D-Luciferin Potassium Salt

카탈로그 번호S6580 배치:S658001

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기술 자료

화학식

C₁₁H₇KN₂O₃S₂

분자량

318.41

CAS 번호

115144-35-9

용해도 (25°C)*

시험관 내(In vitro)

Water

16 mg/mL (50.24 mM)

DMSO

4 mg/mL (12.56 mM)

Ethanol

Insoluble

생체 내(In Vivo) (개별적으로 순서대로 용매를 제품에 첨가하십시오.)

Homogeneous suspension

CMC-NA

≥5mg/ml

Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다.
* Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다.
* 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)

원액 준비

생물학적 활성

설명	D-루시페린은 반딧불이의 전형적인 황록색 빛 생성을 촉매하는 효소 루시퍼라제(Luc)의 천연 기질입니다. 이 반응의 560 nm 화학발광은 기질 루시페린이 과량 존재할 때 루시퍼라제 농도에 비례하는 빛 출력을 나타내며 몇 초 내에 최고조에 달합니다. 루시퍼라제(luc) 유전자는 연구 및 시약 스크리닝을 위한 인기 있는 리포터 유전자입니다. 화학발광 기술은 사실상 배경 노이즈가 없어 luc 리포터 유전자가 낮은 수준의 유전자 발현을 감지하는 데 이상적입니다. 유전자 발현의 리포터 역할 외에도 루시퍼라제는 ATP에 대한 매우 민감한 분석에 일반적으로 사용됩니다.
시험관 내(In vitro)	1.체외 생물발광 영상 분석을 위한 예시 프로토콜 a) 멸균수에 100 mM (100-200X) 루시페린 스톡 용액을 준비합니다. 잘 섞습니다. 즉시 사용하거나, 1회용 분취액을 만들어 -20℃에 보관하고, 동결-해동 주기를 피하고, 빛에 노출되지 않도록 합니다. b) 예열된 조직 배양 배지에 0.5-1 mM D-Luciferin 작업 용액을 준비합니다. c) 배양된 세포에서 배지를 흡인합니다. d) 세포에 루시페린 작업 용액을 추가하고, 영상화 직전 37℃에서 5-10분 동안 세포를 배양합니다. 2.생체 내 생물발광 영상 분석을 위한 예시 프로토콜 a) Mg2+ 및 Ca2+가 없는 DPBS에 15 mg/mL 루시페린 스톡 용액을 준비합니다. 잘 섞습니다. b) 용액을 0.2 μm 필터를 통해 멸균 여과합니다. 즉시 사용하거나, 1회용 분취액을 만들어 -20℃에 보관하고, 동결-해동 주기를 피하고, 빛에 노출되지 않도록 합니다. c) 영상화 10-15분 전에 동물 체중의 150 mg/kg (또는 루시페린 스톡 용액 10 μL/g)으로 루시페린을 복강 내(i.p.) 주사합니다. 참고: 각 동물 모델에 대해 루시페린의 동역학 연구를 수행하여 피크 신호 시간을 결정해야 합니다. 3.루시페린 리포터 분석을 위한 예시 프로토콜 a) 멸균수에 100 mM 루시페린 스톡 용액을 준비합니다. 즉시 사용하거나, 1회용 분취액을 만들어 -20℃에 보관하고, 동결-해동 주기를 피하고, 빛에 노출되지 않도록 합니다. b) 25 mM 트라이신 버퍼 pH 7.8에 3 mM ATP, 1 mM DTT 및 15 mM MgSO4와 함께 1 mM D-Luciferin 작업 용액을 준비합니다. c) 5-10 μL의 세포 용해물을 마이크로플레이트에 피펫팅합니다. 용해물이 없는 용해 시약 또는 버퍼를 공백으로 사용합니다. d) 루시페린 작업 용액으로 발광계를 프라이밍합니다. e) 지연 없이 200 μL의 루시페린 작업 용액을 10초 통합 시간으로 주사합니다.

설명

D-루시페린은 반딧불이의 전형적인 황록색 빛 생성을 촉매하는 효소 루시퍼라제(Luc)의 천연 기질입니다. 이 반응의 560 nm 화학발광은 기질 루시페린이 과량 존재할 때 루시퍼라제 농도에 비례하는 빛 출력을 나타내며 몇 초 내에 최고조에 달합니다. 루시퍼라제(luc) 유전자는 연구 및 시약 스크리닝을 위한 인기 있는 리포터 유전자입니다. 화학발광 기술은 사실상 배경 노이즈가 없어 luc 리포터 유전자가 낮은 수준의 유전자 발현을 감지하는 데 이상적입니다. 유전자 발현의 리포터 역할 외에도 루시퍼라제는 ATP에 대한 매우 민감한 분석에 일반적으로 사용됩니다.

시험관 내(In vitro)

1.체외 생물발광 영상 분석을 위한 예시 프로토콜
a) 멸균수에 100 mM (100-200X) 루시페린 스톡 용액을 준비합니다. 잘 섞습니다. 즉시 사용하거나, 1회용 분취액을 만들어 -20℃에 보관하고, 동결-해동 주기를 피하고, 빛에 노출되지 않도록 합니다.
b) 예열된 조직 배양 배지에 0.5-1 mM D-Luciferin 작업 용액을 준비합니다.
c) 배양된 세포에서 배지를 흡인합니다.
d) 세포에 루시페린 작업 용액을 추가하고, 영상화 직전 37℃에서 5-10분 동안 세포를 배양합니다.
2.생체 내 생물발광 영상 분석을 위한 예시 프로토콜
a) Mg2+ 및 Ca2+가 없는 DPBS에 15 mg/mL 루시페린 스톡 용액을 준비합니다. 잘 섞습니다.
b) 용액을 0.2 μm 필터를 통해 멸균 여과합니다. 즉시 사용하거나, 1회용 분취액을 만들어 -20℃에 보관하고, 동결-해동 주기를 피하고, 빛에 노출되지 않도록 합니다.
c) 영상화 10-15분 전에 동물 체중의 150 mg/kg (또는 루시페린 스톡 용액 10 μL/g)으로 루시페린을 복강 내(i.p.) 주사합니다.
참고: 각 동물 모델에 대해 루시페린의 동역학 연구를 수행하여 피크 신호 시간을 결정해야 합니다.
3.루시페린 리포터 분석을 위한 예시 프로토콜
a) 멸균수에 100 mM 루시페린 스톡 용액을 준비합니다. 즉시 사용하거나, 1회용 분취액을 만들어 -20℃에 보관하고, 동결-해동 주기를 피하고, 빛에 노출되지 않도록 합니다.
b) 25 mM 트라이신 버퍼 pH 7.8에 3 mM ATP, 1 mM DTT 및 15 mM MgSO4와 함께 1 mM D-Luciferin 작업 용액을 준비합니다.
c) 5-10 μL의 세포 용해물을 마이크로플레이트에 피펫팅합니다. 용해물이 없는 용해 시약 또는 버퍼를 공백으로 사용합니다.
d) 루시페린 작업 용액으로 발광계를 프라이밍합니다.
e) 지연 없이 200 μL의 루시페린 작업 용액을 10초 통합 시간으로 주사합니다.

프로토콜 (참조)

동물 연구:^{^[2]}	동물 모델 Female NCI Athymic nu/nu nude mice 용량 3 mg/100 μL 투여 i.p.

참조

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25992288/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33485378/

Sellecks D-Luciferin Potassium Salt 인용됨 4 출판물

Carbenoxolone disodium suppresses the migration of gastric cancer by targeting HDAC6 [ Future Med Chem, 2023, 15(4):333-344]	PubMed: 36946221
A magneto-controlled biocatalytic cascade with a fluorescent output [ Org Biomol Chem, 2022, 20(9):1869-1873]	PubMed: 35156979
Leronlimab, a humanized monoclonal antibody to CCR5, blocks breast cancer cellular metastasis and enhances cell death induced by DNA damaging chemotherapy [ Breast Cancer Res, 2021, 23(1):11]	PubMed: 33485378
KDM4A-mediated histone demethylation of SLC7A11 inhibits cell ferroptosis in osteosarcoma [ Biochem Biophys Res Commun, 2021, 550:77-83]	PubMed: 33689883

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