P22077

P22077은 최근 발견된 USP7 억제제 P5091의 유사체입니다. 이 화합물은 테스트된 농도 범위에서 DEN1 및 SENP2core에 대해 무시할 수 있는 활성을 보이지만, 8 μM의 IC50으로 USP7을 억제합니다. [1]

이 화학물질의 DUB, 시스테인 프로테아제 및 기타 단백질 분해 효소 계열에 대한 시험관 내 억제 활성은 USP7 및 밀접하게 관련된 DUB USP47을 억제함을 보여줍니다. 이 물질은 세포 용해물에서 15–45 mM 농도로 소규모 DUB 하위 집합을 억제합니다. 이 화합물은 낮은 마이크로몰 범위의 EC50 값으로 (종양) 세포 사멸을 유도합니다. 그 억제는 광범위 특이성 억제제와 구별되는 유비퀴틴화된 단백질 수준의 변화를 보였습니다. 또한, 정량적 MS는 E3 Ubiquitin ligase 구성 요소인 RBX1, DCAF7, DCAF11 및 DNA 손상 결합 단백질 1 (DDB1)이 이 화학물질로 세포 처리 시 감소함을 시사합니다. [2]

P22077에 의한 USP7 억제는 또한 생체 내에서 흑색종 종양 성장을 억제합니다.

• UbL-EKL 분석

  달리 명시되지 않는 한, 재조합 이소펩티다제는 UbL-EKL 및 EKL substrate I와 각각 최종 농도 20, 50, 20 nM이 되도록 검은색 벽의 96-웰 플레이트의 한 웰에서 총 부피 100 μL로 혼합됩니다. 모든 희석은 이소펩티다제 분석 버퍼(20 mM Tris-HCl, pH 8.0, 2 mM CaCl₂ 및 2 mM β-메르캅토에탄올)에서 수행됩니다. 시간 경과에 따른 형광 강도 증가는 Perkin Elmer Envision 형광 플레이트 리더에서 사용된 형광 공명 에너지 전달 펩티드에 해당하는 여기 및 방출 필터로 결정됩니다. 달리 명시되지 않는 한, 순 상대 형광 단위(RFU)는 각 데이터 포인트에서 공백 RFU 값(이소펩티다제 분석 버퍼에서 20 nM EKL substrate I 또는 100 nM EKL substrate II)을 빼서 결정됩니다. SENP2core, SUMO3-EKL 민감도 실험은 0–100 fM SENP2core를 50 nM SUMO3-EKL 및 100 nM EKL substrate I와 위와 같이 총 부피 100 μL로 혼합하여 수행됩니다.

• 동물 모델

  Female SD nude mice

• 용량

  10 mg/kg

• 투여

  i.v.