Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO
40%PEG300
5%Tween80
50%ddH2O
Selleck 연구소에서 검증했습니다. 이 제형에 대한 조정이 필요한 경우 맞춤형 테스트를 위해 당사 영업팀에 문의하십시오.
5.000mg/ml
(10.13mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution
5% DMSO
95% Corn oil
Selleck 연구소에서 검증했습니다. 이 제형에 대한 조정이 필요한 경우 맞춤형 테스트를 위해 당사 영업팀에 문의하십시오.
0.625mg/ml
(1.27mM)
Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 12.5 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다. * Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다. * 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)
원액 준비
생물학적 활성
설명
Epothilone A는 탁솔과 유사한 미세소관 안정화제로 EC0.01은 2 μM입니다.
표적
Tubulin
2 μM(EC0.01)
시험관 내(In vitro)
점액세균 Sorangium cellulosum에서 발견된 Epothilone A는 튜불린 중합을 유도하여 G2-M 전이에서의 세포 주기 정지, 세포 독성 및 세포 사멸을 유발하는 Taxol 유사 미세소관 안정화제입니다. 이 화합물은 HCT116 세포에서 4.4 nM의 IC50으로 세포 증식을 강력하게 억제합니다. 또한 KB3-1, KBV-1, Hela 및 Hs578T 세포에서 13 nM에서 160 nM 범위의 IC50 값으로 세포 독성을 나타냅니다. 이 화학 물질은 Taxol보다 수용성이 높고 2.3 μM의 IC50으로 미세소관 결합에서 Taxol과 경쟁합니다. 그러나 이 화합물과 Taxol 모두 공통된 약리 작용점을 공유하지 않고 튜불린 결합 부위를 독특하고 독립적으로 활용합니다. 최근, Aspergillus niger AS 3.739에 의한 이 화합물의 미생물학적 변형이 MCF-7 세포에도 독성이 있지만 훨씬 더 높은 IC50 값을 갖는 여러 대사 산물을 생성한다는 것이 밝혀졌습니다.
송아지 뇌 미세소관 단백질(MTP)은 약 15%~20%의 미세소관 관련 단백질을 포함하여 정제됩니다. Epothilone A-미세소관 연구에 사용된 완충액(MES 완충액)에는 0.1 M 2-모르폴리노에탄술폰산(MES), 1 mM EGTA, 0.5 mM MgCl2 및 3 M 글리세롤이 pH 6.6으로 포함됩니다. 전자 현미경용 샘플은 탄소-파라로디온 코팅 그리드(300 메쉬)에 놓이고 2% 우라닐 아세테이트로 음성 염색됩니다. 이 화합물의 존재 또는 부재 하의 미세소관 조립은 항온 조절 액체 순환기가 장착된 분광 광도계를 사용하여 분광 광도계적으로 모니터링됩니다. 온도는 35 °C로 유지되고 탁도(폴리머 질량 대표) 변화는 350 nm에서 모니터링됩니다. 유효 농도(EC0.01)는 0.01 OD/분 속도의 초기 기울기를 유도할 수 있는 보간된 농도로 정의되며, EC0.01 = 농도/기울기 공식을 사용하여 계산하고 세 가지 다른 농도에서 얻은 표준 편차와 함께 평균으로 표시됩니다.
24 hours for mitotic arrest or 72 hours for cytotoxicity
방법
For mitotic block and aberrant mitosis, cells are plated either in 48-well plates (for trypan blue and cell counting) or onto coverslips. After 24 hours, cells are treated with Epothilone A and are scored at regular intervals. For the cytotoxicity analysis, cells are counted and scored as trypan blue positive or negative. Concurrently, coverslips and aliquots of cells in the culture supernatant are fixed and stained with Hoechst 33342 in PBS. These cells are scored for cells blocked at the G2-M transition and aberrant mitosis.
참조
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11506611/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7757983/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15297674/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19431017/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1672157/
Sellecks Epothilone A 인용됨 6 출판물
β3 accelerates microtubule plus end maturation through a divergent lateral interface
[ Mol Biol Cell, 2025, 36(4):ar36]
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