Fludarabine

Fludarabine은 RPMI 8226 세포의 증식을 IC50 1.54 μg/mL로 효율적으로 억제합니다. 이 화합물의 MM.1S 및 MM.1R 세포에 대한 IC50은 각각 13.48 μg/mL 및 33.79 μg/mL입니다. 반대로, U266 세포는 이 화학물질에 내성이 있으며 IC50은 222.2 μg/mL입니다. 이 화합물 치료는 세포 주기 G1기 세포 수를 증가시키며, 시간 의존적으로 세포 주기 S기 세포의 동시 감소를 동반합니다. 이는 MM 세포에서 세포 주기 차단을 유도하고 세포자멸사를 유발합니다. 시간 의존적으로 caspase-8, -9, -3, -7의 분열을 유발하고, 이어서 PARP 분열을 유발합니다. Bax의 발현을 시간 의존적으로 증가시키지만, Bak의 발현은 변하지 않습니다. 이 화학물질에 12시간 노출된 후, RPMI 8226 세포는 막 전위 손실을 보이며, untreated 대조군 세포의 8.62%에 비해 61.05%의 세포가 로다민 123의 낮은 형광을 나타냅니다. [1] 용해도를 높이기 위해, 이는 모노포스페이트(F-ara-AMP, fudarabine)로 제형화되며, 이는 정맥 주입 시 부모 뉴클레오사이드로 즉시 그리고 정량적으로 탈인산화됩니다. 세포 내에서 재인산화가 발생하여 F-ara-A의 주요 세포독성 대사산물인 푸오라데닌 아라비노사이드 트리포스페이트(F-ara-ATP)로 이어집니다. [2] 또한 ICAM-1 발현 증가 및 IL-8 방출로 평가된 바와 같이 단핵세포의 전염증성 자극을 유도할 수 있습니다. [3] 이 화합물은 난소암 세포주의 성장에 영향을 미치지 않는 반면, 흑색종 세포주의 증식을 현저하고 용량 의존적으로 억제합니다. [4] 이는 다른 STAT 계열 구성원에게 영향을 미치지 않고 STAT1을 특이적으로 감소시키는 STAT1 억제제입니다[5]. 세포질 축적 외에도 반복적인 저용량 시스플라틴(RLDC)은 STAT1 녹다운에 의해 현저히 억제되는 HMGB1 발현을 유도합니다. 일관되게, 이 화학물질은 RLDC 치료 신장 세뇨관 세포에서 RLDC 치료 동안 용량 의존적으로 HMGB1 발현을 억제합니다[5].

PBS로 처리된 종양은 25일 만에 초기 부피의 약 10배로 빠르게 성장하는 반면, 40mg/kg의 Fludarabine으로 처리된 종양은 5배 미만으로 증가합니다. RPMI8226 종양 성장에 대한 이 화합물 40mg/kg의 유의미한 항종양 효과가 입증되었습니다. 10일째 40mg/kg의 이 화학물질로 처리된 RPMI8226 종양은 세포자멸사 핵이 증가합니다. 이 화합물은 SCID 마우스의 RPMI8226 골수종 이종이식을 억제하는 데 효과적입니다. [1]

• 세포주

  Dexamethasone-sensitive (MM.1S) and -resistant (MM.1R) human MM cell lines, RPMI8226 and U266 cell lines

• 농도

  2 μg/mL

• 배양 시간

  24 hours

• 방법

  After treated with Fludarabine or control, dexamethasone-sensitive (MM.1S) and -resistant (MM.1R) human MM cell lines, RPMI8226 and U266 cell lines (5 × 10⁵ cells) are washed twice in phosphate-buffered saline (PBS) and fixed with 70% ice-cold ethanol, then centrifuged and suspended in PBS containing 100 μg/mL RNase A. After incubated for 30 minutes at 37 ºC, samples are resuspended in 25 μg/mL propidium iodide. Flow cytometry is performed on a FACSCalibur automated system. Apoptosis is determined by Annexin V-FITC apoptosis detection kit, according to the manufacturer's instructions. For TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate nick end labeling) assay, cells are analyzed by flow cytometry using the in situ cell death detection kit.

• 동물 모델

  Severe combined immunodeficient (SCID) mice bearing RPMI 8226 cells

• 용량

  40 mg/kg

• 투여

  Administered via i.p.