H2DCFDA (DCFH-DA)

카탈로그 번호S9687 배치:S968701

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기술 자료

화학식

C₂₄H₁₆Cl₂O₇

분자량

487.29

CAS 번호

4091-99-0

용해도 (25°C)*

시험관 내(In vitro)

DMSO

97 mg/mL (199.06 mM)

Ethanol

7 mg/mL (14.36 mM)

Water

Insoluble

생체 내(In Vivo) (개별적으로 순서대로 용매를 제품에 첨가하십시오.)

Homogeneous suspension

CMC-NA

≥5mg/ml

Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다.
* Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다.
* 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)

원액 준비

생물학적 활성

설명

H2DCFDA (DCFH-DA)는 세포 투과성 프로브로, 세포 내 활성산소종 (ROS) 생성을 감지하는 데 사용됩니다. 이는 세포 내에서 탈에스테르화되어 산화 시 고형광성 2′,7′-디클로로플루오레세인으로 변환됩니다. 이 화합물은 산화 대사에 대한 반응으로 산소 반응성 종을 민감하고 빠르게 정량하는 데 사용됩니다. 또한, 식세포에서 산화 생성물을 검출하는 마이크로플레이트 분석법 및 정량적 다중웰 골수 분화 분석법에 사용됩니다.(Ex/Em=488/525 nm)

표적

ROS

시험관 내(In vitro)

1. H2DCFDA (DCFH-DA)는 DMSO에 용해하여 10 mM 스톡 솔루션을 얻고 사용 전에 추가로 희석합니다.
2. 세포는 이 화합물 5 μM을 PBS에 넣어 37°C에서 30분 동안 어두운 곳에서 배양한 후, 0.05% 트립신-EDTA 용액으로 수확하고 신선한 배지에 현탁시킨 후 즉시 유세포 분석기로 분석합니다.
3. 이와 함께, 필요한 경우 ROS에 둔감한 플루오레세인 염료 DCFDA 변형을 양성 대조군으로 사용합니다. 염색 절차는 H2DCFDA와 동일합니다.
방출(Em)=517 여기(Ex)=492 517

프로토콜 (참조)

세포 분석:^{^[2]}	세포주 hCECs 농도 10 μM 배양 시간 30 min 방법 Intracellular ROS levels in hCECs are measured by incubating the cells with the redox-sensitive fluorescent dye H2DCFDA (DCFH-DA) (10 μM) at 37℃ for 30 minutes in the dark. The cells are then detached from the culture wells using 0.25% trypsin-EDTA and washed twice using ice-cold PBS. Flow cytometry measurements are performed three times for each treatment. Mean fluorescence intensity is quantified using software. Cells that had been incubated without this compound are used as negative control. The distribution of fluorescent dichlorofluorescein (DCF) on the cell monolayer is visualized and photographed using a fluorescence microscope.

세포 분석:^{^[2]}

세포주
hCECs
농도
10 μM
배양 시간
30 min
방법
Intracellular ROS levels in hCECs are measured by incubating the cells with the redox-sensitive fluorescent dye H2DCFDA (DCFH-DA) (10 μM) at 37℃ for 30 minutes in the dark. The cells are then detached from the culture wells using 0.25% trypsin-EDTA and washed twice using ice-cold PBS. Flow cytometry measurements are performed three times for each treatment. Mean fluorescence intensity is quantified using software. Cells that had been incubated without this compound are used as negative control. The distribution of fluorescent dichlorofluorescein (DCF) on the cell monolayer is visualized and photographed using a fluorescence microscope.

참조

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26976009/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30372737/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26976009/

Sellecks H2DCFDA (DCFH-DA) 인용됨 9 출판물

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[A Novel Chinese Medicine Formula Inhibits Non-small Cell Lung Cancer by Triggering Oxidative Stress Dependent on Pentose Phosphate Pathway] [ Zhongguo Fei Ai Za Zhi, 2023, 10.3779/j.issn.1009-3419.2023.101.27]	PubMed: 37985150
Elevated neutrophil extracellular traps by HBV-mediated S100A9-TLR4/RAGE-ROS cascade facilitate the growth and metastasis of hepatocellular carcinoma [ Cancer Commun (Lond), 2022, 10.1002/cac2.12388]	PubMed: 36346061
S100A8-Mediated NLRP3 Inflammasome-Dependent Pyroptosis in Macrophages Facilitates Liver Fibrosis Progression [ Cells, 2022, 11(22)3579]	PubMed: 36429008
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