가장 높은 농도가 발견되었고, 개에서는 신장과 간에서 가장 높은 농도가 발견되었습니다. 건강한 지원자에게 단회 정맥 및 경구 투여 후, 미변화 HP-β-CD의 혈장 농도는 빠르게 감소했으며 이단계적 감소를 보였습니다. 전임상 연구에서 45% w/v HP-β-CD 수성 투여 운반체의 활용은 매우 일반적입니다. 이 운반체는 수용성이 낮은 약물에 유용합니다[2].

• 세포주

  SH-SY5Y cell line

• 농도

  25, 50, 125, and 250 μM

• 배양 시간

  24 and 48 h

• 방법

  Cells that was cultured at 37 ℃ in the mixture of sterile-filtered Eagle's minimum essential medium and Ham's F-12 medium mixed at a 1 : 1 ratio with 10% fetal bovine serum, 1% penicillin/streptomycin and humidified air with 5% CO2 was employed as a model neuron. Cells were cultured to confluence and harvested using 0.25 mg/mL trypsin/EDTA solution. Before adding Aβ1-42 and HP-β-CD, cells were resuspended in Opti-MEM reduced serum medium and counted using a hemocytometer. Cells were then plated in a 96-well tissue culture plate with approximately 100 000 cells per well in 200 μL medium. To determine the cell viability, colorimetric MTT metabolic activity assay was performed. SH-SY5Y cells were cultured in a 96-well plate at 37 1C. Then, Aβ1-42, HP-β-CD and Aβ1-42-HP-β-CD solutions were individually added to the cultured cells, which were then continually cultured for additional 24 h and 48 h. After removing the supernatant of each well, 20 μL of MTT solution (5 mg/mL in PBS) and 100 mL of medium were then added into the systems. After incubation for another 4 h, the formazan crystals were dissolved in dimethyl sulfoxide (150 μL) and the absorbance intensity was measured using a microplate reader at 570 nm.