HS-1371

카탈로그 번호S8775 배치:S877501

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기술 자료

화학식

C₂₄H₂₄N₄O

분자량

384.47

CAS 번호

2158197-70-5

용해도 (25°C)*

시험관 내(In vitro)

DMSO

13 mg/mL (33.81 mM)

Ethanol

4 mg/mL (10.4 mM)

Water

Insoluble

생체 내(In Vivo) (개별적으로 순서대로 용매를 제품에 첨가하십시오.)

Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Selleck 연구소에서 검증했습니다. 이 제형에 대한 조정이 필요한 경우 맞춤형 테스트를 위해 당사 영업팀에 문의하십시오.	0.650mg/ml (1.69mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 13 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Clear solution	5% DMSO 1 95% Corn oil Selleck 연구소에서 검증했습니다. 이 제형에 대한 조정이 필요한 경우 맞춤형 테스트를 위해 당사 영업팀에 문의하십시오.	0.650mg/ml (1.69mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 13 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다.
* Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다.
* 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)

원액 준비

생물학적 활성

설명

HS-1371은 IC50이 20.8 nM인 강력한 RIP3 kinase 억제제입니다. RIP3의 ATP 결합 주머니에 결합하여 ATP 결합을 억제하여 시험관 내에서 RIP3의 효소 활성을 방지합니다.

표적

RIP3 kinase

20.8 nM

시험관 내(In vitro)

HS-1371은 기저 수준에서 RIP3의 S227 자가인산화에 억제 효과를 보입니다. TNF 유도 괴사 세포 사멸 신호에 대한 완전한 억제 효과를 나타내며, HT-29 세포에서 RIP3 및 MLKL의 인산화가 관찰되지 않습니다. 이 화합물에 의한 RIP3 kinase 활성 억제는 괴사체 복합체 형성을 차단하여 MLKL 모집의 방해를 보여줍니다. 이 화학 물질은 TNF 유도 괴사 세포 사멸로부터 세포를 구합니다. RIP3 의존성 괴사성 세포 사멸로부터 세포를 구하지만, Apoptosis 세포 사멸로부터는 구하지 못합니다.

프로토콜 (참조)

키나아제 분석:^{^[1]}	효소 분석 모든 화합물의 RIP3에 대한 억제 활성은 Reaction Biology Corp에서 방사성 키나아제 분석([γ-32P]ATP)을 통해 측정되었습니다. RIP3의 효소 활성은 신선하게 준비된 반응 완충액(20 mM HEPES (pH 7.5), 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 0.02% BRIJ-35, 0.02 mg/mL BSA, 0.1 mM Na3VO4, 2 mM DTT, 1% DMSO)에 용해된 20 μM의 미엘린 기본 단백질(MBP)을 사용하여 모니터링되었습니다. 각 추정 RIP3 억제제는 특정 농도로 100% DMSO에 용해되었고 epMotion 5070으로 DMSO에서 연속 희석되었습니다. 인간 RIP3 및 20 μM의 펩타이드 기질(MBP)이 반응 완충액에 첨가되었습니다. 음향 기술(Echo550; 나노리터 범위)을 사용하여 DMSO에 용해된 후보 억제제를 키나아제 반응 혼합물에 전달한 후, 반응 혼합물은 실온에서 20분 동안 배양되었습니다. 효소 반응을 시작하기 위해, 10 μCi/μL의 특정 활성을 가진 33P-ATP가 반응 혼합물에 첨가되어 최종 ATP 농도 10 μM에 도달했습니다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 배양한 후 필터 결합 방법을 사용하여 방사능을 모니터링했습니다. 주어진 억제제 농도에서 생화학적 효능은 차량(디메틸 설폭사이드) 반응에 대한 나머지 키나아제 활성 비율로 측정되었습니다. 곡선 피팅 및 IC50 값은 PRISM 프로그램을 사용하여 얻어졌습니다. ATP 경쟁 억제제 스타우로스포린(STSP)은 RIP3를 포함한 다양한 키나아제에 대한 높은 생화학적 효능으로 인해 본 연구에서 양성 대조군으로 사용되었습니다.
세포 분석:^{^[1]}	세포주 HT-29 cells 농도 5 μM 배양 시간 2 h 방법 HT-29 cells were pretreated with Nec-1 (40 μM), DAB (5 μM) or HS-1371 (5 μM) for 2 h and then treated with TSZ for 4 h. Cell lysates were immunoprecipitated with anti-RIP3 antibody.

키나아제 분석:^{^[1]}

효소 분석
모든 화합물의 RIP3에 대한 억제 활성은 Reaction Biology Corp에서 방사성 키나아제 분석([γ-32P]ATP)을 통해 측정되었습니다. RIP3의 효소 활성은 신선하게 준비된 반응 완충액(20 mM HEPES (pH 7.5), 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 0.02% BRIJ-35, 0.02 mg/mL BSA, 0.1 mM Na3VO4, 2 mM DTT, 1% DMSO)에 용해된 20 μM의 미엘린 기본 단백질(MBP)을 사용하여 모니터링되었습니다. 각 추정 RIP3 억제제는 특정 농도로 100% DMSO에 용해되었고 epMotion 5070으로 DMSO에서 연속 희석되었습니다. 인간 RIP3 및 20 μM의 펩타이드 기질(MBP)이 반응 완충액에 첨가되었습니다. 음향 기술(Echo550; 나노리터 범위)을 사용하여 DMSO에 용해된 후보 억제제를 키나아제 반응 혼합물에 전달한 후, 반응 혼합물은 실온에서 20분 동안 배양되었습니다. 효소 반응을 시작하기 위해, 10 μCi/μL의 특정 활성을 가진 33P-ATP가 반응 혼합물에 첨가되어 최종 ATP 농도 10 μM에 도달했습니다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 배양한 후 필터 결합 방법을 사용하여 방사능을 모니터링했습니다. 주어진 억제제 농도에서 생화학적 효능은 차량(디메틸 설폭사이드) 반응에 대한 나머지 키나아제 활성 비율로 측정되었습니다. 곡선 피팅 및 IC50 값은 PRISM 프로그램을 사용하여 얻어졌습니다. ATP 경쟁 억제제 스타우로스포린(STSP)은 RIP3를 포함한 다양한 키나아제에 대한 높은 생화학적 효능으로 인해 본 연구에서 양성 대조군으로 사용되었습니다.

세포 분석:^{^[1]}

세포주
HT-29 cells
농도
5 μM
배양 시간
2 h
방법
HT-29 cells were pretreated with Nec-1 (40 μM), DAB (5 μM) or HS-1371 (5 μM) for 2 h and then treated with TSZ for 4 h. Cell lysates were immunoprecipitated with anti-RIP3 antibody.

참조

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30237400/

Sellecks HS-1371 인용됨 3 출판물

MRE11 liberates cGAS from nucleosome sequestration during tumorigenesis [ Nature, 2024, 625(7995):585-592]	PubMed: 38200309
Necroptotic virotherapy of oncolytic alphavirus M1 cooperated with Doxorubicin displays promising therapeutic efficacy in TNBC [ Oncogene, 2021, 10.1038/s41388-021-01869-4]	PubMed: 34155344
Inhibition of Cardiac RIP3 Mitigates Early Reperfusion Injury and Calcium-Induced Mitochondrial Swelling without Altering Necroptotic Signalling [ Int J Mol Sci, 2021, 22(15)7983]	PubMed: 34360749

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인간, 수의학 진단 또는 치료 용도로 사용하지 마십시오.