GSK-J4 Hydrochloride

카탈로그 번호S7070 배치:S707007

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기술 자료

화학식

C24H27N5O2.HCl
분자량 453.96 CAS 번호 1797983-09-5
용해도 (25°C)* 시험관 내(In vitro) DMSO 91 mg/mL (200.45 mM)
Ethanol 91 mg/mL (200.45 mM)
Water 10 mg/mL (22.02 mM)
생체 내(In Vivo) (개별적으로 순서대로 용매를 제품에 첨가하십시오.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Selleck 연구소에서 검증했습니다. 이 제형에 대한 조정이 필요한 경우 맞춤형 테스트를 위해 당사 영업팀에 문의하십시오.

 5.000mg/ml (11.01mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다.
* Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다.
* 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)

원액 준비

생물학적 활성

설명 GSK J4 HCl은 GSK J1의 세포 투과성 프로드럭으로, 세포 없는 분석에서 60nM의 IC50을 가지며 JMJ 계열의 데메틸라제 패널에 대해 비활성인 H3K27 histone demethylase JMJD3 및 UTX의 첫 번째 선택적 억제제입니다.
표적
JMJD3
(Cell-free assay)
60 nM
시험관 내(In vitro)

GSK J4 HCl은 JMJD3 선택적 히스톤 데메틸라제 억제제 GSK-J1의 에틸 에스터 유도체로, 시험관 내에서 50 μM보다 큰 IC50 값을 가집니다. 이 화합물은 H3K27me3의 데메틸화 결과에 대한 탐색에 사용됩니다. 인간 원발성 대식세포에서 이 화학 물질은 지질다당류 유도 사이토카인 생성(염증성 종양 괴사 인자(TNF) 포함)을 억제합니다. 또한, TNF 전사 개시 부위와 관련된 지질다당류 유도 H3K27me3 손실을 방지하고 RNA 중합효소 II의 모집을 차단합니다.

생체 내(In Vivo)

GSK-J4 hydrochloride는 H3K27me3/me2-데메틸라제 JMJD3/KDM6B 및 UTX/KDM6A의 강력한 이중 억제제입니다. 인간 원발성 대식세포에서 LPS 유도 TNF-α 생성을 억제합니다. 이 화합물은 GSK-J1의 세포 투과성 프로드럭입니다.

프로토콜 (참조)

키나아제 분석:

[1]
  • Histone Demethylase AlphaScreen

    히스톤 데메틸라제 억제는 히스톤 데메틸라제 AlphaScreen 분석(증폭된 발광 근접 균일 분석)을 사용하여 평가됩니다. 이 분석은 바이오틴화된 펩타이드 기질을 사용하며, 단백질 A 수용체 비드에 결합된 특정 항체와 펩타이드를 포획하는 스트렙타비딘 공여 비드를 사용하여 생성물 메틸 마크를 감지하는 데 의존합니다. 간단히 말해, 재조합 데메틸라제 효소는 황산제일암모늄(FAS) 형태의 Fe2+, α-케토글루타레이트(KG) 및 바이오틴화된 펩타이드 기질의 존재 하에 배양됩니다. L-아스코르브산은 환원 환경을 제공하고 Fe2+의 산화를 방지하기 위해 포함됩니다. 펩타이드 기질과 배양 후 AlphaScreen 기술을 사용하여 생성물의 존재를 감지합니다. 데메틸라제 AlphaScreen 분석은 흰색 프로시플레이트를 사용하여 384웰 플레이트 형식으로 수행됩니다. 모든 단계는 분석 완충액(50mM HEPES pH 7.5, 0.1%(w/v) BSA 및 0.01%(v/v) Tween-20)에서 수행됩니다. FAS는 매일 20mM HCl에 400mM 농도로 신선하게 용해되어 탈이온수에 1.0mM로 희석됩니다. 다른 모든 구성 요소는 매일 탈이온수에 신선하게 용해됩니다. IC50 결정을 위해 데메틸라제 효소를 포함하는 5μL의 분석 완충액을 384웰 프로시플레이트의 웰에 옮깁니다. 이 화합물의 적정(0.1μL)을 각 웰에 옮기고 효소는 이 화학 물질과 15분 동안 사전 배양됩니다(DMSO의 최종 농도는 1%). 효소 반응은 α-KG, FAS, L-아스코르브산 및 바이오틴화된 펩타이드 기질로 구성된 기질 혼합물 5μL를 첨가하여 시작되며, 반응은 표시된 시간 동안 실온에서 배양됩니다. 효소 반응은 표시된 시간 후에 5μL의 EDTA(분석 완충액에서 최종 농도 7.5mM)를 첨가하여 중단됩니다. 스트렙타비딘 공여 비드(0.08mg/ml)와 단백질 A 접합 수용체 비드(0.08mg/ml)는 생성물 메틸 마크에 대한 항체와 1시간 동안 사전 배양되며, 바이오틴-H3-생성물의 존재는 사전 배양된 AlphaScreen 비드 5μL를 첨가하여 감지됩니다(수용체 및 공여 비드에 대해 최종 농도 0.02mg/ml). 감지는 실온에서 1시간 동안 진행되며, 분석 플레이트는 BMG Labtech Pherastar FS 플레이트 리더에서 판독됩니다. 데이터는 효소 비활성 대조군에 대해 정규화되고 GraphPad Prism 5를 사용하여 비선형 회귀 곡선 피팅에서 IC50이 결정됩니다.
세포 분석:

[2]
  • 세포주

    Mouse podocytes

  • 농도

    5 μM

  • 배양 시간

    48 h

  • 방법

    Cells were serum starved for 4 hours, followed by treatment with EPZ-6438 (10 μM) or this compound (5 μM) for 48 hours.
동물 연구:

[2]
  • 동물 모델

    BALB/c mice

  • 용량

    10 mg/kg

  • 투여

    i.p.

참조

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22842901/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29227285/

고객 제품 검증

<p>DIPG cells were seeded into 96-well plates and treated with panobinostat and GSK-J4 individually or in combination at the indicated concentrations for 72 hr in at least triplicate. Cell viabilities were then assessed using the CelltiterGlo assay relative to 0.1% DMSO control. Data shown as mean ± SD. *indicates the two drugs demonstrate synergy at that condition (i.e. CI < 1).</p>

, , Nat Med, 2015, 21(6):555-9.

<p>GSK-J4 impaired hair cell regeneration after neomycin damage. (A–D) GSK-J4 reduced the numbers of GFP-positive (green) and FM1-43FX-positive (red) hair cells compared with DMSO-treated controls. Scale bars = 10 μm. (E,F) Quantitative analysis of the number of GFP-positive (E) or FM1-43FX-positive (F) hair cells per neuromast (NM) at different time points in DMSO-treated control and GSK-J4-treated larvae. In the 24-h group, n = 40 neuromasts (20 larvae) per group; in the 48-h group, n = 28 neuromasts (14 larvae) per group. ***p < 0.0001. Bars are mean ± sem. [24-h group: One-way ANOVA; GFP-positive cells: F(2, 117) = 96.94; FM1-43FX-positive cells: F(2, 117) = 114. 48-h group: One-way ANOVA; GFP-positive cells: F(2, 81) = 88.96; FM1-43FX-positive cells: F(2, 81) = 93.85].</p>

, , Front Mol Neurosci, 2017, doi: 10.3389/fnmol.2017.00051

Inhibition of JMJD3 mitigated the IL-1β-induced inflammatory response in the MH7A cells. The MH7A cells were transfected with control or JMJD3 siRNA or treated with the indicated concentrations of GSK-J4 (JMJD3 inhibitor) and were then stimulated with IL-1β for 24 h. Western blot analysis of JMJD3, TLR2, COX-2 and GAPDH expression (d).

데이터 출처 [ , , Cell Mol Immunol, 2018, doi:10.1038/s41423-018-0037-8 ]

GSK J4 inhibited PDGF-induced cyclin D1 and PCNA expression. The cells were preincubated for 4 h, with or without 10 mM GSK J4, followed by stimulation with 25 ng/ml PDGF-BB for 36 h. Cells were immunostained with anti-JMJD3 antibodies (green), and nuclei were stained with DAPI (blue) and analyzed by fluorescence microscopy.

데이터 출처 [ , , FASEB J, 2018, 32(7):4031-4042 ]

Sellecks GSK-J4 Hydrochloride 인용됨 65 출판물

HIF-independent oxygen sensing via KDM6A regulates ferroptosis [ Mol Cell, 2025, 85(15):2973-2987.e6] PubMed: 40712585
Loss of Kmt2c or Kmt2d drives brain metastasis via KDM6A-dependent upregulation of MMP3 [ Nat Cell Biol, 2024, 26(7):1165-1175] PubMed: 38926506
Evi1 governs Kdm6b-mediated histone demethylation to regulate the Laptm4b-driven mTOR pathway in hematopoietic progenitor cells [ J Clin Invest, 2024, 134(24)e173403] PubMed: 39680456
Targeting lysine demethylase 6B ameliorates ASXL1 truncation-mediated myeloid malignancies in preclinical models [ J Clin Invest, 2024, 134(1)e163964] PubMed: 37917239
Refractory testicular germ cell tumors are highly sensitive to the targeting of polycomb pathway demethylases KDM6A and KDM6B [ Cell Commun Signal, 2024, 22(1):528] PubMed: 39482699
Dual targeting of histone deacetylases and MYC as potential treatment strategy for H3-K27M pediatric gliomas [ Elife, 2024, 13RP96257] PubMed: 39093942
Prenatal dexamethasone exposure reduces osteoprogenitor proliferation in mice via histone modifications at the Mkp-1 gene locus [ Commun Biol, 2024, 7(1):1589] PubMed: 39609620
Targeting histone demethylases JMJD3 and UTX: selenium as a potential therapeutic agent for cervical cancer [ Clin Epigenetics, 2024, 16(1):51] PubMed: 38576048
miRNA-27a-3p is involved in the plasticity of differentiated hepatocytes [ Gene, 2024, 913:148387] PubMed: 38499211
Refractory testicular germ cell tumors are highly sensitive to the targeting of polycomb pathway demethylases KDM6A and KDM6B [ Res Sq, 2024, rs.3.rs-4986186] PubMed: 39483904

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