데이터시트

생물학적 설명

특이성	SLC22A2/OCT2 Antibody [D23A15]는 총 SLC22A2/OCT2 단백질의 내인성 수준을 검출합니다.
배경	SLC22A2는 Organic Cation Transporter 2 (OCT2)로도 알려져 있으며, SLC22 계열의 다특이성 촉진 수송체(~63 kDa)입니다. 신장 근위세뇨관 세포의 기저측 막에 주로 발현되는 OCT2는 12개의 막관통 도메인을 가지고 있으며, 이는 안쪽을 향하는 기질 결합 공동을 형성합니다. OCT2는 구조적 안정성을 위한 당화 부위를 포함하는 큰 세포외 루프 2를 가지고 있으며, Asp449 및 Trp222와 같은 핵심 잔기는 양이온 인식 및 수송 중 양성자화 상태 관리에 중요합니다. OCT2는 ATP 또는 Na⁺ 결합을 필요로 하지 않고 전기화학적 기울기(일반적으로 -50 ~ -70 mV)를 활용하여 교대 접근 메커니즘을 통해 작동합니다. 이 수송체는 메트포르민, 시스플라틴, 히스타민, 도파민 및 크레아티닌을 포함한 유기 양이온을 양방향으로 이동시키며, 방향성 분비를 위한 세뇨관 세포로의 기저측 흡수에 주로 관여합니다. OCT2는 더 작은 단일가 양이온에 대해 약간의 선호도(Km 10–500 μM)를 보이며, 기질 폐색에 의해 유발되는 일시적인 기공 개방에 의존하여 기질 접근성을 바꿉니다. 양전하를 띠는 아민과의 정전기적 상호작용은 양이온 선택성을 가능하게 하며, 음이온은 제외됩니다. 이러한 활동은 전신 독소, 신경전달물질을 제거하고 간, 뉴런 및 태반에서 이종물질의 처분에 중요합니다. 일반적인 OCT2 변이체(예: R270S, A270S)는 특정 기질에 대한 수송 능력을 20-50% 감소시켜 백금 항암제에 의한 신독성 위험을 증가시키고 당뇨병에서 메트포르민 효능을 감소시킵니다.

특이성

SLC22A2/OCT2 Antibody [D23A15]는 총 SLC22A2/OCT2 단백질의 내인성 수준을 검출합니다.

배경

SLC22A2는 Organic Cation Transporter 2 (OCT2)로도 알려져 있으며, SLC22 계열의 다특이성 촉진 수송체(~63 kDa)입니다. 신장 근위세뇨관 세포의 기저측 막에 주로 발현되는 OCT2는 12개의 막관통 도메인을 가지고 있으며, 이는 안쪽을 향하는 기질 결합 공동을 형성합니다. OCT2는 구조적 안정성을 위한 당화 부위를 포함하는 큰 세포외 루프 2를 가지고 있으며, Asp449 및 Trp222와 같은 핵심 잔기는 양이온 인식 및 수송 중 양성자화 상태 관리에 중요합니다. OCT2는 ATP 또는 Na⁺ 결합을 필요로 하지 않고 전기화학적 기울기(일반적으로 -50 ~ -70 mV)를 활용하여 교대 접근 메커니즘을 통해 작동합니다. 이 수송체는 메트포르민, 시스플라틴, 히스타민, 도파민 및 크레아티닌을 포함한 유기 양이온을 양방향으로 이동시키며, 방향성 분비를 위한 세뇨관 세포로의 기저측 흡수에 주로 관여합니다. OCT2는 더 작은 단일가 양이온에 대해 약간의 선호도(Km 10–500 μM)를 보이며, 기질 폐색에 의해 유발되는 일시적인 기공 개방에 의존하여 기질 접근성을 바꿉니다. 양전하를 띠는 아민과의 정전기적 상호작용은 양이온 선택성을 가능하게 하며, 음이온은 제외됩니다. 이러한 활동은 전신 독소, 신경전달물질을 제거하고 간, 뉴런 및 태반에서 이종물질의 처분에 중요합니다. 일반적인 OCT2 변이체(예: R270S, A270S)는 특정 기질에 대한 수송 능력을 20-50% 감소시켜 백금 항암제에 의한 신독성 위험을 증가시키고 당뇨병에서 메트포르민 효능을 감소시킵니다.

사용 정보

응용

IHC, FCM

희석

IHC	FCM
1:40-1:125	1:4000

반응성

Human

출처

Mouse Monoclonal Antibody

MW

보관 완충액

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

보관
(수령일로부터)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

실험 방법
IHC	Experimental Protocol： Deparaffinization/Rehydration 1. Deparaffinize/hydrate sections: 2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each. 3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each. 4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each. 5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each. 6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min. Staining 1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each. 2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min. 3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 4. Wash sections in wash buffer for 5 min. 5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature. 6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C. 7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each. 8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature. 9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each. 10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use. 11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity. 12. Immerse slides in dH2O. 13. If desired, counterstain sections with hematoxylin. 14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each. 16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

실험 방법

IHC

Experimental Protocol：

Deparaffinization/Rehydration

1. Deparaffinize/hydrate sections:

2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.

3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.

4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.

5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.

6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.

Staining

1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.

2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.

3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

4. Wash sections in wash buffer for 5 min.

5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.

6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.

7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.

8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.

9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.

10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.

11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.

12. Immerse slides in dH2O.

13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.

14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.

16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

참조

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29309257/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31682169/

SLC22A2/OCT2 Antibody [D23A15]

생물학적 설명

사용 정보

참조

적용 데이터