Mycophenolate mofetil

Mycophenolate mofetil은 활성 면역억제제 mycophenolic acid (MPA)의 에스테르 프로드러그입니다. 후자는 inosine monophosphate dehydrogenase type I/II에 대해 각각 39 nM 및 27 nM의 IC50을 갖는 비경쟁적, 선택적, 가역적 억제 활성을 나타냅니다. 또한, MPA는 ConA-자극 T 세포, LPS-자극 B 세포 및 동종항원-특이 T 세포의 증식에 대해 각각 100 nM, 120 nM, 51 nM의 IC50을 갖는 농도 의존적 억제를 유도합니다. [1] 10 μg/mL의 고농도 이 화합물은 미세아교세포 배양에서 강력한 apoptosis를 유도하고 활성화된 카스파제-3 면역반응성 apoptosis 세포 수를 증가시킵니다. 또한, (1 μg/mL) 미세아교세포와 성상세포 모두의 증식을 강력하게 억제합니다. [2] 최근 연구에 따르면 이 화학 물질은 시간 의존적 방식으로 신경 손상 후 오르가노타입 해마 절편 배양에서 신경 세포 사멸의 정도를 크게 완화합니다. [4]

ACI-Lewis 쥐 이소성 심장 이식 모델에서, 20 mg/kg 및 40 mg/kg 용량의 Mycophenolate mofetil 치료는 이식편 생존 기간을 연장하며, 중간 생존 시간(MST)은 각각 14.5일 및 18.5일입니다. [1] 블레오마이신(BLM) 유도 경피증 마우스 모델에서 이 화합물은 염증 세포 침윤, 조직 하이드록시프롤린 함량 및 진피 두께를 감소시킵니다. [3]

• IMP dehydrogenase Type I 및 II 효소 활성

  IMP dehydrogenase Type I 및 II는 인간 효소를 발현하는 대장균에서 정제됩니다. 분석은 평평한 바닥의 UV 투명 96웰 플레이트를 사용하여 수행됩니다. 최종 200 μL 반응 혼합물에는 0.1 M Tris, 0.1 M KCl, 3 mM EDTA pH 8.0, 2 mM DTT, 그리고 IMP dehydrogenase Type I 또는 Type II 중 40 nM이 포함되었습니다. 반응은 400 μM NAD 및 400 μM IMP를 첨가하여 시작되었고, 이어서 37 °C에서 2.5시간 동안 배양되었습니다. NAD에서 NADH로의 전환 반응 속도는 340 nm에서 흡광도 증가를 기반으로 측정됩니다. 분석은 또한 다른 IMP dehydrogenase 억제제에 의한 혈청 단백질 결합을 추정하기 위해 50% 인간 혈청 존재 하에 수행됩니다.

• 세포주

  ConA-stimulated T cells and LPS-stimulated B cells

• 농도

  0 to 10 μM

• 배양 시간

  48 hours

• 방법

  The spleens of male Lewis rats aged 8 weeks are aseptically removed and teased into single-cell suspensions, and the resulting splenocytes are suspended in RPMI1640 medium containing 10% fetal calf serum, 100 U/mL penicillin, and 100 μg/mL streptomycin. Assays are performed in flat-bottomed microtiter plates, with each well containing 150000 splenocytes in a total volume of 100 μL. Splenocytes are incubated in medium containing either 1 μg/mL Concanavalin A (ConA) or lipopolysaccharide (LPS) as T or B cell mitogen, respectively, along with various concentrations of this compound at 37 °C for 48 hours in a humidified atmosphere of 5% CO₂-95% air. During the final 6 hours of incubation, cells are pulsed with 1 μCi of ³H-thymidine/well, and harvested onto pressed fiberglass in a cell harvester. The uptake of ³H-thymidine by proliferating cells is measured using a liquid scintillation counter. The in vitro immune response of alloantigen-specific T cells is evaluated as a proliferation response using one-way mixed lymphocyte reaction assay. Mesenteric lymph nodes cells from male Lewis rats aged 8 weeks and splenocytes from male ACI rats aged 8 weeks are used as responder and stimulator cells, respectively. Single-cell suspensions are prepared, and the responder cells are cultured with irradiated (20 Gy) stimulator cells in RPMI1640 supplemented with 10% fetal calf serum, 100 U/mL penicillin and 100 μg/mL streptomycin, in 96-well plates (U-bottom) and in the presence of various concentrations of this compound (total volume: 200 μL, 37 °C, 5% CO₂ humidified atmosphere, 72 hours). As a negative control, responder cells are cultured with irradiated splenocytes of Lewis rats. The cell proliferation is quantified by the uptake of ³H-thymidine.

• 동물 모델

  Lewis rats with abdominal vascularized heterotopic cardiac transplantation.

• 용량

  ≤40 mg/kg

• 투여

  oral administration