SC79

SC79는 HEK293, HeLa, HL60, NB4 및 HsSulton(B 세포) 세포에서 PH_AKTM-GFP 원형질막 전위를 억제하고 세 가지 Akt 동형체 모두의 인산화를 증가시킵니다. 이 화합물은 신경 흥분독성을 감소시키고 뇌졸중으로 인한 신경 세포 사멸을 방지합니다. [1] 또한 BRAT1 녹다운 세포의 증식을 회복시키고 MitoSox 양성 세포의 미토콘드리아에서 초과산화물 생성을 감소시킵니다. [2]

영구적인 국소 뇌 허혈 마우스 모델에서 SC79 (0.04 mg/g, i.p.)는 Akt의 세포질 활성화를 가능하게 하고 Akt 신호 전달의 1차 세포 기능을 재현하여 신경 생존을 증가시킵니다. [1]

• Akt의 세포질 인산화

  Hela 세포는 1시간 동안 혈청을 굶긴 후 IGF (100ng/mL) 또는 SC79 (4 μg/mL)로 30분간 처리했습니다. 세포는 250mM 슈크로스, 20mM HEPES, 10mM KCl, 1.5mM MgCl₂, 1mM EDTA, 1mM EGTA에 프로테아제 억제제를 보충한 용해 버퍼에 용해했습니다. 세포는 25G 바늘을 통해 여러 번 통과시킨 후 얼음 위에서 20분간 보관했습니다. 이때 총 세포 용해물을 취했습니다. 세포 용해물은 100,000g에서 30분간 원심분리했습니다. 상층액은 세포질 분획으로 수집했습니다. 펠릿은 용해 버퍼로 세척했으며 막 분획을 나타냅니다. 총 세포 용해물, 세포질 및 막 분획은 SDS-PAGE로 분리하고 웨스턴 블로팅으로 인산화 Akt (S473), 총 Akt, 튜불린 (세포질 마커) 및 Orai1 (막 마커)에 대해 분석했습니다.

• 세포주

  HsSultan and NB4 cells

• 농도

  8 μg/mL

• 배양 시간

  24 h

• 방법

  HsSultan or NB4 cells (2.5 × 10⁵) are plated in a 24-well plate in 500 μL of phenol red-free RPMI medium supplemented with 10% FBS. After incubation for 24 hours, each compound (8 µg/mL) is added and cultured for overnight (16–20 h). Fifty microliters of MTT solution (5 mg/mL in PBS) are added to each well. Following 2 hrs incubation, the purple formazan crystals are dissolved by directly adding in 500 μL of isopropanol with 0.1 M HCl to each well. After clearing the cell debris by centrifugation, the absorbance is measured at a wavelength of 570 nm.

• 동물 모델

  Permanent focal cerebral ischemia mouse model

• 용량

  0.04 mg/g

• 투여

  i.p.