Bafetinib

Bafetinib은 K562 및 293T 세포에서 각각 11 nM 및 22 nM의 IC50으로 WT Bcr-Abl 자가인산화 및 그 하위 키나아제 활성을 차단합니다. 이 화합물은 Bcr-Abl-음성 U937 세포주의 증식에 영향을 미치지 않으면서 K562, KU812 및 BaF3/wt 세포를 포함한 Bcr-Abl-양성 세포주의 성장을 강력하게 억제합니다. 또한, BaF3/E255K 세포와 같은 Bcr-Abl 점 돌연변이 세포주에 대해 용량 의존적인 항증식 효과를 나타냅니다. [1] Bcr-Abl+ 백혈병 세포주에서 이 화학 물질은 Bcr-Abl의 인산화를 차단함으로써 캐스파제 매개 및 캐스파제 비의존적 세포 사멸을 모두 유도합니다. [2]

Bcr-Abl 양성 KU812 마우스 모델에서 Bafetinib (0.2 mg/kg/일)은 종양 성장을 유의하게 억제하고, 20 mg/kg/일에서는 부작용 없이 종양 성장을 완전히 억제합니다. Balb/c 마우스의 경우, 이 화합물은 200 mg/kg/일의 최대 내약 용량과 32%의 생체 이용률(BA) 값을 보입니다. [1] Ba/F3/wt bcr-ablGFP, Ba/F3/Q252H 또는 Ba/F3/M351T 세포를 지닌 중추신경계(CNS) 백혈병 모델에서 이 화학물질(60 mg/kg)과 CsA(50 mg/kg)의 병용 치료는 이 화합물 단독 또는 CsA 단독보다 뇌 백혈병 성장을 더 유의하게 억제합니다. [3]

• 키나아제 분석

  Bcr-Abl 키나아제 분석은 SignaTECT 단백질 티로신 키나아제 분석 시스템을 사용하여 250 μM 펩타이드 기질, 740 Bq/μL [γ-³³P]ATP 및 20 μM 차가운 아데노신 삼인산(ATP)을 포함하는 25 μL 반응 혼합물에서 수행됩니다. 각 Bcr-Abl 키나아제는 10 nM의 농도로 사용됩니다. Abl, Src 및 Lyn 키나아제 분석은 효소 결합 면역 흡착 분석(ELISA) 키트로 수행됩니다. 79개 티로신 키나아제에 대한 이 화합물의 억제 효과는 KinaseProfiler로 테스트됩니다.

• 세포주

  K562, BaF3/wt, BaF3/E255K, and BaF3/T315I cells

• 농도

  0-10 μM

• 배양 시간

  72 hours

• 방법

  K562, BaF3/wt, BaF3/E255K, and BaF3/T315I cells are plated at 1 × 10³ in 96-well plates, whereas KU812 and U937 cells are plated at 5 × 10³ in 96-well plates. Cells are incubated with serial dilutions of Bafetinib for 3 days. Cell proliferation is measured by MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide; Nacalai Tesque) assay, and the 50% inhibitory concentration (IC50) values are calculated by fitting the data to a logistic curve.

• 동물 모델

  KU812 xenograft is established by subcutaneous injection of KU812 cells into the right flank of Balb/c-nu/nu female mice.

• 용량

  ≤20 mg/kg/day

• 투여

  Administered via p.o.