데이터시트

생물학적 설명

특이성	Nurr1 Antibody [L9M11]는 총 Nurr1 단백질의 내인성 수준을 검출합니다.
배경	중뇌 도파민성 뉴런의 특성화, 생존 및 유지에 필수적인 고아 핵 수용체 전사 인자인 Nurr1(NR4A2)은 ERK에 의한 Ser336 인산화 부위를 포함하는 N-말단 A/B 전사 활성화 도메인(AF-1), NGFI-B 반응 요소(NBRE: AAAGGTCA)를 단량체 또는 RXR 헤테로이합체 내 IR0 반쪽 자리로 인식하는 두 개의 아연 핑거 모티프를 특징으로 하는 중앙 DNA 결합 도메인(DBD), 보조 인자 모집을 촉진하는 유연한 힌지 영역, 그리고 전통적인 소수성 포켓은 없지만 소수성 패치를 통해 보조 조절 인자 도킹을 위한 H11/H12에 하전된 나선형 홈을 노출하는 C-말단 리간드 결합 도메인(LBD)으로 구성된 모듈식 아키텍처를 나타냅니다. AF-1/2 시너지를 통해 구성적으로 활성화된 Nurr1은 크로마틴 루핑 및 CBP/p300 공동 활성화와 RXRα 헤테로이합체화에 의해 도파민성 유전자 프로그램(티로신 수산화효소, VMAT2, DAT, Pitx3)을 구동하여 복합 NBRE-DR5 요소에서 전사를 증폭시키는 반면, AF-1을 강화하는 ERK 인산화, CtBP를 통한 억제를 위한 K185에서의 SUMO화, RXR 상호작용을 방해하는 GSK3β 인산화와 같은 번역 후 변형은 발달 및 스트레스 반응 동안 활동을 미세 조정하여 전구 세포 증식을 위한 Wnt/β-카테닌과 신경 보호를 위한 BDNF/TrkB에 연결됩니다. 이형 접합 돌연변이(R502X)는 TH+ 뉴런 감소를 동반한 유전성 파킨슨증을 유발하는 반면, 연령 관련 감소는 산발성 PD에서 DA 손실을 악화시키며 Nurr1을 핵심 요소로 자리매김합니다.

특이성

Nurr1 Antibody [L9M11]는 총 Nurr1 단백질의 내인성 수준을 검출합니다.

배경

중뇌 도파민성 뉴런의 특성화, 생존 및 유지에 필수적인 고아 핵 수용체 전사 인자인 Nurr1(NR4A2)은 ERK에 의한 Ser336 인산화 부위를 포함하는 N-말단 A/B 전사 활성화 도메인(AF-1), NGFI-B 반응 요소(NBRE: AAAGGTCA)를 단량체 또는 RXR 헤테로이합체 내 IR0 반쪽 자리로 인식하는 두 개의 아연 핑거 모티프를 특징으로 하는 중앙 DNA 결합 도메인(DBD), 보조 인자 모집을 촉진하는 유연한 힌지 영역, 그리고 전통적인 소수성 포켓은 없지만 소수성 패치를 통해 보조 조절 인자 도킹을 위한 H11/H12에 하전된 나선형 홈을 노출하는 C-말단 리간드 결합 도메인(LBD)으로 구성된 모듈식 아키텍처를 나타냅니다. AF-1/2 시너지를 통해 구성적으로 활성화된 Nurr1은 크로마틴 루핑 및 CBP/p300 공동 활성화와 RXRα 헤테로이합체화에 의해 도파민성 유전자 프로그램(티로신 수산화효소, VMAT2, DAT, Pitx3)을 구동하여 복합 NBRE-DR5 요소에서 전사를 증폭시키는 반면, AF-1을 강화하는 ERK 인산화, CtBP를 통한 억제를 위한 K185에서의 SUMO화, RXR 상호작용을 방해하는 GSK3β 인산화와 같은 번역 후 변형은 발달 및 스트레스 반응 동안 활동을 미세 조정하여 전구 세포 증식을 위한 Wnt/β-카테닌과 신경 보호를 위한 BDNF/TrkB에 연결됩니다. 이형 접합 돌연변이(R502X)는 TH+ 뉴런 감소를 동반한 유전성 파킨슨증을 유발하는 반면, 연령 관련 감소는 산발성 PD에서 DA 손실을 악화시키며 Nurr1을 핵심 요소로 자리매김합니다.

사용 정보

응용

IHC

희석

IHC

1:200

반응성

Rat

출처

Mouse Monoclonal Antibody

MW

보관 완충액

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

보관
(수령일로부터)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

실험 방법
IHC	Experimental Protocol： Deparaffinization/Rehydration 1. Deparaffinize/hydrate sections: 2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each. 3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each. 4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each. 5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each. 6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min. Staining 1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each. 2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min. 3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 4. Wash sections in wash buffer for 5 min. 5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature. 6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C. 7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each. 8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature. 9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each. 10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use. 11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity. 12. Immerse slides in dH2O. 13. If desired, counterstain sections with hematoxylin. 14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each. 16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

실험 방법

IHC

Experimental Protocol：

Deparaffinization/Rehydration

1. Deparaffinize/hydrate sections:

2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.

3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.

4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.

5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.

6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.

Staining

1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.

2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.

3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

4. Wash sections in wash buffer for 5 min.

5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.

6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.

7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.

8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.

9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.

10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.

11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.

12. Immerse slides in dH2O.

13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.

14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.

16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

참조

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22405837/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35529439/

Nurr1 Antibody [L9M11]

생물학적 설명

사용 정보

참조

적용 데이터