GW9662

GW9662는 세 가지 PPAR 모두에서 보존된 PPARgamma의 Cys(285)에 결합합니다. 이 화합물은 PPARgamma의 길항제로 작용하며, 이는 지방세포 분화 억제 분석에서 확인되었습니다. [1] 이는 PPARγ의 활성화를 방지하고 인간 유방 종양 세포주(MCF7, MDA-MB-468, MDA-MB-231)의 성장을 20 μM-30 μM의 IC50으로 억제하며, 이는 이 화학물질의 PPARγ 작용제 특성 또는 PPARγ와 독립적인 성장 억제 메커니즘의 존재를 시사합니다. 이 화합물(10 μM)과의 공동 처리 시 MDA-MB-231 세포에서 7일 후 통계적으로 유의미하게 낮은 생존 세포 수가 나타납니다. [2] PPARγ1 리간드는 일차 마우스 골수(BMs) 및 RAW264.7 세포에서 RANKL 유도 파골세포 형성을 억제할 수 있습니다. 중요하게도, 이러한 리간드에 의한 억제는 이 화학물질(2 μM)에 의해 농도 의존적으로 역전됩니다. 이 화합물(2 μM)은 BMs에서 IL-4에 의한 파골세포 형성 억제를 차단합니다. 이 화합물(1 μM)은 RAW264.7 세포에서 RANKL에 의한 NF-κB 활성화를 차단합니다. [3] GW9662 (10 μM)는 갑상선 안병증 환자의 일차 전지방세포에서 호르몬 및 작용제 유도 지방생성을 억제합니다. [4]

LPS (1 mg/kg i.p.) 전처리는 쥐의 허혈/재관류 (I/R) 손상으로 인한 신장 손상 및 기능 부전의 모든 마커를 유의하게 완화시킵니다. 특히, 이 화합물 (1 mg/kg i.p.)은 LPS의 보호 효과를 없앱니다. [5]

• 결합 분석

  인간 PPARα, PPARγ 및 PPARδ 리간드 결합 도메인(LBD)은 E. coli에서 폴리히스티딘 태그가 붙은 융합 단백질로 발현됩니다. 수용체는 스트렙타비딘 변형 SPA 비드(0.5 mg/mL) 슬러리에 원하는 수용체(15 nM)를 첨가하여 SPA 비드에 고정됩니다. 혼합물은 실온에서 최소 1시간 동안 평형을 이루게 하고, 비드는 1×10³ g에서 원심분리하여 펠릿으로 만듭니다. 상층액은 버리고, 비드는 원래 부피의 신선한 분석 완충액에 부드럽게 섞으면서 재현탁합니다. 원심분리/재현탁 절차를 반복하고, 결과적으로 얻은 수용체 코팅 비드 슬러리는 즉시 사용하거나 사용 전 최대 1주일 동안 4 ℃에서 보관합니다. [3H]GW2443은 각각 PPARα, PPARγ 및 PPARδ에 대한 경쟁 결합을 결정하기 위한 방사성 리간드로 사용됩니다. 별도로 명시되지 않는 한, 모든 분석에 사용되는 완충액은 50 mM HEPES (pH 7), 50 mM NaCl, 5 mM CHAPS, 0.1 mg/mL BSA 및 10 mM DTT입니다. 일부 실험에서는 HEPES (pH 7)를 50 mM Tris (pH 8)로 대체합니다.

• 세포주

  MDA-MB-231 cells

• 농도

  10 μM

• 배양 시간

  10 days

• 방법

  MDA-MB-231 cells are seeded at a density of 1 × 10⁵ cells per 25 cm³ tissue culture flask. After 24 h (day 0), the growth medium is replaced with fresh medium containing GW9662 (10 μM) or both together. Control flasks receives 0.1% DMSO. Cells are harvested on days 0, 3, 5, 7, 10 for each treatment condition by trypsinisation, stained using trypan blue, and the total and viable number of cells per flask calculates using a haemocytometer.

• 동물 모델

  male Wistar rats

• 용량

  1 mg/kg

• 투여

  intraperitoneal injection