NVP-ADW742

NVP-ADW742는 InsR 대비 IGF-1R에 대해 6배 더 높은 선택성을 보이며 IC50은 2.8 μM입니다. c-Kit, HER1, PDGFR, VEGFR2 또는 Bcr-Abl p210에 대한 최소 억제 활성은 IC50이 5 μM 이상입니다. 이 화합물은 다양한 종양 세포주에서 혈청 자극 세포 증식을 용량 의존적으로 유의하게 억제하며, 다발성 골수종(MM) 세포주에 대한 IC50 값은 0.1-0.5 μM이며, MM 세포에 대한 항종양 효과는 BMSC와의 공동 배양으로 극복될 수 없습니다. 또한 혈청 존재 하에서 IL-6에 대한 종양 세포의 반응성을 폐지합니다. 또한 이 화학 물질은 기존의 (세포독성 화학 요법) 또는 연구 중인 (CC-5013, TRAIL/Apo2L, PS-341) 항암제에 내성을 가진 MM 세포주뿐만 아니라 다제 내성 질환을 가진 MM 환자의 원발성 종양 세포에 대해서도 활성을 보입니다. 이 화합물은 종양 세포 및 골수 기질 세포에 의한 VEGF 생성을 감소시키고, 갑상선암 세포 또는 MM 세포와 같은 다양한 종양 유형에 의한 IGF-1 유도 VEGF 분비를 억제합니다. 이 화합물(0.75 μM)에 의한 IGF-1R 억제는 MM 세포 또는 전립선암 세포를 독소루비신, TRAIL/Apo2L 또는 PS-341과 같은 다른 항암제에 민감하게 만듭니다. [1]

NVP-ADW742를 10 mg/kg 용량으로 하루 두 번 투여하면 미만성 MM 마우스 모델에서 종양 성장을 유의하게 억제하고 생존을 연장하며 세포독성 화학요법의 항종양 효과를 향상시킵니다. [1]

• 세포 키나아제 활성 분석

  NVP-ADW742가 IGF-1R의 자가인산화에 미치는 영향에 대한 IC50 값은 96웰 “Capture ELISAs” 분석을 사용하여 이 화합물의 농도를 증가시키면서 세포 수준에서 결정됩니다. 간단히 말해, NWT-21 세포는 완전 성장 배지에 96웰 조직 배양 플레이트에 파종되고 70-80% 컨플루언스까지 성장시킨 다음 0.5% FCS 배지에서 24시간 동안 굶깁니다. 이어서, 세포는 이 억제제 존재 하에서 90분 동안 배양한 다음 37 °C에서 10분 동안 IGF-I (10 ng/mL)로 자극합니다. 이어서, 세포는 얼음처럼 차가운 PBS로 두 번 세척하고 4 °C에서 50 μL/웰 RIPA 완충액 (50 mM Tris-HCl, pH 7.2, 120 mM NaCl, 1 mM EDTA, 6 mM EGTA, 1% NP-40, 20 mM NaF, 1 mM 벤자미딘, 15 mM 피로인산나트륨, 1 mM PMSF 및 0.5 mM Na₃VO₄)으로 용해합니다. 각 실험의 용해물은 IGF-1R에 특이적인 포획 항체로 미리 코팅된 검은색 ELISA 플레이트로 옮겨집니다. 항체에 의한 포획 후, 용해물은 알칼리성 인산가수분해효소(AP) 표지된 항-포스포티로신 항체 (PY20(AP)를 RIPA 완충액에 0.2 μg/mL로 희석) 40 μL와 혼합하고 4 °C에서 밤새 인큐베이션합니다. 세척(PBST) 및 실온에서 45분 동안 형광 AP-기질 CDPStar RTU와 에메랄드 II (90 μL/웰)로 인큐베이션한 후, Packard Top Count 섬광 계수기를 사용하여 발광을 측정합니다.

• 세포주

  MM-1S, MM-1R, RPMI-8226/S, OPM-1, OCI-My5, SKMM2, KMS-12-BM, XG-1, L363, S6B45 cells and et al.

• 농도

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~ 10 μM

• 배양 시간

  48 hours

• 방법

  Cells are exposed to various concentrations of NVP-ADW742 for 48 hours in the presence or absence of serum. Cell survival is examined using MTT assay.

• 동물 모델

  Male SCID/NOD mice injected i.v. with MM-1S-Luc⁺ human MM cells

• 용량

  10 mg/kg twice daily

• 투여

  Injection i.p. or oral gavage