Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다. * Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다. * 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)
원액 준비
생물학적 활성
설명
NVP-BVU972는 14 nM의 IC50을 갖는 선택적이고 강력한 Met (c-Met) 억제제입니다.
표적
Met
14 nM
시험관 내(In vitro)
NVP-BVU972는 MET 키나아제를 강력하게 억제하지만, 가장 밀접하게 관련된 키나아제 RON을 포함한 다른 키나아제에 대해서는 1000 nM 이상의 IC50 값을 나타내며 낮은 억제를 보입니다. 이 화합물은 또한 GTL-16 세포에서 구성적 MET 인산화를 억제하거나 A549 세포에서 HGF 자극 MET 인산화를 각각 7.3 nM 및 22 nM의 IC50 값으로 억제합니다. MET 유전자 증폭 세포주인 GTL-16, MKN-45 및 EBC-1의 성장을 각각 66 nM, 82 nM 및 32 nM의 IC50 값으로 강력하게 방지합니다. 이 화합물 스크리닝에서 높은 빈도와 일치하게, Y1230 및 D1228 돌연변이는 BaF3 세포주에서 측정된 IC50 값에 극적인 변화를 일으킵니다. V1155L에 의해 유발된 저항성은 이 화학물질에 더 제한적입니다. 야생형 TPR-MET를 발현하는 BaF3 세포에 적용할 때 TPR-MET 인산화의 용량 의존적 감소가 나타납니다. Y1230H 및 D1228A 돌연변이 모두 이 화합물의 효과를 없앴지만 AMG 458의 효과는 없애지 못했습니다. 그러나 F1200I 및 L1195V는 TPR-MET 인산화를 방지하는 이 화합물의 효능을 방해합니다.
효소 활성은 Eu 표지된 항인산화티로신 항체 (형광 공여체)와 기질 펩타이드의 바이오틴에 결합하는 스트렙타비딘에 접합된 알로피코시아닌 (형광 수용체)을 이용하여 티로신 인산화를 검출하는 시간 분해 형광 공명 에너지 전달 (TR-FRET) 분석법으로 측정됩니다. 각 변이체에 대해 이 화합물이 없는 상태에서 ATP에 대한 Km 농도를 결정하고, 키나아제 반응의 ATP 농도는 Km (MET wt의 경우 4 μM, MET Y1230H 및 MET F1200I의 경우 1 μM)으로 설정됩니다. 이는 DMSO에 용해 및 희석되어 4회 반복 분석됩니다. 키나아제 반응은 50 mM Tris-HCl pH 7.5, 8 mM MgCl2, 4 mM MnCl2, 0.05 % Tween 20, 0.05% 소 혈청 알부민, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.1 mM Na3VO4 조성의 용액에서 흰색 1536웰 플레이트에서 실온에서 수행됩니다. 이 화학물질과 효소는 2 μL의 부피로 20분 동안 배양된 후, 1 μL의 ATP와 1 μL의 바이오틴화된 펩타이드 기질(PTK1)을 최종 농도 Km 및 1 μM로 각각 첨가합니다. 반응액 내 효소 농도는 MET wt의 경우 5 nM, F1200I 및 Y1230H 변이체의 경우 4 nM입니다. 90분 후, 1 μL의 정지/검출 용액을 첨가하여 최종 농도가 10 mM EDTA, 3.5 nM Eu 표지된 항인산화티로신 항체 PY20, 10 nM 스트렙타비딘 알로피코시아닌이 되도록 하여 반응을 중지합니다. 시간 분해 형광 공명 에너지 전달은 Envision 플레이트 리더 (여기 320 nm, 방출 615 nm 및 665 nm)에서 측정됩니다.
BaF3 cells containing TPR-MET or various mutants thereof are grown in RPMI 1640 medium containing 10% fetal calf serum. For maintenance of parental BaF3 cells the medium is additionally supplemented with 10 ng/mL interleukin-3 (IL-3). For proliferation assays, BaF3 cells are seeded on 96-well-plates in triplicates at 104 cells per well and incubated with various concentrations of this compound for 72 hours followed by quantification of viable cells using a resazurin sodium salt dye reduction readout. IC50 values are determined with the XLFit Excel Add-In using a 4-parameter dose response model.
참조
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21697284/
Sellecks NVP-BVU972 인용됨 1 출판물
A chemical screen for modulators of mRNA translation identifies a distinct mechanism of toxicity for sphingosine kinase inhibitors
[ PLoS Biol, 2021, 19(5):e3001263]
반품 정책
Selleck Chemical의 무조건 반품 정책은 고객에게 원활한 온라인 쇼핑 경험을 보장합니다. 구매에 어떤 식으로든 불만족하시면, 수령일로부터 7일 이내에 모든 품목을 반품하실 수 있습니다. 제품 품질 문제(프로토콜 관련 문제 또는 제품 관련 문제)가 발생하는 경우, 원래 구매일로부터 365일 이내에 모든 품목을 반품하실 수 있습니다. 제품 반품 시 아래 지침을 따르십시오.
배송 및 보관
Selleck 제품은 실온에서 운송됩니다. 실온에서 제품을 받으셨더라도 안심하십시오. Selleck 품질 검사 부서에서 한 달간의 상온 보관이 분말 제품의 생물학적 활성에 영향을 미치지 않음을 확인하는 실험을 수행했습니다. 수령 후, 데이터시트에 설명된 요구 사항에 따라 제품을 보관하십시오. 대부분의 Selleck 제품은 권장 조건에서 안정적입니다.
