Hesperadin

카탈로그 번호S1529 배치:S152901

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기술 자료

화학식

C29H32N4O3S
분자량 516.65 CAS 번호 422513-13-1
용해도 (25°C)* 시험관 내(In vitro) DMSO 103 mg/mL (199.36 mM)
Ethanol 1 mg/mL (1.93 mM)
Water Insoluble
생체 내(In Vivo) (개별적으로 순서대로 용매를 제품에 첨가하십시오.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다.
* Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다.
* 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)

원액 준비

생물학적 활성

설명 Hesperadin은 무세포 분석에서 250 nM의 IC50으로 Aurora B를 강력하게 억제합니다. 이는 AMPK, Lck, MKK1, MAPKAP-K1, CHK1 및 PHK의 활성을 현저하게 감소시키지만, 생체 내에서 MKK1 활성은 억제하지 않습니다.
표적
TbAUK1
(Cell-free assay)		 Aurora B (human)
(Cell-free assay)
40 nM 250 nM
시험관 내(In vitro) Hesperadin은 면역침전된 Aurora B가 히스톤 H3를 250 nM의 IC50으로 인산화하는 능력을 억제하며, 1 μM 농도에서 다른 키나아제(AMPK, Lck, MKK1, MAPKAP-K1, CHK1 및 PHK)의 활성을 현저히 감소시킵니다. 대조적으로, 20-100 nM의 이 화합물만으로도 HeLa 세포에서 유사분열 히스톤 H3-Ser10 인산화 손실을 유도하기에 충분합니다. 이 화합물 처리는 유사분열 및 세포질 분열 결함을 유발하여 HeLa 세포의 증식 중단 및 다배체화를 초래하며, 이는 염색체 부착 과정 중 Aurora B 기능 억제에 특이적으로 기인할 수 있습니다. 이 화합물(100 nM)은 탁솔 또는 모나스트롤에 의해 유도된 유사분열 정지를 신속하게 해제하지만, 노코다졸에 의해 유도된 정지는 해제하지 않습니다. 이 화합물과 노코다졸 처리 시 HeLa 세포에서 BubR1의 동원체 국소화를 없애고 동원체에서 Bub1의 강도를 감소시키는데, 이는 Aurora B 기능이 BubR1 및 Bub1의 효율적인 동원체 모집에 필요하며, 이는 다시 장기간의 체크포인트 신호 전달에 필요할 수 있음을 시사합니다. 이는 병원성 Trypanosoma brucei의 T. brucei Aurora kinase-1 (TbAUK1)에 의한 재조합 트리파노소마 히스톤 H3의 인산화를 시험관 내 키나아제 분석에서 40 nM의 IC50으로 방지합니다. 이 화학 물질은 배양된 감염성 혈류형(BF)의 세포 성장을 48 nM의 IC50으로 유의하게 억제하며, 곤충 단계 전윤형(PF)의 세포 성장은 550 nM의 IC50으로 약하게 억제합니다.

프로토콜 (참조)

키나아제 분석:[1]
  • Aurora B 키나아제 분석

    Aurora B 키나아제 분석을 위해 HeLa 세포를 50mM NaCl을 포함하는 완충액에서 용해합니다. 전체 세포 추출물은 탁상용 원심분리기를 사용하여 4°C에서 20분 동안 13,000rpm으로 원심분리합니다. 200mg의 전체 세포 추출물에서 얻은 펠렛은 유사분열 염색질에서 활성 Aurora B 키나아제를 얻기 위해 250mM NaCl을 포함하는 15mL 용해 완충액에 다시 추출됩니다. 후자 추출물의 저속 상층액은 면역침전(immunoprecipitation)에 사용됩니다. 단클론 마우스 항-AIM-1 또는 마우스 항-HA는 GammaBind Plus Sepharose에 커플링되고, 비드는 4°C에서 90분 동안 추출물 내에서 끝을 향해 회전됩니다. 비드는 세척되고, 분주되고, 키나아제 완충액(20mM Tris, pH 7.5, 150mM NaCl, 10mM MgCl2, 1mM DTT, 10mM NaF)에서 세척됩니다. 키나아제 분석은 5μg 히스톤 H3, 10μM ATP, 2.5μCi [γ-32P]ATP 및 이 화합물의 다양한 농도를 포함하는 20μL 키나아제 완충액에서 10μL 비드로 37°C에서 20분 동안 수행됩니다. SDS 샘플 완충액이 첨가되고, 샘플은 끓여서 SDS-PAGE로 분리됩니다. 겔은 건조되고, 방사성 신호는 PhosphorImager 분석으로 검출됩니다. 데이터는 ImageQuant 소프트웨어를 사용하여 분석됩니다.
세포 분석:[1]
  • 세포주

    HeLa cells and PtK1 cells

  • 농도

    Final concentration ~500 nM

  • 배양 시간

    24 and 48 hours

  • 방법

    Cells are exposed to different concentrations of Hesperadin for 24 and 48 hours. At indicated time points, methanol-fixed cell samples are washed with PBS and subsequently stained in PI buffer (50 μg/mL propidium iodide, 10 mM Tris, pH 7.5, 5 mM MgCl2, 200 μg/mL RNase A) for 20-40 minutes at 37 °C. The DNA content is determined by flow cytometry.

참조

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12707311/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19320832/

고객 제품 검증

<p>Time-lapse analysis of duration of mitotic arrest in U2OScells treated with Hec1 siRNA and indicated inhibitors in cells non-induced or induced to express LAP–Mis12-Mps1<sup>Δ200</sup>. Data indicate cumulative percentage of cells (from 50 cells per treatment) that exit mitosis (scored as cell flattening) at the indicated times after NEB, and are representative of three independent experiments.</p>

데이터 출처 [ Nat Commun , 2011 , 2, 316 ]

<p>HeLa cells treated with nocodazole containing DMSO or Hesperadin (100 nM) for 2 h and stained with the indicated antibodies.</p>

데이터 출처 [ Nat Commun , 2011 , 2, 316 ]

,

<p>Western blot analysis of p-histone and histone. 0-10μM Hesperadin was added.</p><div><div> </div></div><p> </p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

Sellecks Hesperadin 인용됨 52 출판물

Homologous recombination promotes non-immunogenic mitotic cell death upon DNA damage [ Nat Cell Biol, 2025, 27(1):59-72] PubMed: 39805921
A CPC-shelterin-BTR axis regulates mitotic telomere deprotection [ Nat Commun, 2025, 16(1):2277] PubMed: 40097392
Identification of chemical inhibitors targeting long noncoding RNA through gene signature-based high throughput screening [ Int J Biol Macromol, 2025, 292:139119] PubMed: 39722392
Rsk2 inhibition induces an aneuploid post-mitotic arrest of cell cycle progression in osteosarcoma cells [ Cell Death Discov, 2025, 11(1):318] PubMed: 40634321
Aurora B maintains spherical shape of mitotic cells via simultaneously stabilizing myosin II and vimentin [ J Mol Cell Biol, 2025, mjaf023] PubMed: 40795355
Dynamic phosphorylation of FOXA1 by Aurora B guides post-mitotic gene reactivation [ Cell Rep, 2024, 43(9):114739] PubMed: 39276350
Visualization strategies to aid interpretation of high-dimensional genotoxicity data [ Environ Mol Mutagen, 2024, 10.1002/em.22604] PubMed: 38757760
Histone H3 phospho-regulation by KimH3 in both interphase and mitosis [ iScience, 2023, 26(4):106372] PubMed: 37013187
Rsk2 and Lrp5 deficiency limit osteosarcoma growth in cFos-transgenic mice by different mechanisms [ ProQuest , 2023, 30683696] PubMed: None
Hesperadin suppresses pancreatic cancer through ATF4/GADD45A axis at nanomolar concentrations [ Oncogene, 2022, 10.1038/s41388-022-02328-4] PubMed: 35551503

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