Bardoxolone Methyl (RTA 402)

Bardoxolone Methyl은 마우스 대식세포에서 인터페론-Ƴ에 의해 유도된 산화질소 생성에 대해 0.1 nM의 IC50을 갖는 강력한 억제 활성을 나타냅니다. [1] 이 화합물은 백혈병 HL-60, KG-1 및 NB4 세포의 생존력을 각각 0.4, 0.4 및 0.27 μM의 IC50으로 감소시킵니다. 이는 세포자멸사 촉진 Bax 단백질을 유도하고, ERK1/2 활성화를 억제하며, Bcl-2 인산화를 차단하여 세포자멸사 유도에 기여합니다. [2] 이 화학 물질은 TNF, 인터루킨(IL)-1beta, 포르볼 에스터, 오카다산, 과산화수소, 리포폴리사카라이드 및 담배 연기에 의해 활성화되는 구성적 및 유도성 NF-kappaB를 강력하게 억제합니다. [3]

Bardoxolone Methyl (60 mg/kg)은 생체 내 폐 종양의 수, 크기 및 심각도를 감소시킵니다. [4] 이 화합물은 LPS 공격 후 생체 내 염증성 사이토카인 반응을 유의하게 감소시키고, 비장에서 HO-1 단백질 발현을 유도하며, 치사량의 LPS로부터 마우스를 보호합니다. [5]

• IKK 분석

  CDDO-Me가 TNF 유도 IKK 활성화에 미치는 영향을 확인하기 위해 IKK를 분석합니다. 간략하게, 전체 세포 추출물로부터 IKK 복합체를 IKKα 및 IKKβ에 대한 항체로 침전시킨 다음 Protein A/G-Sepharose 비드로 처리했습니다. 2시간 후, 비드를 용해 완충액으로 세척한 다음 50 mmol/L HEPES (pH 7.4), 20 mmol/L MgCl₂, 2 mmol/L DTT, 20 μCi [γ-³²P]ATP, 10 μmol/L 비표지 ATP, 2 μg의 기질 글루타티온 S-트랜스퍼라제-IκBα (아미노산 1-54)를 포함하는 키나제 분석 혼합물에 재현탁했습니다. 30°C에서 30분 동안 배양한 후, SDS 시료 완충액으로 5분 동안 끓여 반응을 종료했습니다. 마지막으로, 단백질을 10% SDS-PAGE에서 분리하고, 겔을 건조한 다음, Storm820으로 방사능 밴드를 시각화했습니다. 각 시료에서 IKK-α 및 IKK-β의 총량을 결정하기 위해 50 μg의 전체 세포 단백질을 7.5% SDS-PAGE에서 분리하고, 니트로셀룰로스 막으로 전기 전이한 다음, 항-IKK-α 또는 항-IKK-β 항체로 블로팅했습니다.

• 세포주

  HL-60, KG-1, and NB4 cells

• 농도

  ~5 μM

• 배양 시간

  72 hours

• 방법

  Leukemic cell lines are cultured at a density of 3.0 × 10⁵ cells/mL, and AML mononuclear cells are cultured at 5 × 10⁵ cells/mL in the presence or absence of indicated concentrations of this compound. Appropriate amounts of DMSO (final concentration less than 0.05%) are included as control. For cytotoxicity studies, 1 μM ara-C is added to the cultures. After 24 to 72 hours, viable cells are counted with the trypan blue dye exclusion method using a hematocytometer.

• 동물 모델

  Female A/J mice are injected i.p. with vinyl carbamate.

• 용량

  ~60 mg/kg

• 투여

  Oral gavage