데이터시트

생물학적 설명

특이성	CaV1.3 Antibody [G19D14]는 총 CaV1.3 단백질의 내인성 수준을 검출합니다.
배경	심장 흥분-수축 결합은 심근세포의 전기적 자극이 심장의 근육 수축을 유발하는 일련의 사건을 말합니다. L형 Ca²⁺ 채널은 칼슘 유입을 촉진하고 막 흥분성에 기여하므로 이 과정에 중요합니다. Cav1.1, Cav1.2, Cav1.3 및 Cav1.4의 4가지 L형 Ca²⁺ 채널 서브타입이 확인되었습니다. Cav1.1은 주로 골격근에서 발견되는 반면, Cav1.4는 주로 망막과 특정 면역 세포에서 발현됩니다. Cav1.3은 심장, 뉴런의 체성수상돌기 영역, 내분비 세포 및 감각 세포에 존재합니다. 심장에서 Cav1.3 활성은 여러 신경전달물질에 의해 조절됩니다. cAMP 의존성 단백질 키나제 A(PKA)에 의한 인산화는 C-말단 영역 내의 세린 잔기 1743 및 1816에서 발생합니다. 단백질 키나제 C(PKC)도 N-말단 도메인의 세린 81 인산화를 통해 이소자임 특이적 방식으로 Cav1.3을 조절합니다. 또한, C-말단 내의 대체 스플라이싱은 채널 행동에 영향을 미치며, 특히 Ca²⁺ 의존성 불활성화를 감소시킵니다. 기능적으로 Cav1.3은 심장 박동 조율 및 방실(AV) 전도에 기여합니다. Cav1.3의 기능 장애는 동방결절 및 AV결절 이상뿐만 아니라 심방세동 발병과 관련이 있습니다.

특이성

CaV1.3 Antibody [G19D14]는 총 CaV1.3 단백질의 내인성 수준을 검출합니다.

배경

심장 흥분-수축 결합은 심근세포의 전기적 자극이 심장의 근육 수축을 유발하는 일련의 사건을 말합니다. L형 Ca²⁺ 채널은 칼슘 유입을 촉진하고 막 흥분성에 기여하므로 이 과정에 중요합니다. Cav1.1, Cav1.2, Cav1.3 및 Cav1.4의 4가지 L형 Ca²⁺ 채널 서브타입이 확인되었습니다. Cav1.1은 주로 골격근에서 발견되는 반면, Cav1.4는 주로 망막과 특정 면역 세포에서 발현됩니다. Cav1.3은 심장, 뉴런의 체성수상돌기 영역, 내분비 세포 및 감각 세포에 존재합니다. 심장에서 Cav1.3 활성은 여러 신경전달물질에 의해 조절됩니다. cAMP 의존성 단백질 키나제 A(PKA)에 의한 인산화는 C-말단 영역 내의 세린 잔기 1743 및 1816에서 발생합니다. 단백질 키나제 C(PKC)도 N-말단 도메인의 세린 81 인산화를 통해 이소자임 특이적 방식으로 Cav1.3을 조절합니다. 또한, C-말단 내의 대체 스플라이싱은 채널 행동에 영향을 미치며, 특히 Ca²⁺ 의존성 불활성화를 감소시킵니다. 기능적으로 Cav1.3은 심장 박동 조율 및 방실(AV) 전도에 기여합니다. Cav1.3의 기능 장애는 동방결절 및 AV결절 이상뿐만 아니라 심방세동 발병과 관련이 있습니다.

사용 정보

응용

IHC, FCM

희석

IHC

1:100

반응성

Human, Mouse

출처

Mouse Monoclonal Antibody

MW

보관 완충액

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

보관
(수령일로부터)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

실험 방법
IHC	Experimental Protocol： Deparaffinization/Rehydration 1. Deparaffinize/hydrate sections: 2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each. 3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each. 4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each. 5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each. 6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min. Staining 1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each. 2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min. 3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 4. Wash sections in wash buffer for 5 min. 5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature. 6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C. 7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each. 8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature. 9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each. 10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use. 11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity. 12. Immerse slides in dH2O. 13. If desired, counterstain sections with hematoxylin. 14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each. 16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

실험 방법

IHC

Experimental Protocol：

Deparaffinization/Rehydration

1. Deparaffinize/hydrate sections:

2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.

3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.

4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.

5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.

6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.

Staining

1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.

2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.

3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

4. Wash sections in wash buffer for 5 min.

5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.

6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.

7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.

8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.

9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.

10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.

11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.

12. Immerse slides in dH2O.

13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.

14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.

16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

참조

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37025382/

적용 데이터

IHC

Selleck 검증

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human colorectal cancer tissue with F3798 at 1:1000 dilution.