NH125

카탈로그 번호S7436 배치:S743601

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기술 자료

화학식

C27H45IN2
분자량 524.56 CAS 번호 278603-08-0
용해도 (25°C)* 시험관 내(In vitro) DMSO 100 mg/mL (190.63 mM)
Ethanol 100 mg/mL (190.63 mM)
Water Insoluble
생체 내(In Vivo) (개별적으로 순서대로 용매를 제품에 첨가하십시오.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다.
* Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다.
* 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)

원액 준비

생물학적 활성

설명 NH125는 60 nM의 IC50을 가지는 선택적 eEF-2 키나아제 억제제이며, PKC, PKA 및 CaMKII에 대해 125배 이상의 선택성을 보이며 강력한 히스티딘 키나아제 억제제이기도 합니다.
표적
eEF-2 kinase
60 nM
시험관 내(In vitro) C6 신경교종 세포에서 NH125는 총 eEF-2 함량에 영향을 미치지 않으면서 인산화-eEF-2의 세포 내 함량을 감소시키고 G1-S 경계에서 세포 주기 이동을 차단합니다. 이 화합물은 0.7~4.8 μM 범위의 IC50으로 10가지 암세포의 세포 생존력을 강력하게 억제합니다. Envz, PhoQ, BvgS, EvgS를 포함한 히스티딘 단백질 키나아제를 효과적으로 억제하여 옥사실린 내성 황색포도상구균(ORSA), 반코마이신 내성 장구균(VRE), 페니실린 내성 폐렴구균(PRS) 및 기타 그람 양성 및 그람 음성균에 대한 강력한 항균 활성을 생성합니다. 이 화학물질에 의한 EEF2K 억제는 ER 스트레스 유발 작용을 하는 커큐민과 벨케이드에 종양 세포를 더 민감하게 만듭니다.
생체 내(In Vivo) NH125는 SHR에서 혈압을 감소시키고 ROS 생성, 염증성 분자의 유도, SHR 상위 장간막 동맥의 비대를 줄입니다.

프로토콜 (참조)

키나아제 분석:

[1]
  • eEF-2 키나아제 분석

    eEF-2 키나아제 활성은 두 가지 방법으로 측정됩니다: (a) 필터 기반 분석; (b) 항인산화-eEF2 항체를 사용한 면역 블로팅. 이 두 가지 방법 모두 20 μl의 총 부피로 반응을 수행하며, 50 mM HEPES (pH 7.5), 10 mM MgCl2, 1.5 mM CaCl2, 100 μg/ml 칼모듈린, 2 μM His-태그 eEF-2 및 400 nM GST-eEF-2 키나아제, 그리고 ATP 혼합물 [50 μM ATP와 1 μCi (γ-33P)ATP]을 포함합니다. ATP가 없는 키나아제 혼합물은 얼음 위에서 준비된 후 실온에서 15분 동안 사전 배양됩니다. 키나아제 반응은 ATP를 첨가하여 시작되며 30°C에서 30분 동안 진행되도록 합니다. 필터 기반 분석의 경우, 반응은 20 μl의 차가운 1.5% 인산을 첨가하여 중단되며, 반응액 5 μl가 P81 Whatman 인산셀룰로스 종이에 적용됩니다. 종이는 500 ml의 0.5% 인산으로 세 번 세척하고 200 ml의 아세톤으로 한 번 세척합니다. 그런 다음 종이는 공기 건조되고 10 ml의 섬광 혼합물에 담깁니다. 방사능은 Beckton-Dickinson 액체 섬광 계수기를 사용하여 계수됩니다. 면역 블로팅의 경우, 반응은 20 μl의 3× Lamelli 완충액 [190 mM Tris (pH 6.8), 6% SDS, 30% 글리세롤, 15% 2-메르캅토에탄올 및 0.003% 브로모페놀 블루 염료]을 첨가하여 중단됩니다. 샘플은 5분 동안 끓인 후 7% SDS-PAGE로 분리하고 아래에 설명된 대로 웨스턴 블로팅을 위해 처리됩니다. 두 가지 분석 조건 모두 배양 시간과 효소 농도에 대한 반응의 선형성을 보장하기 위해 선택됩니다.
세포 분석:

[1]
  • 세포주

    C6, T98-G, U-138 MG, U-87 MG, A172, A2780, HeLa, PC3, OVCAR-3, MCF-7 cell lines.

  • 농도

    ~10 μM

  • 배양 시간

    48-72 hours

  • 방법

    The viability of cells is measured using an MTT assay. Briefly, 5 × 104 cells are plated in 96-well plates and exposed to various concentrations of this compound for 48–72 h. The formazan product formed after 4 h incubation with MTT is dissolved in 100% DMSO and read at 550 nM using a Dynatech Microplate Reader MR5000.
동물 연구:

[4]
  • 동물 모델

    Spontaneously hypertensive rats (SHR)

  • 용량

    ~500 μg/kg/day

  • 투여

    s.c.

참조

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14583488/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10830522/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23182879/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23812389/

고객 제품 검증

MDA-MB-231 or T47D cells were pretreated with 300 nM NH125 for 1 h, followed by treatment with 8 μM TBMS1 for 24 h. The protein levels were measured by Western blot.

데이터 출처 [ , , Acta Pharmacol Sin, 2018, doi：10.1038/s41401-018-0165-9 ]

NH125 sensitizes NPC cells to lapatinib. NPC cells were treated with lapatinib or DMSO for 48 h in the presence or absence of 0.25 μM NH125. Cell viability was assessed by the CCK-8 assay. Results are expressed as means±standard deviation. *, P<0.05;**, P<0.01 and ***, P<0.001.

데이터 출처 [ , , BMC Cancer, 2016, 16(1):813. ]

CNE-2 cultured in medium supplemented with 10% FBS was treated with a series of concentrations of MK-2206 for 72 hours in the presence or absence of 20 μM HCQ and 0.25 μM NH125. Cleaved caspase-3 was measured by Western blotting, and β-actin was used as a loading control.

데이터 출처 [ , , Drug Des Devel Ther, 2018, 12:2655-2663 ]

Sellecks NH125 인용됨 3 출판물

Tubeimoside-1, a triterpenoid saponin, induces cytoprotective autophagy in human breast cancer cells in vitro via Akt-mediated pathway [Jiang SL Acta Pharmacol Sin, 2018, 10.1038/s41401-018-0165-9] PubMed: 30315250
Inhibiting eEF-2 kinase-mediated autophagy enhanced the cytocidal effect of AKT inhibitor on human nasopharyngeal carcinoma [Zhao YY Drug Des Devel Ther, 2018, Drug Des Devel Ther] PubMed: 30214154
Inhibition of eEF-2 kinase sensitizes human nasopharyngeal carcinoma cells to lapatinib-induced apoptosis through the Src and Erk pathways [Liu L, et al. BMC Cancer, 2016, 16(1):813] PubMed: 27756261

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