Alisertib (MLN8237)

카탈로그 번호S1133 배치:S113310

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기술 자료

화학식

C27H20ClFN4O4
분자량 518.92 CAS 번호 1028486-01-2
용해도 (25°C)* 시험관 내(In vitro) DMSO 100 mg/mL (192.7 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
생체 내(In Vivo) (개별적으로 순서대로 용매를 제품에 첨가하십시오.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다.
* Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다.
* 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)

원액 준비

생물학적 활성

설명 Alisertib (MLN8237)는 무세포 분석에서 IC50 1.2 nM를 가진 선택적 Aurora A 억제제이며, Aurora B보다 Aurora A에 대해 200배 이상 높은 선택성을 가집니다. 이 화합물은 세포 주기 정지, apoptosis 및 autophagy를 유도합니다. 3상.
표적
Aurora A
(Cell-free assay)
1.2 nM
시험관 내(In vitro)

Alisertib (MLN8237)는 구조적으로 관련된 Aurora B보다 Aurora A에 대해 200배 이상 높은 선택성을 보이며 IC50은 396.5 nM이고, 205가지 다른 키나제에 대해 유의미한 활성을 보이지 않습니다. 이 화합물 (0.5 μM) 처리 시 MM1.S 및 OPM1 세포에서 Aurora A의 인산화를 억제하며, Aurora B 매개 히스톤 H3 인산화에는 영향을 미치지 않습니다. 다발성 골수종(MM) 세포주에서 IC50 값 0.003-1.71 μM로 세포 증식을 유의미하게 억제하며, BM 기질 세포 및 IL-6, IGF-1 존재 하에 원발성 MM 세포 및 MM 세포주에 대해 단독 MM 세포보다 더 강력한 항증식 활성을 나타냅니다. 0.5 μM에서 원발성 MM 세포 및 세포주에서 G2/M기 2~6배 증가를 유도하며, p53, p21, p27의 상향 조절, PARP, caspase 3, caspase 9 절단을 포함하는 유의미한 apoptosis 및 노화를 유도합니다. 또한, Hexadecadrol과 강력한 시너지 항MM 효과를 보이며, doxorubicin 및 LDP-341과도 추가적인 효과를 보입니다. 이 화합물 (0.5 μM) 처리 시 FLO-1, OE19 및 OE33 식도 선암 세포주의 집락 형성을 억제하고, 다배수체 세포의 비율을 유의미하게 증가시키며, 이후 sub-G1기 세포 비율을 증가시킵니다. 이는 NSC 119875 (2.5 μM)와 병용 시 더욱 강화될 수 있으며, 단일 약제 처리와 비교하여 TAp73β, PUMA, NOXA, 절단된 caspase-3 및 절단된 PARP의 더 높은 유도를 포함합니다.

생체 내(In Vivo)

Alisertib (MLN8237)는 각각 15 mg/kg 및 30 mg/kg에서 42% 및 80%의 종양 성장 억제(TGI)로 종양 부담을 유의미하게 감소시키고, 대조군에 비해 쥐의 생존을 연장합니다.

특징 최초의 경구용 Aurora A 억제제.

프로토콜 (참조)

키나아제 분석:

[1]
  • Aurora A 방사성 Flashplate 효소 분석

    Alisertib (MLN8237)에 의해 매개되는 시험관 내 억제의 본질과 정도를 결정하기 위해 Aurora A 방사성 Flashplate 효소 분석을 수행합니다. 재조합 Aurora A는 Sf9 세포에서 발현되고 GST 친화성 크로마토그래피로 정제됩니다. Aurora A의 펩타이드 기질은 비오틴(Biotin-GLRRASLG)과 접합됩니다. Aurora A 키나제(5 nM)는 50 mM Hepes (pH 7.5), 10 mM MgCl2, 5 mM DTT, 0.05% Tween 20, 2 μM 펩타이드 기질, 2 μM에서 3.3 μCi/mL [γ-33P]ATP 및 Image FlashPlates를 사용하여 이 화합물의 증가하는 농도에서 분석됩니다.
세포 분석:

[2]
  • 세포주

    MM1.S, MM.1R, LR5, RPMI 8226, DOX40, OPM1, OPM2, INA6, and U266

  • 농도

    Dissolved in DMSO, final concentrations ~10 μM

  • 배양 시간

    24, 48, and 72 hours

  • 방법

    Cells are exposed to various concentrations of Alisertib (MLN8237) for 24, 48, and 72 hours. Cell viability is measured using MTT assay, and cell proliferation is measured using 3[H]-thymidine incorporation. For cell cycle analysis, cells are permeabilized by 70% ethanol at -20 °C, and incubated with 50 μg/mL PI and 20 units/mL RNase-A. DNA content is analyzed by flow cytometry using BDFACS-Canto II and FlowJo software. For the detection of apoptosis and senescence, cells are stained with Resorcinolphthalein isothiocyanate-annexin V and PI. Apoptotic cells are determined by flow cytometric analysis using BDFACS-Canto II and FlowJo software.
동물 연구:

[2]
  • 동물 모델

    Severe combined immune-deficient (SCID) mice inoculated subcutaneously with MM1.S cells

  • 용량

    ~30 mg/kg/day

  • 투여

    Orally

참조

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22016509/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20382844/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22302096/

고객 제품 검증

<p>Alisertib inhibits AURKA and AURKB in a concentration-dependent manner. (a) Alisertib induces G 2 /M delay or genome reduplication. HeLa cells were exposed to buffer or the indicated concentrations of Alisertib. After 24 h, the cells were harvested and analyzed with flow cytometry. The positions of 2N, 4N and 8N DNA contents are indicated. (b) Alisertib delays mitotic exit or induces slippage. HeLa cells stably expressing histone H2B-GFP were exposed to buffer or the indicated concentrations of Alisertib. Individual cells were then tracked for 24 h with time-lapse microscopy. Each horizontal bar represents one cell (n ¼ 50). Key: light gray ¼ interphase; black ¼ mitosis (from DNA condensation to anaphase or mitotic slippage); dark gray ¼ interphase after mitotic slippage; truncated bars ¼ cell death. (c) Different concentrations of Alisertib are involved in delaying mitotic exit and inducing slippage. Live-cell imaging of cells treated with Alisertib was described in panel (b). The duration of mitosis (mean±90% confidence interval) and the percentage of cells that underwent mitotic slippage during the imaging period was quantified. (d) Alisertib promotes apoptosis in a concentration-dependent manner. HeLa cells were incubated with the indicated concentrations of Alisertib for 48 h. The cells were then harvested and analyzed with flow cytometry. (e) Concentration-dependent cytotoxicity of Alisertib. HeLa cells were cultured in the presence of the indicated concentrations of Alisertib for 48 h. The number of live and dead cells was analyzed with trypan blue exclusion assay. (f) Concentration-dependent suppression of long-term survival by Alisertib. HeLa cells were seeded on 60-mm culture plates and grown in the presence of 250 n M or 1 m M of Alisertib. After 24 h, the cells were washed gently and propagated in normal medium for another 10–12 days. Colonies were fixed and stained with crystal violet solution (examples of the plates are shown). Average±s.d. from three independent experiments. (g) Both AURKA and AURKB are inhibited by Alisertib.Mitotic HeLa cells were obtained by exposure to nocodazole for 16 h followed by mechanical shake off. The cells were incubated with the indicated concentrations of Alisertib for 2 h. Lysates were then prepared and activated phospho-AURKAThr288 and AURKBThr232were detected with immunoblotting. The asterisk indicates the position of an AURKB-like protein (the same throughout this study). Uniform loading was confirmed by immunoblotting for actin. In this assay, nocodazole and MG132 (a proteasome inhibitor) were added to prevent the cells from exiting mitosis. Accordingly, the total AURKA and AURKB levels remained constant throughout the experiment. (h) Alisertib prevents activation of AURKA and AURKB. HeLa cells were incubated with the indicated concentrations of Alisertib for 8 h. Nocodazole was then added for another 6 h to trap cells that entered mitosis. Lysates were prepared and analyzed with immunoblotting. Actin analysis was included to assess loading and transfer.</p>

데이터 출처 [ Oncogene , 2014 , 33, 3550-60 ]

Tissue levels of 53BP1, a-tubulin, IkB-a and IL-6 in an Hs294T xenograft treated with MLN8237 or vehicle control were visualized by immunofluorescence co-staining with DAPI. Representative micrographs are shown from triplicate experiments.

데이터 출처 [ EMBO Mol Med , 2013 , 5(1), 149-66 ]

Inhibition of Aurka kinase activity by MLN8237 impairs expression of pluripotency genes in CCE cells as measured by qRT-PCR. All values shown are mean ?SEM for n=3. The level of phosphorylated H3(S10) (p-H3(S10)), an Aurka phosphorylation target site, is decreased in MLN8237-treated samples.

데이터 출처 [ Cell Stem Cell , 2012 , 11, 179-94 ]

<p>Recruitment of clathrin to the mitotic spindle is controlled by phosphorylation of TACC3 by Aurora-A kinase. Representative micrographs of HEK293 cells incubated with 0.3 μM MLN8237 for 40 min. Cells were fixed and stained as indicated.</p>

데이터 출처 [ EMBO J , 2012 , 30, 906-19 ]

Sellecks Alisertib (MLN8237) 인용됨 380 출판물

Centromere protection requires strict mitotic inactivation of the Bloom syndrome helicase complex [ Nat Commun, 2025, 16(1):7832] PubMed: 40846865
Aurora A regulates the material property of spindle poles to orchestrate nuclear organization at mitotic exit [ EMBO J, 2025, 10.1038/s44318-025-00564-4] PubMed: 40940421
Targeted inhibition of Aurora kinase A promotes immune checkpoint inhibition efficacy in human papillomavirus-driven cancers [ J Immunother Cancer, 2025, 13(1)e009316] PubMed: 39773561
An Aurora kinase A-BOD1L1-PP2A B56 axis promotes chromosome segregation fidelity [ Cell Rep, 2025, 44(2):115317] PubMed: 39970043
The AURKA inhibitor alters the immune microenvironment and enhances targeting B7-H3 immunotherapy in glioblastoma [ JCI Insight, 2025, e173700] PubMed: 39928563
CDK1-mediated phosphorylation of LDHA fuels mitosis through LDHB-dependent lactate oxidation [ EMBO Rep, 2025, 10.1038/s44319-025-00573-8] PubMed: 40940446
Cellular senescence as a prognostic marker for predicting breast cancer progression in 2D and 3D organoid models [ Biomed Pharmacother, 2025, 189:118324] PubMed: 40616881
Actionable heterogeneity of hepatocellular carcinoma therapy-induced senescence [ Cancer Immunol Immunother, 2025, 74(7):207] PubMed: 40374812
Aurora B maintains spherical shape of mitotic cells via simultaneously stabilizing myosin II and vimentin [ J Mol Cell Biol, 2025, mjaf023] PubMed: 40795355
O 6-methylguanine DNA methyltransferase (MGMT) expression in U1242 glioblastoma cells enhances in vitro clonogenicity, tumor implantation in vivo, and sensitivity to alisertib-carboplatin combination treatment [ Front Cell Neurosci, 2025, 19:1552015] PubMed: 40336841

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