데이터시트

생물학적 설명

특이성	8-Hydroxy-2'-deoxyguanosine Antibody [K11E8]는 내인성 및 외인성 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8-OH-dG)을 모두 검출합니다.
배경	8-하이드록시-2'-데옥시구아노신(8-OHdG)은 DNA의 C8 위치에서 구아닌 염기의 수산화에 의해 형성되는 변형된 퓨린 2'-데옥시리보뉴클레오사이드로, 일반적으로 활성산소종(ROS)에 의해 발생하는 산화적 손상에서 비롯됩니다. 구조적으로는 구아닌 고리의 8번 탄소에 하이드록실기가 있는 데옥시구아노신 분자로 구성됩니다. 8-OHdG는 산화적 DNA 손상 중 높은 유병률로 인해 산화 스트레스의 주요 바이오마커로 널리 인정받고 있습니다. 이는 핵 및 미토콘드리아 DNA 모두에 축적되며, 소변, 조직 및 백혈구 DNA를 포함한 다양한 생물학적 샘플에서 측정될 수 있습니다. 기능적으로 8-OHdG는 내인성 DNA 손상의 지표 역할을 하며, 암, 노화 및 퇴행성 질환의 위험과 진행을 평가하는 데 광범위하게 사용되었습니다. 그 존재는 산화성 물질에 대한 세포 노출을 반영하며, 환경 및 생활 습관 요인이 게놈 안정성에 미치는 영향을 평가하는 데 중요한 역할을 합니다.

특이성

8-Hydroxy-2'-deoxyguanosine Antibody [K11E8]는 내인성 및 외인성 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8-OH-dG)을 모두 검출합니다.

배경

8-하이드록시-2'-데옥시구아노신(8-OHdG)은 DNA의 C8 위치에서 구아닌 염기의 수산화에 의해 형성되는 변형된 퓨린 2'-데옥시리보뉴클레오사이드로, 일반적으로 활성산소종(ROS)에 의해 발생하는 산화적 손상에서 비롯됩니다. 구조적으로는 구아닌 고리의 8번 탄소에 하이드록실기가 있는 데옥시구아노신 분자로 구성됩니다. 8-OHdG는 산화적 DNA 손상 중 높은 유병률로 인해 산화 스트레스의 주요 바이오마커로 널리 인정받고 있습니다. 이는 핵 및 미토콘드리아 DNA 모두에 축적되며, 소변, 조직 및 백혈구 DNA를 포함한 다양한 생물학적 샘플에서 측정될 수 있습니다. 기능적으로 8-OHdG는 내인성 DNA 손상의 지표 역할을 하며, 암, 노화 및 퇴행성 질환의 위험과 진행을 평가하는 데 광범위하게 사용되었습니다. 그 존재는 산화성 물질에 대한 세포 노출을 반영하며, 환경 및 생활 습관 요인이 게놈 안정성에 미치는 영향을 평가하는 데 중요한 역할을 합니다.

사용 정보

응용

IHC-P

희석

IHC

1:100 - 1:200

반응성

Species independent

출처

Mouse Monoclonal Antibody

MW

보관 완충액

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

보관
(수령일로부터)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

실험 방법
IHC	Experimental Protocol： Deparaffinization/Rehydration 1. Deparaffinize/hydrate sections: 2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each. 3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each. 4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each. 5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each. 6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min. Staining 1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each. 2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min. 3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 4. Wash sections in wash buffer for 5 min. 5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature. 6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C. 7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each. 8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature. 9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each. 10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use. 11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity. 12. Immerse slides in dH2O. 13. If desired, counterstain sections with hematoxylin. 14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each. 16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

실험 방법

IHC

Experimental Protocol：

Deparaffinization/Rehydration

1. Deparaffinize/hydrate sections:

2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.

3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.

4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.

5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.

6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.

Staining

1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.

2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.

3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

4. Wash sections in wash buffer for 5 min.

5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.

6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.

7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.

8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.

9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.

10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.

11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.

12. Immerse slides in dH2O.

13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.

14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.

16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

참조

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19412858/

적용 데이터

IHC

Selleck 검증

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human colorectal cancer tissue with F1714 at 1:50 dilution.