Refametinib (RDEA119)

카탈로그 번호S1089 배치:S108901

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기술 자료

화학식

C19H20F3IN2O5S
분자량 572.34 CAS 번호 923032-37-5
용해도 (25°C)* 시험관 내(In vitro) DMSO 100 mg/mL (174.72 mM)
Ethanol 100 mg/mL (174.72 mM)
Water Insoluble
생체 내(In Vivo) (개별적으로 순서대로 용매를 제품에 첨가하십시오.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml은 약간 용해되거나 불용해됨을 의미합니다.
* Selleck은 모든 화합물의 용해도를 자체적으로 테스트하며, 실제 용해도는 게시된 값과 약간 다를 수 있습니다. 이는 정상적인 현상이며, 약간의 배치 간 변동으로 인해 발생합니다.
* 실온 배송 (안정성 테스트 결과 이 제품은 냉각 조치 없이 배송될 수 있음을 보여줍니다.)

원액 준비

생물학적 활성

설명 Refametinib (RDEA119, Bay 86-9766)는 MEK1 및 MEK2에 대한 강력하고 ATP 비경쟁적이며 고도로 선택적인 억제제로, IC50는 각각 19 nM 및 47 nM입니다.
표적
MEK1
(Cell-free assay)		 MEK2
(Cell-free assay)
19 nM 47 nM
시험관 내(In vitro) Refametinib (RDEA119)는 MEK1/2 효소의 알로스테릭 포켓에 선택적으로 직접 결합하며, A375, SK-MEI-28, Colo205, HT-29 및 BxPC3를 포함한 여러 종양 세포주에서 세포 증식 억제에 매우 효과적입니다. 이는 기능 획득 V600E BRAF 돌연변이를 가진 인간 암 세포주의 부착 의존적 성장을 GI50 값 67~89 nM 범위로 억제합니다. 부착 비의존적 조건에서, 테스트된 모든 세포주의 GI50 값은 유사합니다 (40-84 nM). 이 화합물은 중추 신경계 관련 부작용 가능성을 줄이는 조직 선택성을 보입니다. BRAF 돌연변이를 가진 4개 세포주의 증식을 강력하게 억제하지만, 야생형 BRAF를 가진 다른 4개 세포에는 효과가 없거나 미미합니다 (IC50 0.034-0.217 μM vs. 1.413-34.120 μM). 선택된 세포주 OCUT1 (BRAF V600E(+), PIK3CA H1047R(+)) 및 SW1376 (BRAF V600E(+))에서 Refametinib의 억제 효과는 mTOR 억제제인 템시롤리무스와의 병용으로 강화됩니다. Refametinib과 템시롤리무스는 또한 선택적으로 테스트된 OCUT1 및 KAT18 세포의 자가포식 사멸에 대한 시너지 효과를 보입니다.
생체 내(In Vivo) RDEA119를 50 mg/kg 용량으로 14일 동안 1일 1회 경구 투여하면 인간 흑색종 A375 종양 모델에서 68%의 종양 성장 억제 (TGI)가 나타납니다. 이 화합물을 25 mg/kg 용량으로 14일 동안 1일 1회 투여하면 인간 결장암 Colo205 종양 모델에서 123%의 TGI가 발생합니다 (TGI > 100%는 종양이 시작 부피보다 작아질 때 발생합니다). 25 mg/kg 용량을 14일 동안 1일 1회 투여하면 HT-29 및 A431 종양에 대해 각각 56% 및 67%의 TGI를 생성합니다.

프로토콜 (참조)

키나아제 분석:

[1]
  • MEK 키나아제 분석

    키나아제 비활성 생쥐 ERK2 (mERK2) K52A/T183A는 pET21a 벡터를 사용하여 발현된 Escherichia coli에서 친화도 정제됩니다. MEK1 키나아제 활성은 mERK2 K52A T183A를 기질로 사용하여 결정됩니다. 재조합 MEK1 효소 (5 nM)는 먼저 25 mM HEPES (pH 7.8), 1 mM MgCl2, 50 mM NaCl, 0.2 mM EDTA 및 50 μM ATP 존재 하에 0.02 단위 또는 1.5 nM의 RAF1에 의해 25 °C에서 30분 동안 활성화됩니다. 반응은 2 μM의 mERK2K52A T183A 및 2.5 μCi [γ-33P] ATP를 총 부피 20 μL에 첨가하여 시작됩니다. MEK2 키나아제 활성은 RAF1에 의한 활성화가 필요하지 않고 11 nM의 MEK2 효소 (활성)가 분석에 사용된다는 점을 제외하고는 유사하게 결정됩니다. Refametinib (RDEA119)에 대한 키나아제 프로파일링은 Invitrogen에서 Select Screen Kinase Profiling Service를 사용하여 수행됩니다. Z'-LYTE 생화학적 분석이 사용됩니다. 이 화합물은 10 μM 농도로 205개의 키나아제에 대해 4중으로 분석됩니다.
세포 분석:

[1]
  • 세포주

    A375, SK-MEI-28, Colo205, HT-29 and BxPC3 cells

  • 농도

    10-1000 nM

  • 배양 시간

    48 hours

  • 방법

    For anchorage-dependent growth inhibition experiments, cells are plated in white 384-well plates at 1,000/20 μL/well or white 96-well microplates at 4,000/100 μL/well. After 24-h incubation at 37 °C, 5% CO2, and 100% humidity, Refametinib (RDEA119) is incubated for 48 hours at 37 °C and assayed using CellTiter-Glo. For the 96-well anchorage-independent growth assay, wells of an “ultralow binding” plate (Corning) are filled with 60 μL of a 0.15% agarose solution in complete RPMI 1640. Then, 60 μL of complete RPMI 1640 containing 9,000 cells in 0.15% agarose are added per well. After 24 hour, 60 μL of a 3 × drug solution in agarose-free complete RPMI 1640 are added. After 7 d, 36 μL of 6 × 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)- 2H-tetrazolium, inner salt reagent are added per well. After 2 hours at 37 °C, absorbance at 490 nm is determined on the M5 plate reader.
동물 연구:

[1]
  • 동물 모델

    Female athymic nude mice are injected s.c. with A375, HT-29 and A431 tumor; male athymic nude mice with Colo205 tumor.

  • 용량

    25 or 50 mg/kg

  • 투여

    Orally once daily for 14 days

참조

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19706763/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21351275/

고객 제품 검증

RDEA119 (1 µM) or JTP-74057 (0.1 µM) abolished the effects of G1 on DAPK1 and NR2B phosphorylation.

데이터 출처 [ , , J Neurosci, 2012, 32(14): 4887-900 ]

Western blot analyses of downstream effector proteins of the MAPK signaling pathway. The panel of CRC cell lines was treated with or without refametinib (1 lM) for 72 h. a-Tubulin served as a loading control.

데이터 출처 [ , , Mol Oncol, 2018, 12(8):1398-1409 ]

B: ERK and p-ERK1/2 levels in response to MEKi treatment. Tra = trametinib, Ref = refametinib, Sel = selumetinib, Bin = binimetinib. Films were intentionally overexposed to detect signal in lanes with low p-ERK1/2 expression. For each cell line all treatment conditions were performed as part of the same experiment. All experimental findings were confirmed in independent experiments performed in triplicate. Note: membranes incubated with p-ERK1/2 antibody were overexposed to capture all remaining signal after MEKi treatment. WB images have been cut to keep the same sample order. All membranes incubated with the same antibody have been exposed for the same period of time.

데이터 출처 [ , , Am J Cancer Res, 2016, 6(10):2235-2251 ]

MEK inhibition of hypoosmolar-induced ADM. In all panels KrasG12D acinar explants were isolated and starved overnight. The next day explants were incubated with hypoosmotic (150 mOsm) medium for 5 min and then refametinib was added at the indicated concentrations. (A) HRP assay from two mice was performed immediately after the 5 min hypoosmotic treatment. Mean ± SD, two-tailed t-test. (B) Acinar explants were seeded in collagen and ADM was quantified at day 4. N = number of mice. Mean ± SD, two-tailed t-test. (C) Representative bright field images of acinar explants described in B. Dashed lines highlight acinar cell clusters, arrowheads: duct-like structures. Scale bars = 50 μm.

데이터 출처 [ , , EBioMedicine, 2017, 15:90-99 ]

Sellecks Refametinib (RDEA119) 인용됨 29 출판물

System analysis links SMARCD3 regulons to growth signaling and MEK inhibitor response in everolimus-resistant ER+ breast cancer cells [ Cell Rep Med, 2025, 6(11):102425] PubMed: 41260207
Histone deacetylase inhibitors promote breast cancer metastasis by elevating NEDD9 expression [ Signal Transduct Target Ther, 2023, 8(1):11] PubMed: 36604412
Salmonella effector SopB reorganizes cytoskeletal vimentin to maintain replication vacuoles for efficient infection [ Nat Commun, 2023, 14(1):478] PubMed: 36717589
Signaling-induced systematic repression of miRNAs uncovers cancer vulnerabilities and targeted therapy sensitivity [ Cell Rep Med, 2023, S2666-3791(23)00367-1] PubMed: 37734378
Signaling-induced systematic repression of miRNAs uncovers cancer vulnerabilities and targeted therapy sensitivity [ Cell Rep Med, 2023, 4(10):101200] PubMed: 37734378
Protein Tyrosine Phosphatase Non-Receptor 11 (PTPN11/Shp2) as a Driver Oncogene and a Novel Therapeutic Target in Non-Small Cell Lung Cancer (NSCLC) [ Int J Mol Sci, 2023, 24(13)10545] PubMed: 37445722
Anatomic position determines oncogenic specificity in melanoma [ Nature, 2022, 604(7905):354-361] PubMed: 35355015
NOTCH signaling limits the response of Low Grade Serous Ovarian Cancers to MEK inhibition [ Mol Cancer Ther, 2022, MCT-22-0004] PubMed: 36198031
Secondary resistance to anti-EGFR therapy by transcriptional reprogramming in patient-derived colorectal cancer models [ Genome Med, 2021, 13(1):116] PubMed: 34271981
Targeting the PI3K and MAPK pathways to improve response to HER2-targeted therapies in HER2-positive gastric cancer [ J Transl Med, 2021, 19(1):184] PubMed: 33933113

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