Bleomycin sulfate

UT-SCC-12A 및 UT-SCC-12B는 각각 14.2 nM 및 13 nM의 IC50으로 Bleomycin sulfate에 더 강한 내성을 보입니다. [1] 0.01 μg/mL에서 1 μg/mL의 이 화합물과 18시간 동안 배양된 폐포 대식세포는 이 화학 물질 없이 배양된 대식세포보다 섬유아세포 성장 인자를 유의하게 더 많이 분비합니다. 이 화합물로 자극된 대식세포는 이 화학 물질을 제거하고 신선한 (Bleomycin sulfate가 없는) 배지로 교체한 후에도 상당한 양의 섬유아세포 성장 인자를 계속 생산합니다. 이 화합물로 자극된 폐포 대식세포에 의한 섬유아세포 성장 인자 분비는 사이클로헥시미드와 5-리폭시게나제 억제제 NDGA (노르디하이드로구아이아르산) 및 BW755c에 의해 억제되는데, 이는 단백질 합성뿐만 아니라 아라키돈산 대사의 5-리폭시게나제 경로의 대사 산물이 활동의 완전한 발현에 필요하다는 것을 나타냅니다. [2] 이 화학 물질 (400 µg/mL)을 24시간 동안 배양하면 NTera-2 세포의 생존력이 감소하고, 카스파제-3, -8, -9 활성, Bax 및 세포질 cytochrome c 수준이 증가하며 Bcl-2 수준이 감소합니다. [3] 불안정한 염색체 이상 측면에서, 이 화합물이 ADIPO-P2 세포에 미치는 염색체 손상 효과는 노출 후 최소 10일 동안 지속됩니다. 이 화학 물질 유도성 포유류 세포의 텔로미어 불안정성은 노출 후 여러 세대 동안 지속됩니다. 더욱이, 처리 후 10일째에 이 화합물에 노출된 세포에서 텔로미어 융합의 출현은 이 화학 물질이 지연된 텔로미어 불안정성을 유도할 수 있음을 시사합니다. [4]

Bleomycin sulfate 투여 후 7일째, NOX-/- BALf의 CD45+ 세포는 WT보다 1.7배 많으며, 이 중 57%는 Mf로, 21일째에는 WT에서 67%, NOX-/-에서 83% 감소합니다. [5]

• 세포주

  ADIPO-P2 cells

• 농도

  2.5 μg/mL

• 배양 시간

  30 minutes

• 방법

  ADIPO-P2 cells are grown in D-MEM high glucose medium supplemented with 20% fetal calf serum, penicillin (100 U/mL) and streptomycin (100 μg/mL) at 37 °C and 5% CO₂ atmosphere. Cells are cultured as monolayer in TC25 Corning flasks containing 1.5 × 10⁵ cells/mL. For each experiment, two flasks are set up, one for the control and one for the treated culture. During the log phase of growth ADIPO-P2 cells are treated with a 30 minutes pulse of 2.5 μg/mL of Bleomycin sulfate. Control cultures are set up in parallel but not exposed to this compound. Time of exposure and concentration of this chemical are chosen according to previous studies carried out in our laboratory with mammalian cells exposed to it. At the end of the pulse treatment with this compound, the cells are washed twice with Hank's balanced salt solution and kept in culture with fresh culture medium until harvesting. Cells are continuously maintained in culture during 5 passages or subcultures after treatment. Subcultivation is carried out whenever the cultures became confluent (approximately 4 × 10⁵ cells/mL of culture medium). To estimate cell growth, at the time of subcultivation cells are collected by trypsinization, an aliquot of about 200 μL stained with 0.4% trypan blue, and the number of viable cells is determined. Cells are then suspended in fresh culture medium and dispensed into new culture flasks containing 1 × 10⁵ cells/mL to continue growing. The rest of the cells is discarded or dispensed in another flask for cytogenetic analysis, which is performed at 18 hours and 10 days after the end of treatments. To analyze chromosomal aberrations, colchicine (0.1 μg/mL) is added to cell cultures during the last 3 hours of culture. Chromosome preparations are made following standard procedures. After harvesting, cells are hypotonically shocked, fixed in methanol:acetic acid (3:1), spread onto glass slides and processed for PNA-FISH. Two independent experiments are carried out.

• 동물 모델

  CD-1 mice

• 용량

  5 mg/kg, 2 ml/kg

• 투여

  Administered via i.t.