Posaconazole

Posaconazole은 강력한 트리파노시드 활성을 가지고 있습니다. 아미오다론은 이 화합물과 시너지 효과를 냅니다. 또한 T. cruzi에서 Ca²⁺ 항상성에 영향을 미치고 방해합니다. 이 화학 물질은 기생충 생존에 필수적인 에르고스테롤의 생합성을 차단합니다. 그것은 20 nM의 최소 억제 농도와 14 nM의 IC50으로 에피마스티고트(세포외) 단계의 증식에 명확하고 용량 의존적인 효과를 가집니다. 기생충의 임상적으로 관련된 세포내 아마스티고트 형태에 대해 이 화합물은 훨씬 더 강력합니다. 그것은 3 nM 및 0.25 nM의 최소 억제 농도 및 IC50 값을 가집니다. [1] 플루코나졸, 보리코나졸 및 암포테리신 B에 내성을 보이는 칸디다 및 아스페르길루스 종의 분리주에 대해 활성이 있으며, 다른 트리아졸보다 접합균류에 대해 훨씬 더 활성이 있습니다. [2]

감염된 동물을 아미오다론 단독으로 치료하면 기생충혈증이 감소하고, 감염 후 60일 생존율이 증가하며(미처리 대조군의 0% vs 아미오다론 치료 동물의 40%), Posaconazole과 함께 투여하면 기생충혈증 발달을 지연시킵니다. [1] 이 화합물과 Boost Plus를 함께 투여하면 금식 상태에서 이 화합물 단독 투여에 비해 약물 노출이 증가합니다. 음식, 특히 지방 함량이 높은 식사는 이 화합물의 생체 이용률을 유의하게 증가시킵니다. 이 화합물의 전신 노출은 고지방 식사 및 무지방 식사와 함께 섭취할 때 각각 4배 및 2.6배 증가합니다. [3] 이 화합물과 아미오다론은 낮은 부작용으로 효과적인 항 T. cruzi 치료법을 구성할 수 있습니다. [4] 체중 ≥15 mg/kg의 1일 2회 투여 용량에서 이 화합물은 생쥐의 생존을 연장하고 조직 부담을 줄입니다. [5]

• 세포주

  Epimastigote form of T. cruzi amastigotes

• 농도

  0 nM -4 nM

• 배양 시간

  96 hours

• 방법

  The epimastigote form of the parasite is cultivated in liver infusion tryptose medium, supplemented with 10% new born calf serum at 28 °C with strong (120 rpm) agitation. Cultures are initiated at a cell density of 2 × 10⁶ epimastigotes/mL, and Posaconazole is added at a cell density of 0.5−1.0 × 10⁷ epimastigotes/mL. Cell densities are measured by using an electronic particle counter as well as by direct counting with a hemocytometer. Cell viability is followed by Trypan blue exclusion, using light microscopy. Amastigotes are cultured in Vero cells maintained in minimal essential medium supplemented with 1% fetal calf serum in a humidified atmosphere (95% air−5% CO₂) at 37 °C. Cells are infected with 10 tissue culture-derived trypomastigotes per cell for 2 hours and then washed three times with phosphate-buffered saline (PBS) to remove nonadherent parasites. Fresh medium with and without this compound is added, and the cells are incubated for 96 hours with a medium change at 48 hours. The percent of infected cells and the numbers of parasites per cell are determined directly using light microscopy, and a statistical analysis of the results is carried out. IC50 values are calculated by nonlinear regression, using the program GraFit. Fractional inhibitory concentrations (FIC) are calculated. Cytoplasmic free Ca²⁺ concentrations in control and drug-treated extracellular epimastigotes are determined by fluorimetric methods using Fura-2. Subcellular Ca²⁺ levels and mitochondrial membrane potentials are monitored on individual Vero cells infected with T. cruzi amastigotes by using time-scan confocal microscopy. Briefly, Vero cells heavily infected (72 hours) with T. cruzi amastigotes are plated onto 22 × 40 mm glass coverslips (0.15 mm thickness) and incubated simultaneously with 10 μM cell-permeant Rhod-2 and 10 μg/mL Rhodamine-123 for 50 minutes at 37 °C in culture medium and then washed and incubated with Ringer's solution, with or without amiodarone. Under the conditions used fluorescence of Rhod-2 comes mainly from intracellular Ca²⁺-rich compartments, like mitochondria, since its low affinity for Ca²⁺ limits its fluorescence in the Ca²⁺-poor cytoplasm of the Vero cells or amastigotes. Rhodamine-123 is a mitochondrion-specific cationic dye, which distributes across the inner mitochondrial membranes strictly according to their membrane potential.

• 동물 모델

  Female NMRI−IVIC mice with acute Chagas

• 용량

  20 mg/kg/d

• 투여

  Oral