Mirin

카탈로그 번호S8096 배치:S809601

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기술 자료

화학식

C10H8N2O2S

분자량 220.25 CAS 번호 1198097-97-0
용해도 (25°C)* 시험관 내(In vitro) DMSO 44 mg/mL (199.77 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
생체 내(In Vivo) (개별적으로 순서대로 용매를 제품에 첨가하십시오.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다.
* Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다.
* 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)

원액 준비

생물학적 활성

설명 Mirin은 강력한 Mre11–Rad50–Nbs1(MRN) 복합체 억제제로, Mre11 관련 엑소뉴클레아제 활성을 억제합니다. 이 화합물은 MRN 의존적인 ATM 활성화를 억제합니다.
표적
MRN ATM
시험관 내(In vitro)

Mirin은 DSB 유도 ATM 활성화, 하위 표적 Nbs1 및 Chk2의 ATM 의존성 인산화, DSB에 대한 반응으로 Ser1981에서 MRN 의존성 ATM 자가인산화를 억제합니다. 이 화합물은 또한 TOSA4 세포에서 G2 체크포인트를 억제하고 HEK293 세포에서 상동성 의존성 DNA 복구를 억제합니다.

HPV16이 통합된 세포(SiHa)에서, 이는 HPV 에피솜을 PA25에 민감하게 하여 PA25 IC50이 약 5배 감소하게 합니다.

이 화학물질로 전처리하면 시스플라틴 처리된 인간 배아 신장 293 세포에서 세포 생존력이 감소하고 증식 세포 핵 항원 발현이 억제됩니다.

생체 내(In Vivo)

나노입자 내 Mirin은 DDR 활성화, p53 축적 및 세포 사멸과 관련된 종양 성장 현저한 손상을 초래했습니다.

프로토콜 (참조)

키나아제 분석:

[1]

  • 뉴클레아제 분석

    올리고뉴클레오티드 비헤어핀 기질과의 반응은 25 mM MOPS (pH 7.0), 60 mM KCl, 0.2% Tween 20, 2 mM DTT, 1 mM 또는 5 MnCl2 (또는 5 mM MgCl2, 또는 5 mM CaCl2), 0.1 pmol의 DNA 기질, 그리고 0.3 pmol의 Mre11 (또는 Rad50과 복합체를 이룬 Mre11의 동등량)을 10 μl 부피로 포함하며, 37°C에서 30분 동안 배양된다. 이어서 SDS, EDTA 및 proteinase K가 각각 최종 농도 0.2%, 5 mM, 0.1 mg/ml로 첨가되고, 15분 더 배양된다. 각 반응액 4 μl는 4 μl의 포름아마이드 로딩 버퍼와 혼합된 후, 10% 아크릴아마이드와 7 M 요소가 포함된 시퀀싱 젤에 로딩된다. 실행 후, 각 젤은 인광 영상 시스템을 사용하여 분석된다. 헤어핀 기질을 포함하는 반응은 비헤어핀 기질과의 반응과 동일하지만, 이 화합물 3 pmol이 지시된 대로 반응에 추가되고, 반응은 실온에서 밤새도록 배양된다. 비상동 말단 연결 반응은 25 mM MOPS (pH 7.0), 60 mM KCl, 0.2% Tween 20, 2 mM DTT, 4 mM MgCl2, 2 mM MnCl2, 0.5 mM ATP, 4 ng의 플라스미드 DNA, 10% 폴리에틸렌 글리콜, 0.01 pmol의 인간 DNA 리가아제 I, 그리고 0.06 pmol의 이 화학 물질 또는 0.1 단위의 E. coli 엑소뉴클레아제 III (GIBCO-BRL)을 10 μl 부피로 포함한다. 37°C에서 25분 동안 배양 후, Tween 20은 최종 농도 0.5%로 첨가되고, 2.5 μl의 샘플은 DAR5 및 DAR147 프라이머를 사용하여 PCR로 증폭된다. PCR 산물은 TA 클로닝 키트를 사용하여 클로닝되고 자동화된 ABI 모세관 유전자 분석기를 사용하여 시퀀싱된다.

세포 분석:

[3]

  • 세포주

    HEK 293 cells

  • 농도

    100 μM

  • 배양 시간

    24 h

  • 방법

    Human embryonic kidney (HEK) 293 cells are maintained in RPMI-1640 supplemented with 5% heat-inactivated fetal bovine serum, penicillin (100 U/mL), and streptomycin (100 mg/mL) in humidified air with 5% CO2 at 37 °C. Cells are given fresh medium at 48 h intervals. The cells are seeded in 96-well plates in regular growth medium. Cells are pretreated with mirin (100 μM for 1 h before the cisplatin (20 μM) treatment followed by incubation for 8 and 24 h. The MTT assay is performed using the EZ-Cytox cell viability assay kit according to the manufacturer's protocol and MTT reduction is measured at a 450 nm wavelength using a micro-plate reader.

참조

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18176557/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24098381/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26056972/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30166519/

고객 제품 검증

Wildtype bone marrow-derived macrophages (BMDMs) were incubated with and without the MRN complex inhibitor mirin (administered dose of 100 μM) for 2 hours, then were treated with PM (100 μg/mL) for an additional 24 hours. (A) The relative levels of Cxcl1, Cxcl2 and Ifn-γ mRNA transcripts were determined using quantitative PCR. (B) The protein levels of Cxcl1, Cxcl2 and Ifn-γ in the culture supernatants were measured using ELISA. Data are presented as means ± SEMs across at least 3 independent experiments. *p < 0.05; **p < 0.01.

데이터 출처 [ , , Aging, 2018, 10(4):549-560 ]

HEK293 T cells were transfected with 3 μg Cas9/sgHPRT plasmid and 20 pmol ssODN. Five hours later, cells were treated with various concentrations of mirin. Twenty-four hours post-transfection, real-time PCR analysis was performed to measure the dose-dependent suppressive effects on HR and NHEJ pathways.

데이터 출처 [ , , DNA Repair, 2018, 70:67-71 ]

Sellecks Mirin 인용됨 37 출판물

Inherited deficiency of DIAPH1 identifies a DNA double strand break repair pathway regulated by γ-actin [ Nat Commun, 2025, 16(1):4491] PubMed: 40368919
Genome rearrangements induced by the stimulation of end-joining of DNA double strand breaks through multiple phosphorylation of MRE11 by the kinase PKB/AKT1 [ Nucleic Acids Res, 2025, 53(11)gkaf468] PubMed: 40479710
Noncanonical inhibition of topoisomerase II alpha by oxidative stress metabolites [ Redox Biol, 2025, 80:103504] PubMed: 39879737
PARP10 promotes the repair of nascent strand DNA gaps through RAD18 mediated translesion synthesis [ Nat Commun, 2024, 15(1):6197] PubMed: 39043663
The MYCN oncoprotein is an RNA-binding accessory factor of the nuclear exosome targeting complex [ Mol Cell, 2024, S1097-2765(24)00285-5] PubMed: 38703770
Replication fork stalling in late S-phase elicits nascent strand degradation by DNA mismatch repair [ Nucleic Acids Res, 2024, gkae721] PubMed: 39180395
CAF-1 promotes efficient PrimPol recruitment to nascent DNA for single-stranded DNA gap formation [ Nucleic Acids Res, 2024, gkae1068] PubMed: 39558157
SNF2L suppresses nascent DNA gap formation to promote DNA synthesis [ Nucleic Acids Res, 2024, gkae903] PubMed: 39413208
Schlafen 11 further sensitizes BRCA-deficient cells to PARP inhibitors through single-strand DNA gap accumulation behind replication forks [ Oncogene, 2024, 43(32):2475-2489] PubMed: 38961202
RHOJ controls EMT-associated resistance to chemotherapy [ Nature, 2023, 616(7955):168-175] PubMed: 36949199

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