GNF-2

카탈로그 번호S2899 배치:S289902

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기술 자료

화학식

C₁₈H₁₃F₃N₄O₂

분자량

374.32

CAS 번호

778270-11-4

용해도 (25°C)*

시험관 내(In vitro)

DMSO

74 mg/mL (197.69 mM)

Water

Insoluble

Ethanol

Insoluble

생체 내(In Vivo) (개별적으로 순서대로 용매를 제품에 첨가하십시오.)

Homogeneous suspension

CMC-NA

≥5mg/ml

Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다.
* Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다.
* 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)

원액 준비

생물학적 활성

설명

GNF-2는 Bcr-Abl에 대한 고도로 선택적인 비-ATP 경쟁적 억제제이며, Flt3-ITD, Tel-PDGFR, TPR-MET 및 Tel-JAK1 변형 종양 세포에 대한 활성을 나타내지 않습니다.

표적

Bcr-Abl (SUP-B15 cell line)	Bcr-Abl (K562 cell line)
268 nM	273 nM

시험관 내(In vitro)

GNF-2는 Bcr-abl 양성 세포주에서 IC50 값 273 nM (K562) 및 268 nM (SUP-B15)으로 용량 의존적인 성장 억제를 유발합니다. 이 화합물은 Ba/F3.p210^E255V 및 Ba/F3.p185^Y253H 세포의 성장을 각각 268 nM 및 194 nM의 IC50 값으로 억제합니다. 이 화학 물질 (1 μM)은 Ba/F3.p210 세포뿐만 아니라 Ba/F3.p210^E255V 세포의 세포자멸사를 유도합니다. 이는 Bcr-abl의 세포 내 티로신 인산화를 267 nM의 IC50로 용량 의존적으로 억제합니다. 이 화합물 (1 μM)은 Ba/F3.p210 세포에서 phospho-Stat5 수준의 유의미한 감소를 유도합니다. 이는 Bcr-abl의 미리스트산 결합 포켓에 결합합니다. 이 억제제는 인산화효소 도메인의 C-lobe에 있는 미리스트산 결합 포켓에 결합함으로써 미리스트산화되지 않은 c-Abl의 인산화효소 활성을 미리스트산화된 c-Abl보다 더 강력하게 억제합니다. 이 약물 (10 μM)은 BCR-Abl 의존적인 세포 증식을 억제하기 위해 BCR 및/또는 c-Abl SH3 및/또는 SH2 도메인을 필요로 합니다. 이는 메틸화된 GNF-2 유사체가 아닌, 3T3 섬유아세포에서 유래한 세포 추출물에서 c-Abl에 결합합니다. 이 화합물 (10 μM)은 용량 의존적으로 CrkII의 티로신 인산화를 명확하게 억제합니다. 이는 c-AblG2A 발현 세포에서 0.051 μM의 IC50로 CrkII의 인산화를 억제합니다. 이 화학 물질은 미리스트산 리간드의 마지막 두 탄소와 동일한 깊이에 CF3 그룹이 묻혀 있는 미리스트산 포켓에서 확장된 형태로 결합합니다. 이 화합물 (10 µM)과 이마티닙 (1 µM)의 조합은 1 µM 이마티닙에 대한 내성 클론의 수를 최소 90% 감소시킵니다. 이는 p210Bcr–Abl 및 p210Bcr–Abl 돌연변이를 발현하는 BafF3 세포의 자가 인산화 및 증식을 억제합니다. 이 약물 (8 nM)은 GNF-5 (20 nM)와 함께 Abl64–515 인산화효소 활성 억제와 관련하여 상가적인 효과를 나타냅니다.

프로토콜 (참조)

키나아제 분석:^{^[2]}	결합 분석 재조합 단백질 (각 구조물에 대해 100 nM) 또는 면역 침전된 단백질은 키나아제 완충액 (20 mM HEPES (pH 7.4), 50 mM KCl, 0.1% CHAPS, 30 mM MgCl₂, 2 mM MnCl₂, 1 mM DTT, 1% 글리세롤)에 희석됩니다. 희석된 단백질의 분취액은 DMSO 또는 이 화합물과 함께 실온에서 30분 동안 전배양한 다음 K-LISA PTK EAY 반응 플레이트에 추가됩니다. 키나아제 반응은 0.1 mM ATP를 추가하여 시작되며 실온에서 30분 동안 진행됩니다. GST-Abltide의 인산화는 SDS-PAGE 및 인광 이미지 분석 또는 방사선 자가 현상으로 모니터링됩니다.
세포 분석:^{^[1]}	세포주 Ba/F3.p210, Ba/F3.p210^E255V and Ba/F3.p185^Y253H cells 농도 ~10 μM 배양 시간 48 hours 방법 Cells (0.3-0.6 × 10⁶ per mL) are plated in duplicate or triplicate in 96-well plates containing increasing GNF-2 concentrations (5 nM–10 μM). After incubation at 37 ℃ in 5% CO₂ for 48 hours, the effect of this compound on cell viability is determined by the MTT colorimetric dye reduction method. Inhibition of cell proliferation is calculated as a percentage of growth of DMSO-treated cells, and IC50 values are determined with Microsoft Excel XLfit3.

키나아제 분석:^{^[2]}

결합 분석
재조합 단백질 (각 구조물에 대해 100 nM) 또는 면역 침전된 단백질은 키나아제 완충액 (20 mM HEPES (pH 7.4), 50 mM KCl, 0.1% CHAPS, 30 mM MgCl₂, 2 mM MnCl₂, 1 mM DTT, 1% 글리세롤)에 희석됩니다. 희석된 단백질의 분취액은 DMSO 또는 이 화합물과 함께 실온에서 30분 동안 전배양한 다음 K-LISA PTK EAY 반응 플레이트에 추가됩니다. 키나아제 반응은 0.1 mM ATP를 추가하여 시작되며 실온에서 30분 동안 진행됩니다. GST-Abltide의 인산화는 SDS-PAGE 및 인광 이미지 분석 또는 방사선 자가 현상으로 모니터링됩니다.

세포 분석:^{^[1]}

세포주
Ba/F3.p210, Ba/F3.p210^E255V and Ba/F3.p185^Y253H cells
농도
~10 μM
배양 시간
48 hours
방법
Cells (0.3-0.6 × 10⁶ per mL) are plated in duplicate or triplicate in 96-well plates containing increasing GNF-2 concentrations (5 nM–10 μM). After incubation at 37 ℃ in 5% CO₂ for 48 hours, the effect of this compound on cell viability is determined by the MTT colorimetric dye reduction method. Inhibition of cell proliferation is calculated as a percentage of growth of DMSO-treated cells, and IC50 values are determined with Microsoft Excel XLfit3.

참조

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16415863/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19679652/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20072125/

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20152788/

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고객 제품 검증

: 데이터 출처 [ , , Oncotarget, 2017, 8(24):38717-38730 ]

Sellecks GNF-2 인용됨 8 출판물

A multiplexed siRNA screen identifies key kinase signaling networks of brain glia [ Life Sci Alliance, 2023, 6(5)e202201605]	PubMed: 36878638
Imatinib protects against human beta-cell death via inhibition of mitochondrial respiration and activation of AMPK [ Clin Sci (Lond), 2021, 135(19):2243-2263]	PubMed: 34569605
Quantitative, Wide-Spectrum Kinase Profiling in Live Cells for Assessing the Effect of Cellular ATP on Target Engagement [Vasta JD Cell Chem Biol, 2018, 25(2):206-214]	PubMed: 29174542
Abl and Arg mediate cysteine cathepsin secretion to facilitate melanoma invasion and metastasis [ Sci Signal, 2018, 11(518)eaao0422]	PubMed: 29463776
Coronavirus S protein-induced fusion is blocked prior to hemifusion by Abl kinase inhibitors. [ J Gen Virol, 2018, 99(5):619-630]	PubMed: 29557770
Comparative Characterization of Osteoclasts Derived From Murine Bone Marrow Macrophages and RAW 264.7 Cells Using Quantitative Proteomics. [ JBMR Plus, 2018, 2(6):328-340]	PubMed: 30460336
Abl kinase regulation by BRAF/ERK and cooperation with Akt in melanoma. [ Oncogene, 2017, 36(32):4585-4596]	PubMed: 28368422
Contributions of MET activation to BCR-ABL1 tyrosine kinase inhibitor resistance in chronic myeloid leukemia cells. [Tsubaki M, et al. Oncotarget, 2017, 8(24):38717-38730]	PubMed: 28418880

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