HS-173

HS-173은 T47D, SK-BR3 및 MCF7 세포에서 각각 0.6, 1.5 및 7.8 μM의 IC50으로 강력한 항증식 효과를 보입니다. [1] 이 화합물은 암세포주(Hep3B 및 SkBr3)에서 PI3K 경로를 완전히 억제합니다. 더욱이, 세포 주기 분포에 영향을 미치고 카스파아제를 활성화하여 세포 사멸을 유도하고, 생체 외에서 VEGF 유도 혈관신생을 차단합니다. [2]

HS-173은 쥐의 혈관 형성을 감소시킵니다. [2] 이 화합물은 생체 내에서 PI3K/Akt 신호 전달을 차단함으로써 간 섬유증의 발달을 현저히 약화시킵니다. [4]

• PI3-Kinase 분석

  PI3K 분석은 PI3K 반응에 의해 생성된 ADP의 양을 정량화하는 Kinase-Glo Max 발광 키나아제 분석 키트를 사용하여 수행됩니다. 간략하게, 활성 PI3K (100 ng)는 키나아제 반응 완충액 (25 mM MOPS [pH 7.0], 5 mM MgCl₂ 및 1 mM EGTA) 및 10 μg l-α-포스파티딜이노시톨 (PI)과 함께 이 화합물과 5분 동안 전배양됩니다. PI를 첨가하기 전에, 마이셀 형성을 위해 물에서 20분 동안 초음파 처리 완충액 (25 mM MOPS [pH 7.0], 1 mM EGTA)으로 초음파 처리됩니다. 그런 다음 10 μM ATP를 첨가하여 반응을 시작하고 180분 동안 진행됩니다. 키나아제 반응을 중단하기 위해 동일한 양의 Kinase-Glo Max 완충액이 첨가됩니다. 10분 후, 플레이트는 발광 감지를 위해 GloMax 플레이트 리더에서 판독됩니다.

• 세포주

  T47D, SK-BR3, MCF7 cells

• 농도

  ~50 μM

• 배양 시간

  48 hours

• 방법

  Cell viability is performed by a MTT assay. Briefly, T47D cells are plated in 96-well plates for 24 h. Then, the medium is removed and cells were treated with either DMSO as a control or various concentrations of inhibitors. The final concentration of DMSO in the medium was ≤0.1% (v/v). After the cells are incubated for 48 h, 20 μL MTT solution (5 mg/mL) is added to each well for another 4 h at 37 °C. The formazan crystals that formed are dissolved in DMSO (100 μL/well) by constant shaking for 5 min. The plate is then read on a microplate reader at 540 nm. Three replicate wells are used for each analysis. The median inhibitory concentration (IC50, defined as the drug concentration at which cell growth is inhibited by 50%) is assessed from the dose−response curves. To assess the effect of compounds on cell proliferation, T47D cells are cultured with this compound (0.1−100 μM) for 48 h before MTT analysis.

• 동물 모델

  Male BALB/c mice with CCl4-induced liver fibrosis

• 용량

  ~20 mg/kg

• 투여

  p.o.