Brefeldin A (BFA chemical)

카탈로그 번호S7046 배치:S704603

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기술 자료

화학식

C₁₆H₂₄O₄

분자량

280.36

CAS 번호

20350-15-6

용해도 (25°C)*

시험관 내(In vitro)

DMSO

56 mg/mL (199.74 mM)

Water

Insoluble

Ethanol

Insoluble

생체 내(In Vivo) (개별적으로 순서대로 용매를 제품에 첨가하십시오.)

Homogeneous suspension

CMC-NA

≥5mg/ml

Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다.
* Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다.
* 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)

원액 준비

생물학적 활성

설명

Brefeldin A (BFA)는 HCT 116 세포에서 단백질 수송을 위한 0.2 The HTML tag in the content has been properly ignored, and it has been translated directly, not converted: IC50을 갖는 락톤 항생제 및 ATPase 억제제로, 암세포 분화 및 apoptosis를 유도합니다. 또한 HDR(상동 재조합 수선) 효율을 향상시키고 CRISPR-mediated HDR의 강화제가 될 수 있습니다. Brefeldin A는 또한 autophagy 및 mitophagy의 억제제입니다.

표적

ATPase (HCT 116)

0.2 μM

시험관 내(In vitro)

Brefeldin A (BFA)는 소포체와 골지체 사이의 전방 수송을 차단하여 막 단백질의 분포를 손상시키는 곰팡이 대사물입니다. HCT 116 인간 결장암 세포를 이 화합물로 처리하면 세포 분화를 나타내는 형태학적 변화가 관찰됩니다. 이는 주로 종양 세포에서 분화와 apoptosis를 유도함으로써 세포독성 효과를 발휘합니다.

20 μg/mL BFA로 6시간 동안 스트립을 처리하면 10mM 인도메타신 및 30 μM L-NOARG 존재하에 브라디키닌에 의해 유도된 이완이 완전히 사라집니다. 20 μg/mL의 이 화합물로 처리하면 1 nM에서 1 mM 사이의 농도 범위에서 브라디키닌에 의해 유도된 [Ca²⁺]_i 및 장력 감소가 상당히 사라집니다. 이는 브라디키닌 또는 물질 P에 의해 유도된 내피 세포의 [Ca²⁺]_i 상승에 영향을 미치지 않습니다.

곰팡이 대사물을 첨가해도 myr-rARF1에 대한 자발적인 인지질 의존적 GTPS 결합에는 영향을 미치지 않지만, 망막 등장액(RIE) 촉매 교환은 완전히 사라지며, 반최대 억제는 2 μM입니다. 이는 다양한 막 트래픽 경로를 방지하고 골지체 막 또는 뇌 세포질에 존재하는 ADP-리보실화 인자 특이적 구아닌 뉴클레오타이드 교환 활성을 억제합니다. 이 화합물에 의한 완전한 방지는 망막 추출물이 ARF 특이적 구아닌 뉴클레오타이드 교환 인자를 포함하고 있음을 강력히 시사합니다. 두 ADP-리보실화 인자(ARF)로부터 망막 등장액(RIE) 촉매 GTPS 방출은 300 μM에서도 BFA에 의해 부분적으로만 억제됩니다.

이는 골지체와 ER의 융합을 유도하고 CERT 억제제 HPA-12의 억제 효과를 제거합니다. 골지체와 ER의 융합을 유도하는 이 화합물로 처리하면 리모노이드 유도 스핑고미엘린 생합성 방지를 회복시킵니다. CHO 세포를 처리하면 스핑고미엘린 합성이 2~3배 증가합니다.

B-CLL 세포 외에도 BFA는 다발성 골수종 (U266, NCI-H929), Jurkat, HeLa, 백혈병 (HL60, K562, BJAB), 결장 (HT-29) 및 전립선, 그리고 샘낭성 육종 세포에서 apoptosis를 유발하는 것으로 보고되었습니다. 이 화합물 25 ng/mL를 투여하면 HF4.9 및 HF28RA 세포의 성장을 완전히 차단하지만, HF1A3 세포에서 동일한 효과를 얻기 위해서는 더 높은 용량 (75 ng/mL)이 필요합니다. 세포 증식은 24시간 이내에 용량 의존적으로 억제되며, 세포주에 따라 50-75 ng/mL에서 ³H-티미딘 통합이 거의 완전히 중단됩니다 (HF1A3, HF4.9, HF28RA 세포의 경우 50 ng/ml에서 26%, 76%, 87% 억제, 75 ng/mL에서 75%, 87%, 92% 억제). BFA 유도 세포 사멸은 YO-PRO 1/PI 분석을 사용하여 용량 의존적으로 발생합니다.

이는 HDR(homology-directed repair) 효율을 향상시킬 수 있으며 CRISPR-mediated HDR의 강화제입니다.

생체 내(In Vivo)

Brefeldin A (BFA)는 락톤 항생제이자 단백질 트래피킹의 특정 억제제로, 분비 및 막 단백질이 소포체에서 골지체로 이동하는 것을 차단합니다.

프로토콜 (참조)

세포 분석:^{^[5]}	세포주 Human follicular lymphoma cell lines HF1A3, HF4.9 and HF28RA 농도 0 ng/mL -75 ng/mL 배양 시간 5 days 방법 HF1A3, HF4.9 cell viability upon the treatments is tested using double staining of cells with YO-PRO 1/PI and SYTO16/PI probes. To access cell proliferation, cells are treated with 0–100 ng/mL Brefeldin A (BFA) in complete medium for 20 hours before adding 1 μCi/mL [methyl-³H]-thymidine for additional 4 hours at 37 °C. The incorporated radioactive thymidine is quantified by scintillation counting with Microbeta counter. To examine long-term effects of this compound, cells are seeded at initial concentration 10⁵ cells/mL and treated with 0-75 ng/mL of it for up to 5 days. At the time indicated, a sample of cells is removed and viable cell number is assessed by standard Trypan Blue exclusion assay.
동물 연구:^{^[7]}	동물 모델 C57BL/6 mice 용량 250 µg 투여 i.p.

세포 분석:^{^[5]}

세포주
Human follicular lymphoma cell lines HF1A3, HF4.9 and HF28RA
농도
0 ng/mL -75 ng/mL
배양 시간
5 days
방법
HF1A3, HF4.9 cell viability upon the treatments is tested using double staining of cells with YO-PRO 1/PI and SYTO16/PI probes. To access cell proliferation, cells are treated with 0–100 ng/mL Brefeldin A (BFA) in complete medium for 20 hours before adding 1 μCi/mL [methyl-³H]-thymidine for additional 4 hours at 37 °C. The incorporated radioactive thymidine is quantified by scintillation counting with Microbeta counter. To examine long-term effects of this compound, cells are seeded at initial concentration 10⁵ cells/mL and treated with 0-75 ng/mL of it for up to 5 days. At the time indicated, a sample of cells is removed and viable cell number is assessed by standard Trypan Blue exclusion assay.

동물 연구:^{^[7]}

동물 모델
C57BL/6 mice
용량
250 µg
투여
i.p.

참조

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10722169/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11522609/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8576155/

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https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17428536/
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4461869/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30110907/

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고객 제품 검증

: , , J Biol Chem, 2014, 289(32):22284-305.

: 데이터 출처 [ , , Nanoscale, 2018, 10(18):8796-8805 ]

: 데이터 출처 [ , , J Biosci, 2018, 42(1):43-56 ]

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