KN-93 Phosphate

KN-93은 TH의 반응 속도를 조절하여 TH 분자의 Ca(2+)-매개 인산화 수준을 감소시킴으로써 PC12h 세포에서 도파민 형성을 억제합니다. [1] KN-93은 IC50이 8 μM인 혈청 유도 섬유아세포 성장을 억제하고, G1기 정지 후 세포 사멸을 유도합니다. [2] KN-93은 안드로겐 수용체 활성을 억제하고 PCa 세포에서 p53-비의존적으로 세포 사멸을 유도합니다. [3]

KN-93 (5 μg)은 파킨슨병 쥐 모델에서 pGluR1S845의 발현을 낮춤으로써 레보도파 유발 이상운동증을 개선합니다. [4] MRL/lpr Foxp3-GFP 마우스에서 KN-93은 비장, 말초 림프절 및 말초 혈액에서 Treg 세포의 유의미한 유도를 초래하고 피부 및 신장 손상을 감소시킵니다. [5]

• 자가인산화/비자가인산화 CaMKII 활성 측정

  CaMKII 활성은 syntideII를 기질로 사용하여 측정됩니다. 정제된 CaMKII는 30 °C에서 2분 동안 분석 혼합물(35 mM Hepes-Na (pH 8.0), 10 mM MgCl₂, 0.5 μM CaM, 5 μM ATP, 1 mM CaCl₂ 또는 1 mM EGTA, 총 25 μL)에 미리 배양됩니다. 이 사전 배양 후, 단백질 기질/방사성 ATP 혼합물을 동일한 시험관에 첨가하고 30 °C에서 5분 동안 추가로 배양합니다(최종 분석 조건; 35 mM Hepes-Na (pH 8.0), 10 mM MgCl₂, 0.125 μM CaCl₂, 20 μM syntideII, 11.25 μM [γ-³²P] ATP, 10 % DMSO 및 지정된 KN-93 농도, 0.25 mM CaCl₂ 및 2 mM EGTA (자가인산화된 샘플용) 또는 0.25 mM EGTA 및 2 mM CaCl₂ (비자가인산화된 샘플용)가 보충된 총 100 μL). 반응은 25 μL의 100 % (w/v) 얼음처럼 차가운 TCA를 첨가하여 중단됩니다. 원심분리 후, 상층액 80 μL를 포스포셀룰로스 종이에 적용합니다. 필터는 이어서 75 mM H₃PO₄로 15분 동안 연속 교반하면서 세척됩니다. 4번의 세척 주기 후, 필터 종이에 남아있는 방사능은 액체 섬광 계수기에서 정량화됩니다.

• 세포주

  NIH 3T3 fibroblasts

• 농도

  ~24 μM

• 배양 시간

  70 hours

• 방법

  NIH 3T3 fibroblasts are cultured on polystyrene dishes in DMEM and fetal bovine serum, supplemented with penicillin/streptomycmn in a 5% CO2 humidified chamber at 37 癈. Cell growth is measured by using the MTT dye reduction method.

• 동물 모델

  Sprague Dawley female rats

• 용량

  ~5 μg

• 투여

  Intrastriatal administration