MK-5108

카탈로그 번호S2770 배치:S277001

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기술 자료

화학식

C22H21ClFN3O3S
분자량 461.94 CAS 번호 1010085-13-8
용해도 (25°C)* 시험관 내(In vitro) DMSO 92 mg/mL (199.16 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
생체 내(In Vivo) (개별적으로 순서대로 용매를 제품에 첨가하십시오.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다.
* Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다.
* 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)

원액 준비

생물학적 활성

설명 MK-5108 (VX-689)은 무세포 분석에서 0.064 nM의 IC50을 가진 고도로 선택적인 Aurora A 억제제이며, Aurora B/C보다 Aurora A에 대해 220배 및 190배 더 선택적이며, TrkA는 100배 미만의 선택성으로 억제합니다. 이 화합물은 Autophagy를 유도합니다. 1상.
표적
Aurora A
(Cell-free assay)
0.064 nM
시험관 내(In vitro)

MK-5108은 ATP 경쟁 방식으로 Aurora-A 활성을 억제합니다. 이 화합물은 생화학적 분석에서 다른 계열 키나아제인 Aurora-B(220배)와 Aurora-C(190배)에 대해 강력한 선택성을 보입니다. 또한 다른 단백질 키나아제에 비해 Aurora-A에 대한 높은 선택성을 나타냅니다. 이 화합물은 100배 미만의 선택성으로 단 하나의 키나아제(TrkA)만 억제합니다. MLN8054보다 Aurora-A 선택성이 더 높을 수 있습니다. pHH3 양성 세포의 유도와 일치하게, 이 화학 물질은 G2-M기 세포의 축적을 유도합니다. HCC1143, AU565, MCF-7, HCC1806 및 CAL85-1을 포함한 종양 세포의 증식을 각각 0.42 μM, 0.45 μM, 0.52 μM, 0.56μM 및 0.74 μM의 IC50으로 억제합니다. 이 화합물은 LEIO285, LEIO505 및 SK-LSM1 세포를 포함한 세 가지 세포주 모두에서 약 100 nM의 IC50으로 용량 의존적으로 세포 생존력을 감소시킵니다. LEIO285에서 이 화합물과의 배양은 치료 후 48시간 및 72시간에 G2/M기의 세포 비율을 증가시킵니다. 이 화합물은 두 시점에서 DMSO 처리 대조군 배양과 비교하여 Caspase 3/7 활성을 유의하게 증가시킵니다. LEIO505 세포에서는 24시간에 G2/M기 세포가 더 많이 축적되지만 48시간 또는 72시간에는 그렇지 않습니다.  
생체 내(In Vivo)

MK-5108은 16 mg/kg 및 32 mg/kg 용량에서 pHH3 양성 세포를 유도합니다. 이 화합물의 혈장 농도는 8 mg/kg 및 16 mg/kg에서 각각 1.7 μM 및 4.4 μM입니다. 이 화합물 처리는 종양 및 피부 조직에서 pHH3의 유도를 초래하며, 이는 2시간에 시작하여 4시간에 최대치에 도달합니다. 15 mg/kg 및 30 mg/kg에서의 이 화학 물질 처리는 11일째에 치료 그룹의 평균 종양 부피 변화가 대조군 그룹의 평균 변화(%T/C) 대비 10% 및 −6%, 18일째에 17% 및 5%로 유의한 종양 성장 억제를 초래합니다. 두 용량 모두에서 최소한의 체중 감소와 함께 잘 견딜 수 있습니다. 이 화합물은 또한 SW48 종양을 가진 누드 랫에서 간헐적 투여를 통해 유의한 항종양 활성을 나타내며, 15 mg/kg 및 45 mg/kg에서 10일째에 35% 및 7%, 27일째에 58% 및 32%의 %T/C로 용량 의존적인 종양 성장 억제를 유발합니다.

프로토콜 (참조)

키나아제 분석:

[1]
  • 생화학적 키나아제 분석

    재조합 His 태그 인간 Aurora-A 단백질은 대장균에서 발현되고 HisTrap HP 컬럼으로 정제됩니다. 정제된 재조합 인간 Aurora-B 및 Aurora-C 단백질은 구매됩니다. 실험은 96웰 플레이트에서 5회 반복으로 수행됩니다. Aurora-A 분석 반응은 20 μM ATP, 25 μM Tetra-Kemptide [RRR(GLRRASLG)4R-NH2], 웰당 1.0 μCi [γ-33P]-ATP, 웰당 0.1 ng Aurora-A가 포함된 50 mM Tris-HCl (pH 7.4), 15 mM Mg(OAc)2 및 0.2 mM EDTA에서 30°C로 40분 동안 수행됩니다. Aurora-A에 대한 MK-5108의 억제 방식을 조사하기 위해, 이 화합물의 IC50 값은 다른 ATP 농도 존재 하에 결정됩니다. 그런 다음, ATP 농도의 함수로 IC50 값을 플로팅하여 ATP 농도가 이 화학 물질의 IC50 값에 미치는 영향을 분석합니다. Aurora-B 분석 반응은 15 μM ATP, 100 μM Kemptide (GLRRASLG-NH2), 웰당 1.0 μCi [γ-33P]-ATP, 웰당 5.0 ng Aurora-B가 포함된 50 mM Tris-HCl (pH 7.4), 15 mM Mg(OAc)2 및 0.2 mM EDTA에서 30 °C로 20분 동안 수행됩니다. Aurora-C 분석 반응은 40 μM ATP, 100 μM Kemptide, 웰당 1.0 μCi [γ-33P]-ATP, 웰당 15 ng Aurora-C가 포함된 10 mM MOPS-NaOH (pH 7.4), 5 mM Mg(OAc)2, 1 mM (±) DTT 및 1 mM EGTA에서 30°C로 20분 동안 수행됩니다. 키나아제 반응이 2.0% 인산을 첨가하여 중단된 후, Tetra-Kemptide 또는 Kemptide는 MultiScreen-PH 플레이트에 포획됩니다. 웰은 0.64% 인산으로 5회 세척된 후 액체 섬광 계수기에서 방사능을 모니터링합니다.
세포 분석:

[1]
  • 세포주

    HeLa-S3 cells

  • 농도

    0 μM -1 μM

  • 배양 시간

    12 hours

  • 방법

    HeLa-S3 cells are synchronized at the G1-S phase boundary by double thymidine block with 2 mM thymidine. Cells are washed and seeded to 96-well cell culture plates. After 4 hours, an equal volume of medium containing MK-5108 is added to each well. Nocodazole (300 nM) is used as a 100% control. The cells are fixed overnight with cold methanol 12 hours after seeding. Then, the cells are stained with rabbit anti-phospho-histone H3 Ser28 antibody and then with anti-rabbit IgG-Cy5. Total nuclei are stained with 10 mg/mL 4′,6-diamidino-2-phenylindole. Immunostained images are acquired using the IN Cell Analyzer1000 with ×10 objective lens. After acquisition of images, data are analyzed. The %pHH3-positive index is determined by measuring the %pHH3-positive cell counts per total nuclei counts for each sample, then by normalizing with respect to nocodazole-treated cells.
동물 연구:

[1]
  • 동물 모델

    SCID mice bearing HCT116 tumors

  • 용량

    30 mg/kg

  • 투여

    Oral administration

참조

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20053775/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22535157/

고객 제품 검증

<p>MK-5108 specifically inhibits AURKA and delays mitotic exit. (a) MK-5108 inhibits AURKA but not AURKB. Mitotic HeLa cells were obtained by exposure to nocodazole for 16 h followed by mechanical shake off. The cells were incubated with the indicated concentrations of MK-5108 for 2 h. Nocodazole and MG132 were included to prevent mitotic exit. Lysates were then prepared and activated phospho-AURKAThr288 and AURKBThr232 were detected with immunoblotting. Uniform loading was confirmed by immunoblotting for actin. (b) MK-5108 prevents activation of AURKA but not AURKB. HeLa cells were incubated with the indicated concentrations of MK-5108 for 8 h. Nocodazole was then added for another 6 h to trap any cells that entered mitosis. Mitotic cells were isolated by mechanical shake off. Lysates were prepared and analyzed with immunoblotting. Actin analysis was included to assess loading and transfer. (c) MK-5108 induces a G 2 /M delay. HeLa cells were treated with the indicated concentrations of MK-5108 for 24 h. DNA contents were analyzed with flow cytometry.</p>

데이터 출처 [ Oncogene , 2014 , 33, 3550-60 ]

Effect of a selective small molecule inhibitor of AURKA on MYCN protein levels and cell viability. Western blot for MYCN protein in KNS42 cells after exposure to 0.1, 0.5 and 2.5 uM VX-689 (triangle). GAPDH is used as a loading control.

데이터 출처 [ Cancer Discov , 2013 , 10.1158/2159-8290.CD-12-0426 ]

P53 expression in the 14G2a mAb-treated IMR-32 cell line and after combinatorial treatment with MK-5108 inhibitor. P53 protein content was measured in whole cell-WCE (A), cytoplasmic-CE (C) and nuclear-NE (E) extracts at 2, 6, 24 and 48 h after 14G2a addition (40 ug/ml) into culture media of IMR-32 cells, and normalized to GAPDH levels (for WCE and CE), or TBP (for NE). Mean values of three separate experiments (盨EM) obtained for the 14G2a mAb-treated cells are shown as empty bars, and calculated versus control value, set as 1 (black baseline). ANOVA shows no statistically significant changes of P53 level in time in IMR-32 WCE [F(3, 9) = 1.35, p = 0.3181]. Statistically significant changes of P53 level in time were found in CE [F(3, 6) = 53.76, p = 0.0001], and in NE [F(3, 6) = 63.17, p = 0.0001], as compared to 2 h time point. P53 expression level was measured in whole cell-WCE (B), cytoplasmic-CE (D) and nuclear-NE (F) extracts at 2 and 24 h after the 14G2a mAb treatment alone (white bars with black stripes) or in combination with MK-5108 inhibitor (black bars with white stripes), and normalized to GAPDH levels (for WCE and CE), or TBP (for NE). Below each chart representative immunoblottings are presented; C-control cells; mAb-the 14G2a mAb-treated cells; I + mAb-MK-5108 inhibitor and the mAb-treated cells. P-values for t-test were as follow: p < 0.05 (*), p < 0.01 (**), p < 0.001 (***).

데이터 출처 [ Cancer Lett , 2013 , 341(2), 248-64 ]

<p>HeLa cells were first synchronized to G1/S boundary with double thymidine<br />procedure.  After the release of the secondary thymidine, the indicated<br />concentrations of VX-689 were added to the cells for 8 hrs.  The cells were<br />then treated with nocodazole to trap the mitotic cells for 4 hrs and subse-<br />quently harvested by the mechanical shake off.  Cell free extracts were<br />prepared and further analyzed by SDS-PAGE and western blotting with the<br />indicated antibodies.  The disappearance of phospho-aurora A but not<br />phospho-aurora B strongly suggested that VX-689 is a highly selective<br />aurora A kinase inhibitor.</p>

, , Ken Ma Hong Kong University of Science & Technology

Sellecks MK-5108 인용됨 41 출판물

Establishment, characterization, and biobanking of 36 pancreatic cancer organoids: prediction of metastasis in resectable pancreatic cancer [ Cell Oncol (Dordr), 2024, 10.1007/s13402-024-00939-5] PubMed: 38619751
Inhibition of epigenetic and cell cycle-related targets in glioblastoma cell lines reveals that onametostat reduces proliferation and viability in both normoxic and hypoxic conditions [ Sci Rep, 2024, 14(1):4303] PubMed: 38383756
Exploiting ulnerabilities induced b recurrent mutations in chondrosarcoma and giant cell tumour of bone: therapeutic targeting of the altered epigenome and be [ Leiden University The Netherlands, 2023, ] PubMed: None
Spatially distinct inputs modulate the amount of active Mitotic-phase GAP to locally restrict RhoA signaling for successful cell division [ bioRxiv, 2023, 10.1101/2023.08.08.552464] PubMed: None
Revisiting the Resazurin-Based Sensing of Cellular Viability: Widening the Application Horizon [ Biosensors (Basel), 2022, 12(4)196] PubMed: 35448256
Culture and multiomic analysis of lung cancer patient-derived pleural effusions revealed distinct druggable molecular types [ Sci Rep, 2022, 12(1):6345] PubMed: 35428753
選択的オーロラキナーゼ A 阻害剤 TAS-119 を用いたオーロラキナーゼ A 阻害剤の薬剤感受性マーカーの探索 [ , 2022, ] PubMed: none
Targeting Aurora B kinase prevents and overcomes resistance to EGFR inhibitors in lung cancer by enhancing BIM- and PUMA-mediated apoptosis [ Cancer Cell, 2021, S1535-6108(21)00383-4] PubMed: 34388376
Multifocal Organoid Capturing of Colon Cancer Reveals Pervasive Intratumoral Heterogenous Drug Responses [ Adv Sci (Weinh), 2021, e2103360] PubMed: 34918496
Size-Selective VAILase Proteolysis Provides Dynamic Insights into Protein Structures [ Anal Chem, 2021, 93(30):10653-10660] PubMed: 34291915

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