Danoprevir

카탈로그 번호S1183 배치:S118301

인쇄

기술 자료

화학식

C35H46FN5O9S
분자량 731.83 CAS 번호 850876-88-9
용해도 (25°C)* 시험관 내(In vitro) DMSO 144 mg/mL (196.76 mM)
Ethanol 144 mg/mL (196.76 mM)
Water Insoluble
생체 내(In Vivo) (개별적으로 순서대로 용매를 제품에 첨가하십시오.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Selleck 연구소에서 검증했습니다. 이 제형에 대한 조정이 필요한 경우 맞춤형 테스트를 위해 당사 영업팀에 문의하십시오.

 3.600mg/ml (4.92mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 72 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
Clear solution
5% DMSO 95% Corn oil

Selleck 연구소에서 검증했습니다. 이 제형에 대한 조정이 필요한 경우 맞춤형 테스트를 위해 당사 영업팀에 문의하십시오.

 1.210mg/ml (1.65mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 24.2 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다.
* Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다.
* 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)

원액 준비

생물학적 활성

설명 Danoprevir는 IC50 0.2-3.5 nM을 가지는 C형 간염 바이러스(HCV)의 NS3/4A Protease의 펩티도모방 억제제이며, HCV 유전자형 1A/1B/4/5/6에 대한 억제 효과는 2B/3A보다 약 10배 높습니다. 2상 연구.
표적
HCV NS3/4A protease
0.2 nM-3.5 nM
시험관 내(In vitro)

Danoprevir(0.29 nM)는 기준 유전자형 1 NS3/4A Protease를 절반 최대치로 억제하지만, 이 화합물의 고용량(10 μM)은 79개 Proteases, 이온 채널, 수송체 및 세포 표면 수용체 패널에서 뚜렷한 억제를 보이지 않습니다. 초기 결합 후 5시간 이상 NS3/4A에 결합하여 억제 상태를 유지합니다. 이 화학물질(45 nM)은 간세포 유래 Huh7 세포에서 환자 유래 HCV 유전자형 1b 복제체를 EC50 1.8 nM로 제거합니다. 개별 돌연변이를 포함하는 HCV 서브게놈 복제체 세포주에서 V36M, R109K 및 V170A 치환은 거의 또는 전혀 내성을 부여하지 않지만, R155K 치환은 이 화합물에 높은 수준(62배 증가)의 내성을 부여합니다. 키메라 재조합 바이러스로 형질감염된 Huh7.5 세포에서 IC50 2-3 nM으로 HCV 유전자형 1, 4 및 6에 대한 항바이러스 억제 효과를 보이며, 이는 유전자형 2/3/5(280-750 nM)보다 100배 이상 낮습니다.

생체 내(In Vivo)

Danoprevir (30 mg/kg)를 쥐 또는 원숭이에게 투여한 결과, 투여 후 12시간 동안 간의 농도가 세포에서 복제체 RNA를 제거하는 데 필요한 이 화합물의 농도를 초과하는 것으로 나타났습니다.

특징 C형 간염 바이러스(HCV)의 NS3/4A Protease 펩티도모방 억제제입니다.

프로토콜 (참조)

키나아제 분석:

[1]
  • 연속 형광 공명 에너지 전달(FRET) 분석

    분석 완충액은 25μM NS4A 펩타이드, 50mM Tris-HCl (pH 7.5), 15% v/v 에탄올, 10mM 디티오트레이톨, 그리고 0.5μM QXL520-표지된 FRET 기질 {Ac-DE-Dap(QXL520)-EE-Abu-ψ-[COO]-AS-Cys(5-FAMsp)-NH2}를 포함합니다. K2040 효소(50pM)를 첨가하여 반응을 시작합니다. 반응은 검은색 96웰 플레이트에 설정하고 형광 데이터를 수집합니다. 억제제와 효소가 없는 대조군 반응도 포함됩니다. 초기 반응 속도는 반응의 선형 단계(최대 1시간)에서 계산되며, 이를 사용하여 IC50을 얻습니다. 사전 형성된 이 화합물-NS3/4A 복합체로부터의 활성 회복은 10nM NS3/4A를 1× 분석 완충액에서 2배 과량의 이 화학물질과 15분 동안 사전 배양한 다음, 사전 형성된 복합체를 기질을 포함하는 분석 완충액으로 200배 빠르게 희석하여 평가합니다. NS3/4A와 이 화합물의 사전 배양 없이 동일한 최종 조건을 가진 대조군 반응은 효소를 다른 완전한 반응 혼합물에 첨가하여 시작됩니다. 추가 대조군 반응에는 이 화학물질 또는 NS3가 없습니다. 반응 진행은 5시간 동안 추적됩니다.
세포 분석:

[1]
  • 세포주

    Huh7 cells harboring HCV replicon

  • 농도

    5 pM - 100 nM

  • 배양 시간

    48 hours

  • 방법

    Serially diluted Danoprevir is added to Huh7 cells harboring the K2040 replicon 1 day after cell plating. For antiviral assays, after a 48-hour incubation, intracellular RNA is extracted, and the level of HCV replicon RNA is quantified by reverse transcription (RT)-PCR assay with the primers (5'-CACTCCCCTGTGAGGAACTACTG-3' and 5'-AGGCTGCACGACACTCATACT-3') and a probe (5'-6-FAM-CTTCACGCAGAAAGCGTCTAGCCATGG-MGBNFQ-3' using an ABI Prism 7900 sequence detection system. Here, FAM is 6-carboxyfluorescin and MGBNFQ is a molecular-groove binding non-fluorescence quencher specific to the HCV 5' untranslated region. Single-tube reactions are performed using the TaqMan Gold RT-PCR kit. Triplicate reactions for the RNA standards and samples are performed in 50 μL with 5 μL intracellular RNA (50 ng). RT is carried out at 48 °C for 30 min followed by 10 min at 95 °C. The PCR is run as follows: 15 seconds at 95 °C and 1 min at 60 °C for 40 cycles. Each RNA concentration is determined in triplicate. The absolute concentration of replicon RNA is calculated based on its signal relative to that of a standard curve generated by known concentrations of an in vitro-transcribed RNA corresponding to a genotype 1b 5' untranslated region. Replicon levels in the presence of this compound are fitted to a four-parameter logistic function to obtain EC50.
동물 연구:

[1]
  • 동물 모델

    Sprague-Dawley rats, Cynomolgus monkeys

  • 용량

    30 mg/kg

  • 투여

    Oral gavage

참조

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18824605/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18637752/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21480315/

고객 제품 검증

Western blot analysis of HCV NS3 protease cleavage of MAVS. The catalytic efficiency of four proteases (H, H-A156T, 41 and 41-A156T) from individuals H and 41 were tested in the absence or presence of an NS3 protease inhibitor (danoprevir). Expression of the HCV NS3 proteases resulted in cleavage of the lambda cI repressor with MAVS cleavage site. Expression of the protease was induced with IPTG for 3 h. The lambda cI repressor with MAVS cleavage site was not cleaved by an NS3 protease that included a substitution in catalytic residue S139A. Similarly, different catalytic efficiencies were observed with different proteases.

데이터 출처 [ Mol Biol Evol , 2014 , 31(6), 1546-53 ]

Suppression of HCV replication by anti-HCV inhibitors. HCV-Feo replicon-containing cells were seeded in 96-well plates at a density of 1 x 10<sub>4</sub> cells/well. Twenty-four hours later, cells were exposed to the indicated concentrations of danoprevir. After a 72-hour treatment with inhibitors, cells were harvested and firefly luciferase activity was measured. Results are the means and SDs of three independent experiments (upper panels). PrestoBlue cell viability reagent (Invitrogen, CA) was used to examine the cytotoxic effect of inhibitors according to the manufacturer

데이터 출처 [ Antimicrob Agents Chemother , 2012 , 56(10), 5365-73 ]

<p>Inhibition of HCV and CHV NS3/4A proteases in the presence of the protease inhibitors (A) 25a or (B) danoprevir. The graph illustrates the relative (%) lambda phage titer after selective growth of lambda in E. coli cells coexpressing the NS3/4A protease constructs and the lambda cI repressor expressing either MAVS or TRIF cleavage sites in the absence or presence of protease inhibitors (20 mM). No significant inhibition was detected with an HCV NS3/4A protease mutant carrying the substitution D168V, which confers resistance to protease inhibitors. Values are the means 6 standard deviations (error bars) of at least three experiments.</p>

데이터 출처 [ PLoS One , 2012 , 7, e42481 ]

<p>Effects of TNFα, etanercept, and danoprevir on HCV infection in HFLC. Cells (n=6 wells/condition) were treated with TNFα (20 ng/ml) ± etanercept (1 μg/ml), danoprevir (2 μM), or media control before and during infection with Jc1G. Secreted luciferase was measured 96 hours after the start of infection. Box-and-whiskers plot; whiskers represent minimum and maximum values. Values of p were calculated by one-way ANOVA. ***, p < 0.001; ****, p < 0.0001</p>

, , Gastroenterology, 2017, 153(2):566-578

Sellecks Danoprevir 인용됨 22 출판물

Targeting eEF1A reprograms translation and uncovers broad-spectrum antivirals against cap or m6A protein synthesis routes [ Nat Commun, 2025, 16(1):1087] PubMed: 39920115
The exon junction complex coordinates the cotranscriptional inclusion of blocks of neighboring exons [ Genes Dev, 2025, 10.1101/gad.353081.125] PubMed: 41102016
Zbtb16 determines the fate plasticity of cardiovascular progenitors through IGF2BP3-mediated mRNA stabilization [ Cell Rep, 2025, 44(8):116127] PubMed: 40779394
Small Molecule Targeting of Atypical p38 Protects Against Viral Infection [ FASEB J, 2025, 39(20):e71096] PubMed: 41082179
Preclinical characterization of a non-peptidomimetic HIV protease inhibitor with improved metabolic stability [ Antimicrob Agents Chemother, 2024, 68(4):e0137323.] PubMed: 38380945
Mechanisms of Action of the Host-Targeting Agent Cyclosporin A and Direct-Acting Antiviral Agents against Hepatitis C Virus [ Viruses, 2023, 15(4)981] PubMed: 37112961
RECOVER identifies synergistic drug combinations in vitro through sequential model optimization [ Cell Rep Methods, 2023, 3(10):100599] PubMed: 37797618
Integrative multiomics and in silico analysis revealed the role of ARHGEF1 and its screened antagonist in mild and severe COVID-19 patients [ J Cell Biochem, 2022, 10.1002/jcb.30213] PubMed: 35037717
Hepatitis C virus drugs that inhibit SARS-CoV-2 papain-like protease synergize with remdesivir to suppress viral replication in cell culture [ Cell Rep, 2021, 35(7):109133] PubMed: 33984267
Characterization of fluorescent probe substrates to develop an efficient high-throughput assay for neonatal hepatic CYP3A7 inhibition screening [ Sci Rep, 2021, 11(1):19443] PubMed: 34593846

반품 정책
Selleck Chemical의 무조건 반품 정책은 고객에게 원활한 온라인 쇼핑 경험을 보장합니다. 구매에 어떤 식으로든 불만족하시면, 수령일로부터 7일 이내에 모든 품목을 반품하실 수 있습니다. 제품 품질 문제(프로토콜 관련 문제 또는 제품 관련 문제)가 발생하는 경우, 원래 구매일로부터 365일 이내에 모든 품목을 반품하실 수 있습니다. 제품 반품 시 아래 지침을 따르십시오.

배송 및 보관
Selleck 제품은 실온에서 운송됩니다. 실온에서 제품을 받으셨더라도 안심하십시오. Selleck 품질 검사 부서에서 한 달간의 상온 보관이 분말 제품의 생물학적 활성에 영향을 미치지 않음을 확인하는 실험을 수행했습니다. 수령 후, 데이터시트에 설명된 요구 사항에 따라 제품을 보관하십시오. 대부분의 Selleck 제품은 권장 조건에서 안정적입니다.

인간, 수의학 진단 또는 치료 용도로 사용하지 마십시오.