Afatinib (BIBW2992)

카탈로그 번호S1011 배치:S101112

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기술 자료

화학식

C24H25ClFN5O3
분자량 485.94 CAS 번호 850140-72-6
용해도 (25°C)* 시험관 내(In vitro) DMSO 97 mg/mL (199.61 mM)
Ethanol 97 mg/mL (199.61 mM)
Water Insoluble
생체 내(In Vivo) (개별적으로 순서대로 용매를 제품에 첨가하십시오.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다.
* Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다.
* 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)

원액 준비

생물학적 활성

설명 Afatinib은 EGFRwt, EGFR L858R , EGFR L858R/T790M ErbB2 (HER2) 및 ErbB4 (HER4)에 대해 각각 0.5, 0.4, 10, 14, 1 nM의 IC50으로 시험관 내에서 EGFR/ErbB를 비가역적으로 억제합니다. 이 화합물은 자가포식을 유도합니다.
표적
EGFR (L858R)
(Cell-free assay)		 EGFR (wt)
(Cell-free assay)		 ErbB4
(Cell-free assay)		 EGFR (L858R/T790M)
(Cell-free assay)		 HER2
(Cell-free assay)
0.4 nM 0.5 nM 1 nM 10 nM 14 nM
시험관 내(In vitro) BIBW2992는 EGFR 및 HER2의 야생형 및 돌연변이 형태 모두에 대해 강력한 활성을 보입니다. L858R EGFR에 대한 효능은 Gefitinib과 유사하지만, Gefitinib 내성 L858R-T790M EGFR 이중 돌연변이에 대해서는 약 100배 더 활성적입니다. 이 화합물은 생체 내에서 EGFR 및 HER2 인산화에 강력한 효과를 나타냅니다. wt EGFR을 발현하는 인간 표피양 암종 세포주 A431, wt HER2로 형질감염된 마우스 NIH-3T3 세포, 그리고 내인성 HER2를 발현하는 유방암 세포주 BT-474 및 위암 세포주 NCI-N87과 같이 테스트된 모든 세포 유형에서 참조 화합물(예: Lapatinib 등)과 비교하여 우수한 성능을 보입니다.
생체 내(In Vivo) BIBW2992를 25일 동안 20mg/kg 용량으로 매일 경구 투여한 결과, 누적된 처리/대조군 종양 부피 비율(T/C 비율)이 2%로 극적인 종양 퇴행이 나타났습니다. EGFR 및 AKT의 인산화 감소는 조직 절편의 면역조직화학 염색을 통해 확인되었습니다. 따라서 라파티닙 및 네라티닙과 마찬가지로 이 화합물은 인간 상피 성장 인자 수용체 2(Her2) 및 상피 성장 인자 수용체(EGFR) Protein Tyrosine Kinase를 비가역적으로 억제하는 차세대 Protein Tyrosine Kinase 억제제(TKI)입니다. 이는 얼로티닙 또는 게피티닙과 같은 1세대 TKI가 표적으로 하는 EGFR 돌연변이뿐만 아니라 이러한 표준 치료법에 민감하지 않은 돌연변이에도 활성을 나타냅니다.

프로토콜 (참조)

키나아제 분석:

[1]
  • 시험관 내 키나아제 활성 분석

    인간 EGFR의 야생형 Protein Tyrosine Kinase 도메인과 EGFR L858R/T790M 이중 돌연변이의 Protein Tyrosine Kinase 도메인은 Glutathione-S-transferase (GST)에 융합되어 추출됩니다. 그런 다음 50% DMSO에 연속 희석된 억제제 BIBW2992의 존재 하에 효소 활성을 분석합니다. 무작위 폴리머 pEY (4:1)를 기질로 사용하고, 바이오틴화된 pEY (bio-pEY)를 추적자 기질로 추가합니다. HER2의 Protein Tyrosine Kinase 도메인은 바큘로바이러스 시스템을 사용하여 클론화되고 EGFR Protein Tyrosine Kinase와 유사하게 추출됩니다. EGFR, HER2, SRC, BIRK 및 VEGFR2 Protein Tyrosine Kinase 활성 분석에 대한 자세한 내용은 보충 정보에서 확인할 수 있습니다.
세포 분석:

[1]
  • 세포주

    NSCLC cells

  • 농도

    0-10 μM

  • 배양 시간

    1 hour

  • 방법

    1 × 104 NSCLC cells are transferred into each well of a 96-well plate and cultured overnight in serum-free media for the EGFR phosphorylation assay. After addition of this compound on the next day, the plates are incubated at 37 °C for 1 hour. EGF-stimulation is done using 100 ng/mL for 10 min at room temperature. Cells are washed with ice cold PBS, extracted with 120 μL HEPEX buffer per well and shaken at room temperature for 1 hour. In all 2 × 104 cells per well is used for the HER2 phosphorylation assay. Streptavidin precoated plates are coated with anti-EGFR-biotin at 1:100 dilution in blocking buffer and c-erb2/HER2 oncoprotein Ab-5(Clone N24)-Biotin. Cell extracts is then transferred to the antibody-coated wells and incubated at room temperature for 1 hour. Extinction is measured at 450 nm.
동물 연구:

[1]
  • 동물 모델

    Athymic NMRI-nu/nu female mice

  • 용량

    20 mg/kg

  • 투여

    Oral administration

참조

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18408761/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24266694/

고객 제품 검증

<p>Inhibition of signaling pathway activation in lung tumor cell lines by kinase inhibitors. Lung tumor cells were cultured in 10% FBS until reaching ∼80% confluence and then the cells were starved in serum-free medium for overnight, followed by 4-hour treatment with the inhibitors. Cell lysates were then prepared and used for determination of the pathway activation signals by the CEER assay.</p>

데이터 출처 [ Int J Proteomics , 2011 , 2011, 215496 ]

<p>Inhibition of anchorage-independent growth of lung tumor cell lines by selected inhibitors. Each selected cell line was treated with the indicated inhibitor at 0.1 μM and 1 μM concentrations for two weeks and cell colony size formation was scored under the Nikon inverted-phase microscope.</p>

데이터 출처 [ Int J Proteomics , 2011 , 2011, 215496 ]

<p>After starved in serum-free medium for 24h, Breast cancer cells incubated with the indicated concentrations of BIBW2992 for 3h,followed by 15-minute stimolation of 100ng/ml EGF</p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

Immunoblot analysis of serum starved H2030 cells pre-treated with 500 nM or 1 µM of gefitinib, crizotinib, CP-724714, or afatinib for 12 hr, followed by stimulation with EGF, HGF, NRG1, or their combination (50 ng/ml) for 10 min.

데이터 출처 [ , , Nature, 2016, 534(7609):647-51 ]

Sellecks Afatinib (BIBW2992) 인용됨 453 출판물

Lysosomal EGFR acts as a Rheb-GEF independent of its kinase activity to activate mTORC1 [ Cell Res, 2025, 10.1038/s41422-025-01110-x] PubMed: 40259053
Longitudinal single-cell multiomic atlas of high-risk neuroblastoma reveals chemotherapy-induced tumor microenvironment rewiring [ Nat Genet, 2025, 10.1038/s41588-025-02158-6] PubMed: 40229600
The potential of lazertinib and amivantamab combination therapy as a treatment strategy for uncommon EGFR-mutated NSCLC [ Cell Rep Med, 2025, 6(2):101929] PubMed: 39874964
AP1-mediated reprogramming of EGFR expression triggers resistance to BLU-667 and LOXO-292 in RET-rearranged tumors [ J Exp Clin Cancer Res, 2025, 44(1):154] PubMed: 40405293
Anti-galectin-9 therapy synergizes with EGFR inhibition to reprogram the tumor microenvironment and overcome immune evasion [ J Immunother Cancer, 2025, 13(7)e010926] PubMed: 40664443
Blocking cancer-fibroblast mutualism inhibits proliferation of endocrine therapy resistant breast cancer [ Mol Syst Biol, 2025, 10.1038/s44320-025-00104-6] PubMed: 40341770
PI3K-dependent GAB1/Erk phosphorylation renders head and neck squamous cell carcinoma sensitive to PI3Kα inhibitors [ Cell Death Dis, 2025, 16(1):457] PubMed: 40533463
Exercise-induced adipokine Nrg4 alleviates MASLD by disrupting hepatic cGAS-STING signaling [ Cell Rep, 2025, 44(2):115251] PubMed: 39891907
Rare mutations at EGFR L747 position: molecular characteristics and superior response to afatinib in NSCLC patients [ ESMO Open, 2025, 10(9):105558] PubMed: 40834500
PTEN loss and ERBB2/ERBB3-mediated AKT reactivation drive resistance to MET inhibition in MET-amplified hepatocellular carcinoma [ Cell Oncol (Dordr), 2025, 10.1007/s13402-025-01097-y] PubMed: 40991144

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