데이터시트

생물학적 설명

특이성	NCX1 Antibody [C23J23]는 총 NCX1 단백질의 내인성 수준을 검출합니다.
배경	NCX1 (나트륨-칼슘 교환기 1)은 심장과 뇌에서 세포 내 Ca²⁺를 세포 외 Na⁺와 교환하여 흥분-수축 커플링 및 신경 신호를 조절하는 데 특히 중요한 유비쿼터스하게 발현되는 통합 막 단백질입니다. 구조적으로 NCX1은 두 개의 α-반복 영역 (이온 결합 및 운반에 관여)과 조절 Ca²⁺를 결합하는 β-반복 영역을 포함하는 TMS 5-6 사이의 큰 세포 내 루프를 포함하는 9개의 막관통 세그먼트를 가지고 있습니다. 이는 조직 특이적 조절 표현형을 가진 여러 스플라이스 변이체로 존재하며, NCX1.1이 지배적인 심장 동형입니다. NCX1 기능은 mAKAP, 인산화효소 (PP1, PP2A) 및 기타 조절 단백질을 포함하는 거대 분자 복합체 내에서 국소 요인, 이온 농도, 지질 및 PKA 및 PKC와 같은 키나아제에 의한 인산화에 의해 조절됩니다. 심근세포에서 이러한 조직은 정밀한 β-아드레날린 조절을 가능하게 하지만, 심부전에서 과인산화 및 반응성 약화와 같은 변화가 발생하여 생리적 및 병리학적 조건 모두에서 그 중요성을 강조합니다.

특이성

NCX1 Antibody [C23J23]는 총 NCX1 단백질의 내인성 수준을 검출합니다.

배경

NCX1 (나트륨-칼슘 교환기 1)은 심장과 뇌에서 세포 내 Ca²⁺를 세포 외 Na⁺와 교환하여 흥분-수축 커플링 및 신경 신호를 조절하는 데 특히 중요한 유비쿼터스하게 발현되는 통합 막 단백질입니다. 구조적으로 NCX1은 두 개의 α-반복 영역 (이온 결합 및 운반에 관여)과 조절 Ca²⁺를 결합하는 β-반복 영역을 포함하는 TMS 5-6 사이의 큰 세포 내 루프를 포함하는 9개의 막관통 세그먼트를 가지고 있습니다. 이는 조직 특이적 조절 표현형을 가진 여러 스플라이스 변이체로 존재하며, NCX1.1이 지배적인 심장 동형입니다. NCX1 기능은 mAKAP, 인산화효소 (PP1, PP2A) 및 기타 조절 단백질을 포함하는 거대 분자 복합체 내에서 국소 요인, 이온 농도, 지질 및 PKA 및 PKC와 같은 키나아제에 의한 인산화에 의해 조절됩니다. 심근세포에서 이러한 조직은 정밀한 β-아드레날린 조절을 가능하게 하지만, 심부전에서 과인산화 및 반응성 약화와 같은 변화가 발생하여 생리적 및 병리학적 조건 모두에서 그 중요성을 강조합니다.

사용 정보

응용

IHC, FCM

희석

IHC	FCM
1:200	1:20 - 1:100

반응성

Human

출처

Mouse Monoclonal Antibody

MW

보관 완충액

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

보관
(수령일로부터)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

실험 방법
IHC	Experimental Protocol： Deparaffinization/Rehydration 1. Deparaffinize/hydrate sections: 2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each. 3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each. 4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each. 5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each. 6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min. Staining 1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each. 2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min. 3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 4. Wash sections in wash buffer for 5 min. 5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature. 6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C. 7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each. 8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature. 9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each. 10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use. 11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity. 12. Immerse slides in dH2O. 13. If desired, counterstain sections with hematoxylin. 14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each. 16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

실험 방법

IHC

Experimental Protocol：

Deparaffinization/Rehydration

1. Deparaffinize/hydrate sections:

2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.

3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.

4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.

5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.

6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.

Staining

1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.

2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.

3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

4. Wash sections in wash buffer for 5 min.

5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.

6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.

7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.

8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.

9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.

10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.

11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.

12. Immerse slides in dH2O.

13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.

14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.

16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

참조

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12754202/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17303833/

적용 데이터

IHC

Selleck 검증

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human gastric cancer tissue with F2381 at 1:1000 dilution.