Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다. * Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다. * 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)
Org 27569는 CB1 cannabinoid receptor의 알로스테릭 조절제입니다. 이는 CB1 receptor 작용제의 결합을 유의하게 증가시키고 CB1 receptor 역작용제의 특이적 결합을 유의하게 감소시킵니다. 이 화합물은 CB1 고친화성 작용제 결합, 수용체 내부화 및 하류 ERK 인산화를 유도합니다. 알로스테릭 리간드는 CB1에 대한 작용제 결합을 촉진하지만, TM6에서 작용제 유도 형태 변화를 차단합니다. 이는 수용체를 작용제에 결합되어 있지만 신호 전달이 없는 독특한 형태학적 상태에 가둡니다.
결합 분석은 CB1 receptor 작용제 [3H]CP 55,940 (0.7 nM) 및 CB1 receptor 길항제 [3H]SR 141716A (1.2 nM), 1 mg/ml BSA 및 0.1 mM EDTA와 0.5 mM MgCl2, pH 7.4를 포함하는 50 mM Tris 완충액으로 총 500 μl의 분석 부피에서 수행됩니다. 마우스 뇌 막(30 μg)을 첨가하여 결합을 시작합니다. 분석은 37°C에서 60분 동안 수행된 후 얼음처럼 차가운 세척 완충액(50 mM Tris 완충액 및 1 mg/ml BSA)을 첨가하고 24-웰 샘플링 매니폴드 및 4°C에서 24시간 동안 세척 완충액에 담근 Whatman GF/B 유리 섬유 필터를 사용하여 진공 여과하여 종료합니다. 각 반응 튜브는 4 ml의 완충액 분취액으로 5번 세척합니다. 필터는 60분 동안 오븐 건조한 후 5 ml의 섬광액에 넣고 액체 섬광 계수법으로 방사능을 정량화합니다. 특이적 결합은 해당 비표지 리간드의 1 μM 농도가 있는 경우와 없는 경우에 발생한 결합의 차이로 정의되며 총 결합의 70~80%입니다.
Cells expressing CB1 receptors are exposed to ORG27569 (10 μM) for 5 to 15 min. For toxin treatment to abrogate Gi coupling effects, PTX is added to the medium at 5 ng/ml. Following an 18-h incubation in the presence of toxin, cells are washed twice with PBS and treated with compounds. Cells are washed with ice-cold PBS, and cell lysates are obtained by harvesting the cells with ice-cold lysis buffer (150 mM NaCl, 1.0% IGEPAL CA-630, 0.5% sodium deoxycholate, 0.1% SDS, and 50 mM Tris, pH 7.5 containing 4-(2-aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride, pepstatin A, E-64, bestatin, leupeptin, and aprotinin as protease inhibitors).
참조
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16113085/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22343625/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22846992/
Sellecks Org 27569 인용됨 2 출판물
GPCR kinase subtype requirements for arrestin-2 and -3 translocation to the cannabinoid CB1 receptor and the consequences on G protein signalling
[ Biochem Pharmacol, 2024, 224:116190]
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