Atazanavir (BMS-232632) Sulfate

Atazanavir는 바이러스 감염된 H9 세포에서 IC50이 ~47 nM인 바이러스 gag 전구체 p55 폴리단백질의 단백질 분해성 절단을 억제합니다. Atazanavir는 RF/MT-2 균주에서 EC50이 3.89 nM인 강력한 항바이러스 활성을 나타냅니다. [1]. Atazanavir는 IC50이 2.4 μM인 빌리루빈 글루쿠론산화 억제제인 것으로 나타났습니다. Atazanavir는 재조합 UGT1A1을 1.9 μM의 Ki로 억제합니다. [2] Atazanavir는 U251, T98G 및 LN229 교모세포종 세포주에서 세포 성장을 억제하며, GRP78 및 CHOP 단백질 수준이 현저하게 증가합니다. Atazanavir는 U251 교모세포종 세포에서 다양한 크기의 폴리유비퀴틴화 단백질의 현저한 증가를 유발합니다. [3] Atazanavir는 또한 인간 20S Protease를 26 μM의 IC50으로 억제합니다. Atazanavir (30 μM)는 HepG2 세포에서 ER 스트레스와 UPR 유전자 발현의 크기를 변화시킵니다. [4] Atazanavir (30 mM)는 LS180V 세포에서 세포내 Rh123 감소와 함께 면역 반응성 P-gp 발현을 2.5배 증가시킵니다. [5]

• Protease 분석

  각 Prt 억제제에 대한 억제 상수(Ki)를 결정하기 위해, 정제된 HIV-1 RF 야생형 Prt (2.5 nM)를 반응 버퍼(1 M NaCl, 1 mM EDTA, 0.1 M 아세트산 나트륨 [pH 5.5], 0.1% 폴리에틸렌 글리콜 8000)에서 Atazanavir의 유무에 관계없이 1 μM 내지 15 μM의 형광성 기질과 함께 37 ℃에서 배양합니다. 기질의 절단은 Cytofluor 4000을 사용하여 340 nM 여기 후 490 nM에서 형광 방출 증가를 측정하여 정량화됩니다. 반응은 1.36 μM, 1.66 μM, 2.1 μM, 3.0 μM, 5.0 μM 또는 15 μM 기질과 5가지 농도의 Atazanavir (1.25 nM ~ 25 nM) 존재 하에 수행됩니다. 기질 절단은 30분 동안 5분 간격으로 모니터링됩니다. 절단 속도는 반응 초기 시점에서 각 샘플에 대해 결정되며, Ki 값은 결과적인 Michaelis-Menten 플롯의 기울기에서 결정됩니다.

• 세포주

  RF/MT-2 strains

• 농도

  15 nM

• 배양 시간

  6 days

• 방법

  To determine cytotoxicity, host cells are incubated in the presence of serially diluted Atazanavir for 6 days and cell viability is quantitated using an XTT[2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl-2H-tetrazolium-5-carboxanilide] assay to calculate the 50% cytotoxic concentrations (CC50s). To assess the effect of human serum proteins on antiviral activity, the 10% fetal calf serum normally used for assays is replaced with 40% adult human serum or 1 mg of α1-acid glycoprotein/mL.