Bortezomib

붕산 디펩티드인 Bortezomib은 잘못 접힌 단백질 분해에 주로 기능하며 세포 주기 조절에 필수적인 26S Proteasome의 고도로 선택적이고 가역적인 억제제입니다. 이 화합물에 노출되면 p21, p27 및 p53뿐만 아니라 세포자멸사 촉진 Bid 및 Bax 단백질, 카베올린-1, 그리고 핵 인자 κB 유도 세포 생존 경로의 활성화를 방지하는 억제제 κB-α를 안정화시키는 것으로 나타났습니다. 또한 세포자멸사 촉진 c-Jun-NH2 말단 키나아제 및 소포체 스트레스 반응의 활성화를 촉진합니다. 이러한 세포 단백질 수준의 변화는 암세포의 증식, 이동 억제 및 세포자멸사 촉진으로 이어집니다. [2] 이 화학 물질은 세포 내로 침투하여 ~0.1 μM의 농도로 장수명 단백질의 Proteasome 매개 세포내 단백질 분해를 50% 억제하는 것으로 나타났습니다. 미국 국립암연구소(NCI)의 여러 인체 종양에서 유래한 60개 암세포주 전체 패널에 걸쳐 이 화합물의 평균 50% 성장 억제 값은 7 nM입니다. PC-3 세포를 8시간 동안 (100 nM) 처리하면 G2-M기에 세포가 축적되고, G1기 세포 수가 이에 상응하여 감소합니다. 이는 24시간 및 48시간에 PC-3 세포를 각각 100 nM 및 20 nM의 IC50으로 사멸시킵니다. 이 물질은 처리 후 16-24시간에 핵 응축을 유도합니다. 이 처리는 24시간에 100 nM의 낮은 농도에서도 효과적인 시간 의존적 방식으로 PARP 절단을 유도합니다. [1]

단일 제제로서 Bortezomib의 항암 효과는 다발성 골수종, 성인 T-세포 백혈병, 폐암, 유방암, 전립선암, 췌장암, 두경부암, 결장암 및 흑색종의 이종이식 모델에서 입증되었습니다. [2] 이 화합물을 1.0 mg/kg 용량으로 18일간 매일 경구 투여하면 루이스 폐암 모델에서 종양 성장 지연 및 전이 수 감소를 유발합니다. 이 화합물은 최대 5 mg/kg의 단일 용량으로 유방암 세포의 생존 분획을 유의하게 감소시켰습니다. 이 화학 물질을 1.0 mg/kg 용량으로 4주 동안 매주 투여하면 전립선암 생쥐 이종이식 모델에서 종양 성장이 60% 감소합니다. 이 물질을 1.0 mg/kg 용량으로 4주 동안 처리하면 췌장암 생쥐 이종이식 성장률이 72% 또는 84% 감소하고, 종양 세포 세포자멸사가 증가합니다. 이 화합물을 1.0 mg/kg 용량으로 처리하면 인간 형질세포종 이종이식 성장이 유의하게 억제되고, 종양 세포 세포자멸사 및 전체 생존율이 증가하며, 종양 혈관 신생이 감소합니다. [3]

• 동역학적 방법

  전형적인 동역학적 실행에서, 2.00 mL의 분석 완충액(20 mM HEPES, 0.5 mM EDTA, 0.035% SDS, pH 7.8)과 DMSO에 있는 Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC를 3 mL 형광 큐벳에 첨가하고, 큐벳을 형광 분광 광도계의 재킷형 셀 홀더에 놓습니다. 반응 온도는 순환식 항온수조에 의해 37℃로 유지됩니다. 반응 용액이 열 평형에 도달한 후 (5분), 1 μL-10 μL의 스톡 효소 용액을 큐벳에 첨가합니다. 반응 진행은 펩타이드-AMC 기질에서 AMC의 분해에 수반되는 440 nm (λ_ex= 380 nm)에서 형광 방출 증가에 의해 모니터링됩니다.

• 세포주

  Human multiple myeloma cells line U266

• 농도

  ~10 μM

• 배양 시간

  2 days

• 방법

  The inhibitory effect of Bortezomib on cell growth is assessed by measuring MTT dye absorbance of the cells. Cells from 48-hour cultures are pulsed with 10 μL of 5 mg/mL MTT to each well for the last 4 hour of 48-hour cultures, followed by 100 μL of isopropanol containing 0.04 N HCl. Absorbance is measured at 570 nm using a spectrophotometer.

• 동물 모델

  Human plasmacytoma xenografts RPMI 8226

• 용량

  1 mg/kg

• 투여

  i.v. twice weekly for 4 weeks, then once weekly