GSK650394

카탈로그 번호S7209 배치:S720904

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기술 자료

화학식

C25H22N2O2
분자량 382.45 CAS 번호 890842-28-1
용해도 (25°C)* 시험관 내(In vitro) DMSO 76 mg/mL (198.71 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
생체 내(In Vivo) (개별적으로 순서대로 용매를 제품에 첨가하십시오.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다.
* Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다.
* 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)

원액 준비

생물학적 활성

설명 GSK650394는 혈청 및 글루코코르티코이드 조절 키나아제-1(SGK1)과 SGK2에 대해 각각 62 nM 및 103 nM의 IC50을 갖는 SGK1 및 SGK2 억제제입니다.
표적
SGK1
(Cell-free assay)		 SGK2
(Cell-free assay)
62 nM 103 nM
시험관 내(In vitro) GSK650394는 SCC 분석에서 IC50 0.6 μM로 SGK1 매개 상피 수송을 억제합니다. LNCaP 세포에서 이 화합물은 안드로겐 매개 Nedd4-2 인산화 증강 및 안드로겐 매개 세포 성장을 억제합니다.이 화합물은 코르티솔 유발 신경 발생 감소, 헤지호그 신호 전달 변화, GR 핵 전좌를 상쇄합니다. [2] 인플루엔자 vRNP의 A549 세포 내 세포질 수출을 저해하여 인플루엔자 바이러스 복제를 억제합니다.

프로토콜 (참조)

키나아제 분석:[1]
  • 신틸레이션 근접 분석법(SPA)

    SGK1 S422D (60–431 aa; 최종 농도 0.275 μg/mL) 또는 SGK2 (최종 농도 0.875 μg/mL)는 50 mM Tris (pH 7.5), 0.1 mM EGTA, 0.1 mM EDTA, 10 mM MgCl₂, 0.1% β-메르캅토에탄올, 1 mg/mL BSA 및 ATP(최종 농도 0.15 mM)로 구성된 완충액에서 30°C에서 30분간 배양됩니다. SGK2는 SGK1과 정확히 동일한 방법으로 준비되나, 전체 길이 단백질에 해당합니다. 반응 완충액에 최종 농도 75 μM의 비오틴화 CROSStide 펩타이드와 2×10⁶ cpm에 해당하는 γ³²P-ATP를 함유한 용액을 준비한다. 96-웰 플레이트에서 활성화된 효소 혼합물 25 μL에 이 화합물 5 μL를 첨가한다. 여기에 CROSStide 혼합물 20μL를 첨가하고 실온에서 1시간 동안 배양합니다. 다음으로, 0.1M EDTA, pH 8.0 PBS 용액에 현탁된 스트렙타비딘 코팅 SPA 비드(25mg/mL 슬러리) 50μL를 첨가합니다. 플레이트를 밀봉한 뒤 2000 rpm에서 8분간 원심 분리하고, Packard TopCount NXT 섬광 계수기로 웰당 30초 동안 측정하여 신호를 검출합니다. 이 화합물에 의한 SGK1 및 SGK2 활성 억제의 IC50 값은 GraphPad Prism 3 소프트웨어를 사용하여 계산됩니다.
세포 분석:[1]
  • 세포주

    LNCaP cells

  • 농도

    ~10 μM

  • 배양 시간

    7 days

  • 방법

    LNCaP cells are plated at a density of 5,000 cells per well in 96-well plates in 100 μL PRF-RPMI 1640, supplemented with 8% CS-FBS, 0.1 mM NEAA, and 1 mM NaPyr. At day three, cells are treated with hormone with or without GSK650394 by removing 50 μL of the media and replacing this with 50 μL of PRF-RPMI 1640 with 8% CS-FBS, NEAA, NaPyr containing a 2X concentration of the appropriate hormone/this compound treatment. At days 5 and 7, the treatment is repeated. On the tenth day, the media is removed and the relative cell number is measured using the FluoReporter Blue assay according to the manufacturer’s instructions.

참조

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18794135/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23650397/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23487453/

고객 제품 검증

BV-2 cells were incubated in the absence or presence of gsk650394 (1 μM) for 30 min, followed by LPS (500 ng/ml) administration for 30 min, and then fixed. NF-κB p65 protein was visualized by indirect immunofluorescence staining using an antibody for NF-κB p65. For nuclear staining, the cells were stained with DAPI. Bar = 20 μm.

데이터 출처 [ , , Biochem Biophys Res Commun, 2016, 478(1):53-59 ]

GSK650394 treatment reduces steady state levels of BoHV-1 proteins. Cells were grown prior to infection. Three hours prior to infection 25 nM of GSK650394 was added to the designated cultures. CRIB cells were infected withBoHV-1 (moi=2) and then stripped FBS added. At the designated times after infection (hours), whole cell lysate (50 ug protein) was prepared and Western Blots performedusing the designated antibodies directed against a viral protein. Arrows denote the position of bICP0 (97 kD), bICP4 (178 kD), bICP22 (45 kD), VP16 (65 kD), and the bracketdenotes various gE forms. Tubulin was used as a loading control. The lane marked M are molecular weight markers: numbers to left are the approximate size of the respectivebands. These results are representative of 4 independent experiments. The relative levels of the respective BoHV-1 proteins were estimated by comparing the intensity ofthe bands to tubulin using a BioRad ChemiDoc MP and PMI System. The value of the respective viral protein that was first detected after infection was set at 10 and the othervalues normalized to this value. ND refers to those lanes in which the viral protein was not detected. These results are representative of three independent experiments.

데이터 출처 [ , , Virus Res, 2016, 222:106-112. ]

Sellecks GSK650394 인용됨 24 출판물

Patient-derived enteroids provide a platform for the development of therapeutic approaches in microvillus inclusion disease [ J Clin Invest, 2023, 133(20)e169234] PubMed: 37643022
Bacterial DNA promoting inflammation via the Sgk1/Nedd4L/Syk pathway in mast cells contributes to antihistamine non-responsive CSU [ J Leukoc Biol, 2023, qiad025] PubMed: 36857592
Estrogen-sensitive activation of SGK1 induces M2 macrophages with anti-inflammatory properties and a Th2 response at the maternal-fetal interface [ Reprod Biol Endocrinol, 2023, 21(1):50] PubMed: 37226177
Inhibition of SGK1 potentiates the anticancer activity of PI3K inhibitor in NSCLC cells through modulation of mTORC1, p‑ERK and β‑catenin signaling [ Biomed Rep, 2023, 19(6):94] PubMed: 37901878
Therapy Development for Microvillus Inclusion Disease using Patient-derived Enteroids [ bioRxiv, 2023, 2023.01.28.526036] PubMed: 36747680
Activation of Serum/Glucocorticoid Regulated Kinase 1/Nuclear Factor-κB Pathway Are Correlated with Low Sensitivity to Bortezomib and Ixazomib in Resistant Multiple Myeloma Cells [ Biomedicines, 2021, 9(1)E33] PubMed: 33406639
Identification and Kinetic Characterization of Serum- and Glucocorticoid-Regulated Kinase Inhibitors Using a Fluorescence Polarization-Based Assay [ SLAS Discov, 2021, 24725552211002465] PubMed: 33783250
Crosstalk between Hedgehog pathway and the glucocorticoid receptor pathway as a basis for combination therapy in T-cell acute lymphoblastic leukemia [ Oncogene, 2020, 10.1038/s41388-020-01453-2] PubMed: 32917954
Convergent genomic and pharmacological evidence of PI3K/GSK3 signaling alterations in neurons from schizophrenia patients [ Neuropsychopharmacology, 2020, 10.1038/s41386-020-00924-0] PubMed: 33288841
Targeting histone K4 trimethylation for treatment of cognitive and synaptic deficits in mouse models of Alzheimer's disease [ Sci Adv, 2020, 6(50)eabc8096] PubMed: 33298440

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